1、ICS 65.120 B 46 NY 中华人民共和国农业行业标准NY /T 1033-2006 饲料中西马特罗的测定气相色谱/质谱法Determination of cimaterol in feeds Gas chromatography /mass spectrometry method 111111111111111111川111112005- 09-21发布2005 -12-01实施中华人民共和国农业部发布NY /T 1033-2006 前言本标准由中华人民共和国农业部提出。本标准由全国饲料工业标准化技术委员会归口。本标准由国家饲料质量监督检验中心(北京)负责起草。本标准主要起草人:李
2、玉芳、宋荣、范理、高升、郑君杰、苏晓鸥。I 范围饲料中西马特罗的测定气相色谱/质谱法本标准规定了用气相色谱/质谱法(GCIMS)测定饲料中西马特罗含量的方法。NY /T 1033-2006 本标准适用于配合饲料、浓缩饲料及添加剂预氓饲料中西马特罗的测定。最低检测浓度为0.05mglkgo 2 规范性引用文件下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本标准，然后，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。GB/T 6682一1992分析实验室
3、用水规格和实验方法GB/T 14699. 1饲料采样3 方法原理用乙酸铀缓冲溶液提取饲料中的西马特罗，提取液过固相提取柱(SPE)净化，吹干，经衍生后，直接在气相色谱/质谱仪上测定。4 试剂和材料以下试剂除特别注明者外均为分析纯，水应符合GB/T6682一1992一级水要求。4.1 氨水。4.2 冰乙酸。4.3 三水合乙酸锅。4.4 N，O-双三甲基硅基三氟乙酷胶(BSTFA)。4.5 甲苯，色谱纯。4.6提取溶液:乙酸纳缓冲溶液，称取31.63g三水合乙酸铀(4.3)溶于水，加人11.6mL冰乙酸(4.2) ，pH约为4.8，用水稀释至1L。4.7 固相净化萃取小柱(SPE)所用试剂。4.7
4、. 1 3 cc/60 mg MCX柱或同等效果净化柱。4.7.2 淋洗液A:乙酸溶液c(CH3刃而=1mol/L:取5.72mL冰乙酸(4.2)于100mL容量中，用水定容至刻度摇匀。4.7.3 淋洗液B:甲醇，色谱纯。4.7.4 乙酸乙醋洗脱液:取3.5mL氨水(4.1)于100mL容量瓶中，用乙酸乙醋(色谱纯)定容刻度，摇匀。 M固相萃取小柱是由Waters提供的产品的商品名称，给出这一信息是为了给本行业标准的使用者提供方便，而不是标准主管部门对这一产品的认可。1 NY /T 1033-2006 4.7.5 氮气:普通氮气O4.8 氮气(99.999%)。4.9 西马特罗标准品:含量大于
5、99.5%。4.10 西马特罗标准液4.10.1 西马特罗标准储备液:称取5mg西马特罗标准品(精确至0.00001g)，溶于甲醇(色谱纯)溶液中并定容至25mL，此储备液浓度为200g/mL。4.10.2 西马特罗标准工作溶液:移取125L西马特罗储备液(4.10.1)用甲醇(色谱纯)稀释到25 mL，此工作溶液浓度为1.00周/mLo4.10.3 西马特罗标准系列:取适量标准工作溶液(4.10.2)于10mL容量瓶中，用甲醇(色谱纯)定容至可度，配制成0.05周/mL，O.lO周/mL、0.20周/mL、0.50周/mL、l.00月/mL、4.00周/mL标准系列。5 仪器和设备实验室常用
