1、ICS 65.020 B 15 中华人民共和国农业行业标准NY/T 1248.1-2006 玉米抗病虫性鉴定技术规范第1部分:玉米抗大斑病鉴定技术规范Rules for evaluation of maize for resistance to pests Part 1: Rule for evaluation of maize for resistance to northern corn leaf blight 2006-12一06发布2007 -02一01实施中华人民共和国农业部发布NY /T 1248.1-2006 前言NY/T 1248 玉米抗病虫性鉴定技术规范为系列标准。一一第1部
2、分:玉米抗大斑病鉴定技术规范;一一第2部分:玉米抗小斑病鉴定技术规范;一一第3部分:玉米抗丝黑穗病鉴定技术规范;一一第4部分:玉米抗矮花叶病鉴定技术规范;一一第5部分:玉米抗玉米螺鉴定技术规施。本部分为NY/T1248的第1部分。本部分的附录A、附录B为资料性附录。本部分由中华人民共和国农业部提出并归口。本部分起草单位:中国农业科学院作物科学研究所，中国农业科学院植物保护研究所。本部分主要起草人:王晓鸣、戴法超、朱振东、何康来、王锡锋。I NY/T 1248.1-2006 玉米抗病虫性鉴定技术规范第1部分:玉米抗大斑病鉴定技术规范1 范围本部分规定了玉米抗大斑病鉴定技术方法和抗性评价标准。本部
3、分适用于栽培玉米(Zeamys L.)自交系、杂交种、群体、开放授粉品种以及野生玉米和玉米近缘种对玉米大斑病抗性的田间鉴定和评价。2 术语和定义下列术语和定义适用于本标准。2.1 抗病性disease resistance 植物体所具有的能够减轻或克服病原体致病作用的可遗传的性状。2.2 抗病性鉴定screening for disease resistance 通过适宜技术方法鉴别植物对其特定侵染性病害的抵抗水平。2.3 致病性path吨enicity病原体侵染寄主植物引起发病的能力。2.4 人工接种artificial inoculation 在适宜条件下，通过人工操作将接种体接于植物体适
4、当部位。2.5 病情级别disease rating scale 定量植物个体或群体发病程度的数值化描述。2.6 抗性评价evaluation of resistance 根据采用的技术标准判别植物寄主对特定病虫害反应程度和抵抗水平的描述。2.7 分离物isolate 采用人工方法分离获得的病原体的纯培养物。2.8 培养基medium 自然或人工配制的、可以使病原体在其上生长的基质。2.9 接种体inoculum 用于接种以引起病害的病原体或病原体的一部分。2.10 1 NY/T 1248.1-2006 2.11 2.12 2.13 接种悬浮液inoculum suspension 用于接种的
5、含有定量接种体的液体。生理小种physiol咱icalrace 病原菌种内在形态上无差异，但在不同品种上具有显著的致病性差异的类群。鉴别寄主differential host 用于鉴定和区分特定病原体的生理小种A虫病型/株系的一套带有不同抗性基因的寄主品种。玉米大斑病northern corn leaf blight 由大斑刚毛球腔菌Setos抖eriaturcic，(Luttrell) Leonard et Suggs，元性态为大斑突脐抱Exserohilum turcicum (Pass.) Leonard et SUggs所引起的以叶部产生大型病斑症状为主的玉米病害。3 大斑病菌接种体制
6、备3.1 病原物分离以常规组织分离法或单抱分离法从发病植株叶片的典型病斑上分离大斑病病原物。分离物经形态学鉴定确认为大斑突脐抱Exserohilumturcicum (Pass.) Leonard et Suggs后，进行分离物纯化，经致病性测定后，在4C低温下保存备用。3.2 生理小种鉴定对用于抗性鉴定接种的分离物首先进行生理小种鉴定。生理小种鉴别寄主采用含有不同抗大斑病单基因的玉米材料。3.3 接种体繁殖和保存接种所用分离物应采用当地优势生理小种。在接种前需要进行病原物接种体的繁殖。常用繁殖方法为将培养基平板培养的病菌接种于经高压灭菌的高粱粒上(高粱粒培养基制备方法:高粱粒经煮30min
