1、远雪ICS 65. 150 B 51 中华人民共和国国家标准GB/T 26620-20门鱼某主皿昔(吻钝2011-11-01实施岛1:arbledflounder 2011 -06-1 6发布发布中华人民共和国国家质量监督检验检夜总局中国国家标准化管理委员会数码防伪目U吕本标准的附录A为规范性附录，附录B为资料性附录。本标准由中华人民共和国农业部提出。本标准由全国水产标准化技术委员会海水养殖分技术委员会归口。本标准起草单位:中国水产科学研究院黄海水产研究所、中国海洋大学。本标准主要起草人:张岩、陈四清、刘曼红、沙珍霞、于东样。GB/T 26620-20门I GB/T 26620-2011 钝吻
2、黄盖蝶1 范围本标准给出了钝吻黄盖蝶(Pseudoleuronectesyokohamae)的主要形态构造特征、生长与繁殖、细胞遗传学特性、生化遗传学特性及检测方法。本标准适用于钝吻黄盖蝶的种质检测与鉴定。2 规范性引用文件下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。GB/T 18654.2 养殖鱼类种质检验第2部分:抽样方法GB/T 18654. 3 养殖鱼类种质检验第3部分:性状测定
3、GB/T 18654. 12 养殖鱼类种质检验第12部分:染色体组型分析3 名称与分类3. 1 学名钝吻黄盖蝶Pseudoleuronectesyokohamae (Gnther) 3.2 分类地位隶属于蝶形目(Pleuronectiformes)、蝶亚目(Pleuronectoidei)、蝶科(Pl巳uronectidae)、蝶亚科( Pleuronectinae)、黄盖蝶属(Pseudo pleuronectes)。4 主要形态特征4.1 外部形态特征钝吻黄盖媒体呈卵圆形，背腹缘凸度相似。头部颇小，背面在上眼前缘上方有一凹刻。眼小，均在右侧。眼间隔颇窄隆起呈崎状，被鳞。牙颇小而侧扁，顶端略
4、呈截形，呈门牙状，基部粗壮，排列紧密。下顿较长，突出于前;上领后端终止于下眼的前缘稍后的下方。有眼侧的前鼻孔接近上额;元眼侧的前鼻孔后缘有一片状小瓣，后鼻孔仅为一大圆孔。上鲤盖边缘略呈游离。鳞颇小，通常有眼侧为柿鳞，元眼侧为圆鳞，有时头部亦兼有弱柿鳞。头部仅吻及上下额无鳞，眼间隔满被小型柿鳞。各鳝的鳝条均多少被鳞。左右侧线同等发达，前部在胸鳝上方有一较低的弓状弯曲部，弯曲部中央至背鳝基底间有鳞22行26行，直线部起点处至背鳝基底间有鳞32行37行，侧线前方的额上枝甚短。有眼侧为褐色或黄褐色，有时有大小不等的暗色斑纹散布体部，背鳝及臀鳝上有时亦有暗色斑纹，尾鳝后缘暗色或黑色。钝吻黄盖蝶的外部形态
5、见图1。4.2 可数性状4.2. 1 背鳝鳝式:D.6972 4.2.2 臀鳝鳝式:A.5053 4.2.3 腹鳝鳝式:V.64.2.4 胸鳝鳝式:P.ll4.2.5 侧线鳞鳞式:75831 GB/T 26620-2011 4.2.6 鲤把数:34十74.2.7 牙式:(0十913)/(02十1215)图1钝吻黄盖蝶的外部形态4.3 可量性状可量性状实测比值见表10表1可量性状实测比值项目比徨项目比值体长/体高2. 22. 4 头长/眼间距11. 717. 6 体长/头长4.04.4 头长/眼径4-5.7 头长/吻长6.2-7.3 5 生长与繁殖5. 1 生长5. 1. 1 不同年龄组的体长与
6、体重渤海钝吻黄盖蝶不同年龄组的体长、体重实测值见表20表2渤海黄盖鳝不同年龄组的体长、体重实测值项目1龄2龄3龄4龄5龄体长/mm153 212 255 288 318 体重/g70 183 311 460 600 5. 1. 2 全长体重实测值钝吻黄盖蝶全长与体重的实测值见表3。钝吻黄盖蝶生长方程和体长体重关系参见附录B。表3钝吻黄盖鲸全长与体重的实测值全长/cm6. 6 体重/g4.3 全长/cm16.2 体重/g48 全长/cm体重/g2 GB/T 26620-2011 5.2 繁殖5.2.1 性成熟年龄雄鱼2龄性腺开始成熟，雌鱼3龄性腺才开始成熟。5.2.2 产卵期黄渤海黄盖蝶的繁殖季