6、仪器设备和5.1 分析天平:感量。.0001 g;感量0.00001go 5.2 旋转振荡器:水平或往复运动，频率250次/min300次/min。5.3 固相萃取抽真空装置。5.4 电加热氮吹仪。5.5 电热恒温鼓风干燥箱。5.6气相色谱/质谱仪:装有弱极性或非极性的毛细管柱的气相色谱仪和具有电子轰击离子源及检测器。6 试样制备按GB/T14699. 1采取实验室样品(用四分法缩减分取200g)粉碎使之全部通过0.45mm孔径筛，充分混匀，装人磨口瓶中备用。7 分析步骤7.1 提取:称取试样(配合饲料约1g，被缩饲料和添加剂预棍饲料约0.5g样品)，精确至0.0001g，置于250mL三角瓶
7、中，准确加人提取液50mL(4.6)，振摇使之全部润温，盖紧塞子，放在旋转振荡器上，振荡20min，取下，榕液通过定性滤纸过滤，收集约30mL备用。7.2 净化:精确吸取2mL试样溶液(7.1)置于SPE小柱上，打开真空泵，调节压力，使其过滤速度不超过2mL/min，再分别取2mLIL淋洗液A(4.7 .2)和3mL淋洗液B(4.7.3)淋洗SPE小柱，丢弃所有的流出液，最后取5mL乙酸乙醋洗脱液(4.7.4)洗脱，用具塞试管收集，将洗脱液置于40C的条件下，用氮气(4.7.5)吹干。7.3 衍生:在具塞试管加人衍生剂BSTFA(4.4) 100L，充分涡旋混合后，置(70:t5)C烘箱中，反
8、应30mm。用氮气吹干，加2mL甲苯(4.5)，混匀，浓度高时可用甲苯稀释，用于气相色谱/质谱仪分析。同时，用西马特罗标准系列做同步衍生。7.4 测定步骤7.4.1 色谱条件2 色谱柱:DB-5MS，长30m，内径。.25mm，粒径。.25mo载气:氮气(纯度99.999%);柱头压:100 kPao NY /T 1033-2006 进口温度:260C。进样量:1L，不分流。柱温程序:80C保持1min，以25C/min速度升至200C，于200C保持6min，再25C/mn的速度升至280C并保持2mno EI源电子轰击能:70eV。检测气温度:200C。接口温度:250C 质量扫描范围:6
9、0 AMU 400 AMU。溶解延迟:12mino 检测用西马特罗三甲基硅皖衍生物的特征质谱蜂:m/Z= 72 ,219 , 186 ,276 0 7.4.2 定性定量方法7.4.2.1 定性方法:样品与标准品保留时间的相对偏差不大于0.5%。特征离子基峰百分数与标准品相差不大于20%。7.4.2.2 定量方法:选择离子监测(SIM)法计算峰面积，标准工作液和样品榕液中西马特罗响应值均应在仪器线性范围内。如果浓度过高，需适当稀释。对标准工作液和样品溶液等体积参插进样测定。外标法定量。8 分析结果的计算饲料中西马特罗的含量X，以质量分数(g/g)表示，按式(1)-十算:A， VO V1 x= :
10、-s X Cx一XT/Xn.(1) 式中:As一一-试样溶液峰面积响应值;Ar一标准溶液峰面积响应值;.t-ist m V2 C一一标准溶液浓度，单位为微克每升(g/mL);Vo-一提取溶液的总体积，单位为毫升(mL);m一一试样质量，单位为克(g); Vf一一定容体积，单位为毫升(mL);V:;r一从试样榕液中分取体积，单位为毫升(mL)。一一稀释倍数。计算结果保留三位有效数字。9 允许差取平均测定结果的算术平均值为测定结果，两个平行测定的相对偏差不大于20%。3 CON-凹的OFh望中华人民共和国农业行业标准饲料中西马特罗的测定气相色谱/质谱法NY /T 1033-2006 中国农业出版社出版(北京市朝阳区麦子店街18号楼)* 争e* (邮政编码:100026 网址:) 中国农业出版社印刷厂印刷新华书店北京发行所发行各地新华书店经销争e铃* 印张0.5字数5千字2006年3月北京第1次印刷印数:1-1000册定价:6.00元开本880mmx 1230mm 1116 2006年3月第1版书号:16109. 562 版权专有侵权必究举报电话:(010) 65005894