7、- 40 min后，装人三角瓶中于121C下灭菌1h，冷却后备用)，在23C-25C下黑暗培养。培养5d-7d后，菌丝布满高粱粒。以水洗去高粱粒表团菌丝体，然后将其摊铺于洁净资盘中，保持高湿度，在室温和黑暗条件下培养。镜检确认大量产生分生抱子后，直接用水淘洗高粱粒，配制接种悬浮班。悬浮被中分生抱子浓度调至1X 105个/ml-1x 106个/mlo若暂时不接种，将产抱高粱粒逐渐阴干，在干燥条件下保存或冷藏保存。在接种前取出保存高粱粒保温，促使大斑病菌产抱。带菌高粱粒应在当年使用。4 抗性鉴定圃设置4. 1 鉴定圃鉴定圃应具备良好的自然发病环境。4.2 鉴定设计鉴定材料随机排列或顺序排列，每50
8、份-100份鉴定材料设1组已知抗病、感病和高感对照材料。4.3 种植要求鉴定材料播种时间与大田生产播种时间相同或适当调整，以使植株接种期和发病期能够与适宜的气候条件(湿度与温度)相遇。鉴定小区行长4m-5m，行距0.7m，每行留苗25株-30株，株距略小于大田生产。鉴定资源时，每份鉴定材料种植1行;鉴定品种时，每份材料重复2次。土壤肥力水平和耕作管理与大田生产相同。2 NY/T 1248.1-2006 5 接种5.1 接种时期接种时期为玉米展13叶期至抽雄初期。早熟类型品种宜在展10叶期接种。接种时间选择在傍晚。5.2 接种方法接种采用喷雾法。在经过过捷并调好浓度的接种悬浮液中加入0.01%吐
9、温(v/v)。喷雾接种植株叶片，接种量控制在5ml;:株-10m!;:株。5.3 接种前后的田间管理鉴定接种前应先进行田间挠灌或在雨后进行接种，接种后若遇持续干旱，应及时进行田间浇灌，保证病害发生所需条件的满足。6 病情调查6.1 调查时间在玉米进入乳熟后期进行调查。6.2 调查方法目测每份鉴定材料群体的发病状况。重点部位为玉米果穗的上方和下方各3叶，根据病害症状描述，对每份材料记载病情级别。6.3 病情分组田间病情分级、相对应的症状描述见表1，病斑占叶片面积的比例示意见圈10表1玉米抗大斑病鉴定病情级别划分病情级别症状描述1 叶片上无病斑或仅在穗位下部叶片上有零星病斑，病斑占叶面积少于或等于
10、5%3 穗位下部叶片上有少量病斑，占叶面积6%-10%，穗位上部叶片有零星病斑5 穗位下部叶片上病斑较多，占叶面积11%-30%，穗位上都叶片有少量病斑7 穗位下部叶片或穗位上部nl片有大量病斑，病斑相连，占叶面积31%70%9 全株叶片基本为病斑覆盖，叶片枯死5% 10% 唔嚣飞飞飞f 4运飞飞- l飞芒 电主运主 30% 70% 军军坠在哥运d.古h吃4远如画固1病斑占叶片面积比例示意图3 NY/T 1248.1-2006 7 抗性评价7.1 鉴定有效性判别当设置的感病或高感对照材料达到其相应感病程度(7或9级)，该批次鉴定视为有效。7.2 抗性评价标准依据鉴定材料发病程度(病情级别)确定
11、其抗性水平，划分标准见表20表2玉米对大斑病抗性的评价标准病情级别抗性1 高抗I-lighlyresistant (HR) 3 抗Resistant(R) 5 中抗Moderatelyresistant (lv饭)7 感Susceptible(S) 9 高感目前lysusceptible (HS) 7.3 重复鉴定资源材料若初次鉴定表现为高扰、扰、中抗，次年进行重复鉴定。7.4 抗性评价根据重复抗性鉴定结果对鉴定材料进行抗病性评价，抗性以记载的最高病情级别为准。8 鉴定记载表格玉米抗大斑病鉴定结果记载表格见表30表3一一一一年玉米抗大斑病鉴定结果记载表编号品种碎h质名称来源病情级别抗性评价注1