7、节在3月至5月，4月上旬为盛期。一年性成熟一次，一次性产卵。5.2.3 繁殖力钝吻黄盖蝶产卵个体的繁殖力波动在14.6X104粒204X104粒，平均为78.25 X 104粒。6 细胞遗传学特性钝吻黄盖蝶染色体数目为2n=48，核型为2二48t。钝吻黄盖蝶的染色体核型图见图2。在3最重要靠在是毒品要禁毒毒辈辈辈毒京贯程建是毒品集建重毒蠢蠢慧每，典蠢巍巍赛摊在提啻最重主靠图2钝吻黄盖蝶染色体核型7 生化遗传学特性7. 1 同工酶圄谙钝吻黄盖蝶的异拧棱酸脱氢酶CIDHP)电泳图谱见图307.2 群体变异范围如峙料c9.穆曾感婚时警叫L 图3钝吻黄盖鲸异拧槽酸脱氢酶电泳图i普钝吻黄盖蝶群体多态位点
8、比例CP99)为0.2353，杂合度观察值CHo)为0.0196，平均有效等位基因数CN.)为0.018108 检测方法8. 1 抽样方法抽样方法按照GB/T18654. 2的规定执行。8.2 性状测定性状测定按照GB/T18654. 3的规定执行。3 GB/T 26620-20门8.3 繁踵力的测定用天平或杆秤称产卵前、后雌亲鱼的重量，前后两次称重之差即为产卵的重量。用电子天平称刚产出的卵1.0g左右，在解剖镜下计数，平行两次，平均值为卵密度(粒/g)。产卵量按式(1)计算:G=(Wj-W2)(nj/2w样j+n2/2w样2)(1 ) 式中:G一一产卵量，单位为粒;W1一一-产卵前亲鱼重量，
9、单位为克(g);W2一一产卵后亲鱼重量，单位为克(g);nj一一试样1的卵粒数，单位为粒;w样1一一试样1重量，单位为克(g);n2 试样2的卵粒数，单位为粒;w样2试样1重量，单位为克(g)。8.4 染色体及核型染色体及核型的测定按照GB/T18654. 12的规定执行。8.5 同工酶分析8.5.1 样品制备活体或低温样品带回实验室。取肌肉和肝脏，密封放入超低温冰箱(-76.C)或液氮罐中贮存。将部分组织(约0.5g)取出放入玻璃匀浆器中，加入等体积双蒸水或1: 1 (质量体积)的0.1mol/L磷酸缓冲液(pH7.0) (配制方法见附录A)，冰水浴中匀浆后，倒人1.5 mL离心管内，在04
10、.C冷冻离心机中15000 r/min，离心15min，离心后取上清液作为电泳样品。8.5.2 电泳分析采用淀粉凝胶电泳方法，凝肢浓度为12%，电泳缓冲系统为TC，pH7.0(配制方法见附录A)，恒流(电压大小为8V /cm)电泳5h6 h。电泳过程在4.C冰箱中进行。凝胶厚度为6mm，电泳后切成4片5片，分别进行各种酶的染色，染色过程在37.C恒温箱中进行，染色液配方见附录A。8.5.3 结果计算群体遗传学特征的数据是对蓬莱沿岸33尾样品的肌肉、心脏、眼和肝膜腺4种组织中的天冬氨酸转氨酶(AAT)、乙醇脱氢酶(ADH)、6-磷酸葡萄糖异构酶(GPD、甘油醒-3-磷酸脱氢酶(G3PDH)、异拧
11、朦酸脱氢酶(IDHP)、乳酸脱氢酶(LDH)、苹果酸脱氢酶(MDH)、甘露糖-6-磷酸异构酶(MPD、6-磷酸葡萄糖脱氢酶(PGDH)、磷酸葡萄糖变位酶(PGM)、山梨醇脱氢酶(SDH)和超氧化物歧化酶(SOD)12种同工酶的检测结果。多态位点比例(P)、平均杂合度观察值(Ho)、平均有效等位基因数(Ne)分别按式(2)、式(3)、式(4)计算:P =Nj/n X 100% ( 2 ) 式中zP 多态位点比例;N j 多态位点数;n 检测位点总数。Ho = (L, Hj)/n . ( 3 ) 式中zH。平均杂合度观察值;H1 多态位点杂合度观察值;n 观察位点总和。Ne =(1-Ho)J/n
