1、ICS 65. 150 B 51 喧嚣中华人民共和国国家标准GB/T 26619-2011 斑-+岳丁3对Giant tiger prawn 虾2011-06-16发布数码防伪中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局中国国家标准化管理委员会2011-11-01实施发布目U昌本标准的附录C为规范性附录，附录A、附录B为资料性附录。本标准由中华人民共和国农业部提出。本标准由全国水产标准化技术委员会海水养殖分技术委员会归口。本标准起草单位:中国水产科学研究院黄海水产研究所、中国海洋大学。本标准主要起草人:张岩、于函、肖永双、张华。G/T 26619-2011 I GB/T 26619-2011 斑+
2、寸3对虾1 范围本标准规定了斑节对虾CPenaeusmonodon)的主要形态特征、生长与繁殖特性、遗传学特性以及检测方法。本标准适用于斑节对虾种质的检测和鉴定。2 规范性引用文件下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。GB/T 18654. 12 养殖鱼类种质检验第12部分:染色体组型分析GB/T 19782 中国对虾3 术语和定义下列术语和定义适用于本标准。3. 1 体长body
3、 length 眼柄基部或额角基部眼眶缘到尾节末端的长度。3.2 头胸甲长carapace length 眼窝后缘连线中央到头胸甲中线后缘的长度。4 名称与分类4. 1 学名斑节对虾Penaeusmondon Fabricius, 1798 0 4.2 分类位置节肢动物门CArthropoda) ，甲壳纲CCrustacea) ，十足目CDecapoda)，对虾科CPenaeidae)，对虾属CPenaeus)。5 形态特征5. 1 外形体表光滑，壳稍厚，体色由暗绿色、深棕色和浅黄色横斑相间排列，构成腹部鲜艳斑纹。腹部游泳足浅蓝色，原肢前面黄色，其缘毛挑红色，第2、3顿足外肢刚毛桃红色。斑节对
4、虾的外部形态见图1。:1 ; 龟固1斑节对虾外部形态1 GB/T 26619-2011 额角较平直，末端较粗，稍向上弯，伸至第1触角柄末端，上缘具7齿8齿，胃上刺与第1齿距离较大，约为第2齿至第3齿距离的2倍;额角后脊伸至头胸甲后缘附近。额角侧脊较低而钝，伸至胃上剌下方。头胸甲具眼眶触角沟、颈沟。额角侧沟较深，伸至胃上剌下方。额角后脊中央沟明显，但较浅而窄，断续后伸。元额胃沟。肝脊较宽而钝，前半水平伸，后部稍低。眼胃脊约占头胸甲眼眶缘与肝刺间距离的后部2/50头胸甲具触角剌、肝剌、胃上刺。眼眶角圆形。前侧角圆元颊刺;腹部第4节中部至第6节背中央具纵脊。第6节长为高的1.1倍。尾节稍长于第6节，
5、末端尖，无侧缘刺。对虾头胸甲分区情况参见附录A。第1触角柄刺伸至第1节中部，外缘末端刺较小，内侧附肢伸至柄第1节末或稍超出，第1触角鞭较短，下鞭约为头胸甲的2/3，上鞭梢短于下鞭，上鞭基部较粗部分约占鞭长的1/3。第2触角鳞片超出第1触角柄末端。第3额足伸至第1触角柄第3节末端(成体雄性)，雌性及幼雄性伸至柄第1节末端，雄性指节几乎与掌节等长，接于掌的近末端1/5处，掌末有丛毛。雌性者指为掌长的1/2 1/3。第1步足伸至或稍超出第2触角柄腕末端。第3步足最长，伸至第1触角柄末，或以指节超出之。第5步足伸至第2触角柄第1节中部。第1步足有基节剌和座节刺，第2步足仅有基节刺。第1步足至第4步足具
6、外肢，第5步足无外肢(对虾外形、体节、附肢情况参见附录A)。5.2 雄性交接器背中叶末端突小，半圆形，侧叶较宽，顶端较圆;明显地超出中叶之外，末部有雏形小齿。斑节对虾雄性交接器见图20llil-LE仨NEts-tL 只MH刽叶司2s45酝-Esf、巧nsssF EEN -It-iE雄性交接器腹丽雄性交接器侧面斑节对虾雄性交接器5.3 雄性附肢略呈梯形，长为最大宽的近2倍，末半部较窄，基部较宽，边缘着生硬刺。斑节对虾雄性附肢见图302 - 1 mm 图3斑节对虾雄性附肢GB/T 26619-2011 5.4 雌性交接器第4步足间有一粗大的钙化隆起，边缘密生较长的刚毛，形似花冠，后有1端突与纳精囊