12、:鉴定地点注2:接种病原菌分离物编号生理小种类型注3:接种日期调查日期鉴定技术负责人(签字): 4 NY/T 1248.1-2006 A.1 学名和形态描述A. 1. 1 无性恋附录A(资料性附录)玉米大斑病病原菌和生理小种大斑突脐面，学名:Exserohilum turcicum (Pass.) Leon盯det Suggs 异名:Helminth问riumturcicum Pass. Biolaris turcica (Pass.) Sho巳makerDrechslera turcicl(Pass.) Subrarnanian et J ain Helm切的os如riumincoicum
13、Cooke et El1is 在自然病斑上，病原菌分生抱子梗单生，或2根6根丛生，一般不分枝，直或为膝状弯曲，褐色，长度可达300m，宽7mllm，基细胞膨大，在顶端或膝状弯曲处有明显的产拖后遗留的抱痕，具2个8个隔膜。分生于包子直或略弯曲，长梭形，浅褐色或灰橄榄色，两端渐狭，顶细胞钝圆，基细胞锥形，具2个7个假隔膜，50-144mX15-23m，抱子脐点明显且突出于基细胞之外。萌发时两端产生芽管。A.1.2 有性态大斑刚毛球腔菌，学名:Setoshaeria turcica (Luttrell) Leonard et Suggs 异名:Trichometshaeria turcica Lut
14、trell Keissleriella turcica (Luttrell) Arx Trichometshaeria tuCca Luttrel1 f. sp. sorghi Bergquist et Masias Trichomet，呗haeriaturcica Luttrell f. sp. zeae Bergquist et Masias 在寄主组织表面形成子囊座。子囊座黑色，椭圆形，外壁上部有短而坚硬的褐色刚毛。子囊腔内有侧丝。子囊圆桶形或棍棒形，具短柄，161mX27.m，双层壁，内含1个-6个或2个-4个子囊拖子。子囊子包子元色，有时为褐色，近纺锤形，直或略弯，1个-5个隔膜，多
15、为3个隔膜，隔膜处辙缩，平均大小52.7mX14.1.m，表面被一长而薄的勃质黯所包裹。5 NY/T 1248.1-2006 附录B(资料性附录)玉米抗大斑病鉴定对照品种和病原菌生理小种B.1 鉴定对照材料抗性鉴定采用的对照材料为4个自交系:齐319(抗)、Mo17(中抗)、CA091(感)、获自(高感)。B.2 生理小种B.2.1 采用的鉴别寄主黄早四、黄早四日t1、黄早四Ht2、黄早囚阳、黄早四日创或其他含不同抗性基因的材料，如B73、B73Ht1、B73Ht2、B73Ht3、B73H削。B.2.2 生理小种鉴定根据在鉴别寄主上接种后的病斑类型确定抗性反应，以特定的反应组合划分生理小种(表
16、B.l)。表B.l玉米大斑病病原菌生理小种鉴别抗性基因反应型部力公式生理小种名称(有效抗病基因/无效抗病基因)Ht 1 Ht2 Ht3 H 。Rc Rc Rc RN Ht1 H t2 H t3 HtNlO 1 S Rc Rc RN H t2 H t3 HtNIHt1 23 Rc S S RN Htl HtNIHt2 Ht3 23N Rc S S S Ht1 1Ht2 Ht3 HtN 2N Rc S Rc S Ht1 Ht3 IHt2 H 注:在Leon缸d(1989)的生理小种命名方法基础上略有改进:s为萎蒲型病斑，Rc为褪绿型病斑，RN为无病斑型反应6 calf-叮NfH问Z中华人民共和国农业行业标准玉米抗病虫性鉴定技术规范第1部分:玉米抗大斑病鉴定技术规范NY / T 1248.1-2006 长中国农业出版社出版(北京市朝阳区麦子店街18号楼)(邮政编码:100026 网址:) 中国农业出版社印刷厂印刷新华书店北京发行所发行各地新华书店经销守舍争夺印张0.75字数7千字207年1月北京第1次印刷印数:1 500册定价:10.00元争夺争夺* 开本880mmx 1230mm 1116 2007年1月第1版书号:16109 1005 版权专有僵权必究举报电话:(010) 65005894