12、( 4 ) 4 式中zNe二平均有效等位基因数;Ho一平均杂合度观察值;n一一观察位点总和。9 判定规则GB/T 26620-2011 被检样品符合本标准的第4章、第6章要求的为合格样品。如果有一章不符合的可以复检，复检不合格的判定为不合格，复检合格的判定为合格。5 GB/T 26620-2011 附录A(规范性附录)各种缓冲液、染色液配方A.1 TC缓冲液三起甲基氨基甲:皖CTris)3. 028 g，用拧攘酸调整pH至7.0，蒸馆水定容至1L。A.2 O. 1 moI/L磷酸缓冲液CpH7.0)1 mol/L磷酸氢二饵CK2HP04)61.5 mL, l mol/L磷酸二氢梆CKH2P04
13、)38.5mL，用水稀释至1000 mL。A.3 辅酶IICNADP)基本保存渣NADPCN-050曰:300mg，哇哇蓝CMTT)(M-2128) : 300 mg，纯水:1000 mL。A.4 辅酶1(NAD)基本保存液NADCN-0632) :400 mg , MTTCM-2128) :300 mg，纯水:1000 mLo A.5 酣睡甲硫酸CPMS)基本保存液PMSCP-9625): 150 mg，纯水:10mLo A.6 同工酶的染色渣配制方法同工酶染色液配制方法见表A.L表A.1同工酶的染色液配制方法同工酶英文药品浓度剂量Tris-HC1 , pH8.。0.2 mol/L 25 m
14、L 异拧棱酸CIsocitrate)25 mg Isocitrate 异拧橡酸脱氢酶氯化续(MgCl，)1 mol/L 0.25 mL dehydrogenase NAD基本保存液25 mL PMS基本保存液3滴-5滴6 GB/T 26620-2011 附录B(资料性附录)钝吻黄盖蝶生长方程和体长体重关系B.1 钝吻黄盖蝶生长方程钝吻黄盖蝶的生长可用Von-Bertalanffy生长方程表示，通过1978年1985年对山东沿岸拖网调查取得的1260个样品(年龄组成2龄7龄，体长组成90mm420 mm)的回归分析，钝吻黄盖蝶的生长方程式见式(B.l)、式(B.2)、式(B.3)、式(B.4):
15、 :L， =415. 361-e-o.20(一1J. ( B.1 ) 合:L，= 325. 901-e 。川1.51)J.( B.2 ) :W，=l 489. 771-e-o.20(.1川325 ( B.3 ) 告:W，=772.811-e-o.29(-1.511J山75 .( B.4 ) 式中:L, 体长，单位为毫米(mm);t 年龄，单位为龄;W , 体重，单位为克(g)。B. 2 钝吻黄盖蝶体长体重关系通过1978年1985年对山东沿岸拖网调查取得的1260个样品(年龄组成2龄7龄，体长组成90 mm420 mm)的回归分析，钝吻黄盖蝶的体长、体重关系见式也.5)、式(B.6):告:W，
16、=17.756X10-7L，3.4375:W，=18.101X10-6L，3.0325 飞/飞/DPOBB f飞飞式中:W, 体重，单位为克(g); L, 体长，单位毫米(mm)。FFONiONNH阁。国华人民共和国家标准钝吻黄盖蝶GB/T 26620-2011 中晤中国标准出版社出版发行北京复兴门外三里河北街16号邮政编码:100045网址电话:6852394668517548 中国标准出版社秦皇岛印刷厂印刷各地新华书店经销* 印张0.75字数15千字2011年8月第一次印刷开本880X12301/16 2011年8月第一版唔书号:155066 1-43312 16.00元如有印装差错由本社发行中心调换版权专有侵权必究举报电话:(010)68533533定价GB/T 26620-2011 打印日期:2011年9月13日F002A