7、前中央纵裂口相接。纳精囊盘状，宽大于长，约为长的1.2倍，中央纵行的开口边缘厚大成唇。斑节对虾雌性交接器见图4。图4斑节对虾雌性交接器5.5 可量性状5.5. 1 第1触鞭较长，约为头胸甲长的2/305.5.2 眼胃脊约占头胸甲眼眶缘与肝刺间距离的后部2/505.5.3 第6节长为高的1.1倍。5.5.4 尾节稍长于第6节。5.5.5 第1触角鞭下鞭约为头胸甲的2/3，上鞭基部较粗部分约占鞭长的1/305.6 可数性状额角齿式78/23，以7/3者较多。6 生长与繁殖6.1 寿命在天然水域中雄虾寿命一般为1年1.5年，雌虾寿命大约2年。6.2 体长体重关系斑节对虾南海西北部水域野生群体的体长与
8、体重关系见式(1)、式(2): 雌虾:W=1.1274X10-5L3.0411(r=O.9953，=52) ( 1 ) 雄虾:W=7.636 6X10-6L3.1151 (r=O. 9815，=48) . ( 2 ) 式中:W一一体重，单位为克(g);L一一体长，单位为毫米(mm)。不同日龄养殖斑节对虾的体长、体重实测值参见附录B。6.3 繁殖6.3. 1 生物学最小型斑节对虾第1次性成熟的最小个体体长为189mm，最小体重95go 6.3.2产卵斑节对虾的繁殖期较长，7月至第二年2月均为繁殖产卵期。卵子分批发育成熟，分次产出。3 G/T 26619-2011 6.3.3 繁殖力斑节对虾的怀卵
9、量因个体大小而异，为109X 104粒/尾211.8 X 104粒/尾，平均154X104粒，产卵量30X104粒100X104粒。6.3.4 卵子特征斑节对虾卵呈球形，黄绿色，稍透明，卵径o.27 mmO. 31mm，平均0.29mmo在静止水中，卵慢慢下沉池底。卵裂的方式为全均等分裂。7 细胞遗传学特性斑节对虾的染色体数目为2n=88。8 生化遗传学特性8. 1 同工酶酶谱斑节对虾成体肌肉中乳酸脱氢酶(LDH)同工酶的电泳图谱见图5，表现为-，-0.条酶带。图5斑节对虾成体肌肉中LDH同工酶电泳图谱8.2 群体遗传变异范围斑节对虾三亚种群和纳顿岛种群的平均杂合度分别是O.359 6和0.3
10、254，厦门养殖群体的多态位点比例P为61.96%，预期杂合度H.为0.151，观察杂合度日。为0.12009 检测方法9. 1 形态特征长度测量用直尺，精确到1mmo 9.2 生长长度测量用直尺，精确到1mm，重量(湿重)采用吸水纸吸去体表水分后再用托盘扭力天平称重，精确到0.1 g，所得到的数据用Excel进行统计与回归分析，体重与体长的关系应用w=Lb模型进行拟合。9.3 繁殖力测定用天平或杆秤称产卵前、后雌性亲虾的重量，前后两次称重之差即为产卵的重量。用电子天平称刚产出的卵1.0g左右，在解剖镜下计数，平行两次，平均值为卵密度(粒/g)。产卵量按式(3)计算:G=(W1-WZ)(1/2
11、w雄l十nz/2w梓z)(3 ) 式中:。一一产卵量，单位为粒;W1一一产卵前亲虾重量，单位为克(g);Wz一一产卵后亲虾重量，单位为克(g); nl一一试样1的卵粒数，单位为粒;w梓1一一试样1重量，单位为克(g); nz一一试样2的卵粒数，单位为粒;切样z一一试样1重量，单位为克(g)0 9.4 细胞遗传学特性取雄性斑节对虾，在其腹部1、2节间侧注射秋水仙素溶液(浓度按1.5g/g体重)，注射完毕后在水族箱中暂养4h6 h，取出解剖，获取其精巢，用0.7%氯化饵(KCl)低渗，卡诺氏(Caronys)液固定，GB/T 26619-2011 气干法制片，吉姆萨(Gimsa)染色，镜检，选择分
12、散良好的染色体计数。计数方法按GB/T18654. 12的规定执行。9.5 生化遗传学特性取肌肉组织加入5倍体积的0.05mol/L磷酸盐缓冲液(pH7.0) (配制方法见附录。冰浴匀浆，14 000 r/min下，40C离心15min，取上清液与甘油-澳酣蓝加样缓冲液(配制方法见附录C)混合，立即电泳或一200C保存，24h内200V电泳12h，采用TG缓冲系统，缓冲液的配制见附录Co电泳采用垂直板聚丙烯酷胶凝胶电泳，分离胶和浓缩肢的浓度分别为7.5%和2.5%，染色液的配制按GB/T19782 的规定执行。群体遗传学特征中，三亚种群和纳顿岛群体的数据是对30尾样品的肌肉和肝膜腺两种组织中的
13、苹果酸酶(ME)、苹果酸脱氢酶(MDH)、谷氨酸脱氢酶(GDH)、乳酸脱氢酶(LDH)、磷酸葡萄糖变位酶(PGM)、碱性磷酸酶(ALP)、酸性磷酸酶(ACP)、超氧化物歧化酶(SOD)和醋酶(EST)9种同工酶的检测结果。厦门养殖群体的数据是对40尾样品的肌肉和肝膜腺两种组织中的醋酶(EST)、酸性磷酸酶(ACP)、碱性磷酸酶(ALP)、乳酸脱氢酶(LDH)、苹果酸脱氢酶(MDH)、苹果酸酶(ME)、乙醇脱氢酶(ADH)、超氧化物歧化酶(SOD)和谷氨酸脱氢酶(GDH)9种同工酶的检测结果。多态位点比例(P)、平均杂合度观察值(R，)、预期杂合度(He)分别按式(4)、式(5)、式(6)计算:
14、式中:P一一多态位点比例;N1一一-多态位点数;一一检测位点总数。式中zHo-平均杂合度观察值;Hl -_.多态位点杂合度观察值;n一一观察位点总和。式中zHe 预期杂合度;q 纯合基因型的频率En 观察位点总和。P =N1 /n X 100% ( 4 ) Ho =(Hl)/n . ( 5 ) He = (1-qZ) J/n . ( 6 ) 5 G/T 26619-2011 A.1 对虾头胸甲的分区6 对虾头胸甲的分区见图A.l。1一一额角;2一一一额角侧沟;3-一一额角沟;4一一额角脊;5 眼后沟p6一一-眼胃脊;7一一-颈沟z8 胃上刺;9 颈脊510 额角侧沟511 中央沟;12 额角后
15、脊;13一-额角侧脊;14 心鲸沟;附录A(资料性附录)对虾头胸甲分区及外形27 26 25 24 23 22 21 15一一眼眶刺516一一眼后刺;17一触角刺;18 触角脊519 鲸甲刺520一一颊刺;21眼眶触角沟;22 肝刺z23 肝沟524 肝脊;25一一肝上刺;26一一亚缘脊;27一一心鲸脊;28 颊刺;图A.1对虾头胸甲分区29一二一眼眶触角沟;30-一肝刺;31 颈脊;32 胃上刺533 颈沟;34 肝上刺;35 额角侧沟536 中央沟;37一二额角后脊;38一一额角侧脊;39-一一触角刺;40-一眼眶刺;41一一眼后刺。G/T 26619-2011 A.2 对虾外形对虾外形(
16、侧面)及体节、附肢情况见图A.20圄A.2对虾外形(侧面)7 GB/T 26619-2011 附录B(资料性附录)不同日龄养殖斑节对虾体长、体重实测值不同日龄养殖斑节对虾体长、体重实测值见表B.L表B.1 不同日龄养殖斑节对虾体长、体重实测值日龄/d46 66 82 102 128 142 156 178 202 218 238 255 雄虾体长/mm25.2 51. 8 68.8 85.1 103. 6 116.3 122.2 132.3 142. 1 146.3 150.5 155.2 雄虾体重/g0.27 2.28 5.27 9.86 17.62 24.78 28.67 36.24 44
17、. 75 48. 76 53.01 58.04 雌虾体长/mm22.4 51. 6 66. 7 83.9 109 118.1 130.1 145.3 155.2 163.2 171. 4 175.5 雌虾体重/g0.20 2.38 5.09 10.04 21. 80 27.65 36.84 51. 12 62.13 72.11 83.38 89.43 注:雄虾样本数716尾，雌虾样本数784尾。8 C. 1 O. 1 mol/L磷酸缓冲液(pH7.0)的配制附录C(规范性附录)溶液的配制GB/T 26619-20门1 mol/L磷酸氢二饵(KzHP04)61.5 mL , l mol/L磷酸二
18、氢饵(KHzP04)38.5 mL，用水稀释至1 000 mL。C.2 加样缓冲液的配制0.25%澳酣蓝，0.25%二甲苯青FF，30%甘油水溶液，混合均匀后4oC保存。C.3 TG电泳缓冲液C. 3.1 储存液的配制15.1 g三是甲基氨基甲皖(Tris)，94g甘氨酸(电泳级)(pH8. 3) , 50 mL 10%十二皖基磺酸铀(SDS，电泳级)，定容到1000 mLo C. 3. 2 使用涩的配制稀释储存液，使终浓度达到25mol/L Tris,250 mmol/L甘氨酸，0.1%SDSo 9 FFON|-NH国。国华人民共和国家标准斑节对虾GB/T 26619-2011 中当&中国标准出版社出版发行北京复兴门外三里河北街16号邮政编码:100045 网址电话:6852394668517548 中国标准出版社秦皇岛印刷厂印刷各地新华书店经销晤印张1字数19千字2011年8月第一次印刷开本880X 1230 1/16 2011年8月第一版传-15号:155066. 1-43311 18.00元如有印装差错由本社发行中心调换版权专有侵权必究举报电话:(010)68533533定价GB/T 26619-2011 打印日期:2011年9月13日F002A
