1、ICS 11.020 c50 备案号:15861一2005可vS中华人民共和国卫生行业标准WS/T 245-2005 红细胞和白细胞计数参考方法2005-0508发布Reference method for the enumeration of erythrocytes :and leucocytes 2005-12-01实施叶#主A、民三主EE奉IlmLl主组三昔民发布日U世一同为了保证红细胞和臼细胞的计数结果具有溯惊性和准确性，特制定本标准。本标准从2005年12月1日起实施。木标准由卫生部提出。本标准起草单位:卫生部临床检验中心。本标准主要起草人z彭明婷、申子瑜、谷小林、陆红、杨振华。本
2、标准由卫生部负责解释。WSjl, 245-2005 WS/T 245-2005 红细胞和自细胞计数参考方法1 范围本标准规定了建立红细胞和白细胞计数参考方法的技术要求。本标准适用于红细胞和白细胞计数参考方法的建立。2 术语和定义下列术语和定义适用于本标准。参考方法CReferencemethod) 一种可清楚和准确描述的用于特定检测的技术，该技术要有依据，可提供高度准确和精密的实验数据以评价其他实验方法检测结果的有效性。若有决定性方法，参考方法的准确性必须与决定性方法进行比较。参考方法应溯源至一级计量标准并且须标示不准确度和不精密度。3 总则3. 1 要求使用单通道、阻抗原理的半自动电子计数仪
3、来建立红细胞和白细胞计数的参考方法。3.2 为了保证参考方法检测结果的精密度和准确性，建立参考方法的实验室之间必须进行比对a4 红细胞和白细胞计数参考方法的一般技术要求4. 1 血标本4. 1. 1 用符合要求的塑料注射器或真空采血系统采集新鲜静脉血标本。标本中不得有肉眼可见的潜血或小凝块。4. 1. 2 标本的收集要求使用EDTA二何作为抗凝剂，抗凝剂的浓度为3，75. 4f_.tmoljml血(1.5 2.2mg/ml血)。盛有标本的试管应有足够的剩余空间以便于血标本的混匀操作。4. 1.3 标本应置于180C220C的温度条件下直至检测。4. 1.4 标本采集到标本检测的时间间隔应不超过
4、4小时。4. 1. 5 检测前应轻轻地颠倒盛有标本的试管，以便将标本充分提匀。4.2 加样器要求使用经过校准的移液器，不准确度土0.5%。其不准确度应溯掠至一级计量标准。4.3 睿量瓶要求使用硅删玻璃制成的一级容量瓶。每个容量瓶应有经国家标准汁量机构检定的标示体积，其不准确度为土1%。4.4 计数杯4.4.1 计数杯的体积应有10mt4.4.2 计数杯应有足够的高度以保证在计数前电子细胞计数仪小孔管的小孔约在液体高度一半的位置，完成计数后在小孔上方至少有1cm的液体高度。4.4.3 使用前要保持计数杯的清洁，元化学污染物和颗粒物。4.4.4 须确认是否因细胞粘附于计数杯上而导致计数值的持续下降
5、。从每批计数杯中抽查检测。在计数杯内加入稀释样本，放置不同的时间进行检测，以确认计数杯是否合格。临计数前，样品杯内的稀释液必须充分混匀。4.5 仪器性能1 WS/T 245-2005 4. 5. 1 电子细胞计数仪的设计要达到每个细胞只能计数一次的要求。细胞通过计数敏感区时颗粒回流的可能性要很小，由此产生的脉冲应低于相应的低阔值。4.5.2 电子计数装置应有能力通过脉冲高度来区分检测的细胞、其他细胞和电噪声，且能保证检测误差足够小。4. 5.3 仪器小孔的直径为80100m，小孔长度为直径的70%100%。4. 5.4 计数过程中吸人的标本体积的准确度要求在1%以内，准确度应溯源至国家或国际计
6、量标准。4. 5.5 通过水银柱或其他适当物质的移动吸人标本。吸人标本的体积受温度影响的程度应小于每摄氏度0.1%。4.5.6 为了避免人为因素的影响，设定阔4. 6 试剂4. 6. 1 稀释液4. 6. 1. 1 稀释液应为无菌、4. 6. 1. 2 要求标示稀释液4. 6. 1. 3 在设定的4.6.2 溶血荆在全血标本中胞的碎片0.02，0.04、0.06和O.度最高的次级次级稀释标本计数次数5.3 将稀蒋标本移入稀释标本应移至计数杯内，完成。5. 4 计数过程5. 4. 1 样本通过小孔的时间可依照制造5.4.2 按5.2规定的检测次数，对每份次级稀释标本进行重复检测。5.5 阐值的验
7、证将低计数阔值设在血小板和红细胞陈冲信号之间波谷的位置。5.6 重叠计数的校准方法，同时红细稀释液)。取稀释标本，浓下所示:5分钟内重叠计数的校正是使用回归分析方法来检查回归的线性;分析的数据点由检测两套4个被度的次级稀释标本得出。Y轴代表每个水平的次级稀释标本的累积计数值，X轴上的刻度将最高被度次级稀择标本(0.08+20ml)的浓度定为1.OQ 次级稀释标本(mD0.02+20 0.04十200.06十200.08十202 WS;T 245-2005 X轴的刻度值0.2507 0.5010 0.7507 1.0000 如果变异的分析未显示非线性，那么回归直线的交叉点代表重叠校准的计数值。计
8、数值为吸人小孔管的二级稀释最大浓度标本(0.08十20m!)的红细胞计数值。由于重复测定了3次，故用该计数值除以30结果代表每毫升通过小孔的二级稀释标本内含的细胞数。最后，用计数值乘以50451得出RBC的计数值。6 白细胞计数方法的要求前述的原理同样适用于白细胞计数。制备双份稀释标本，每0.08ml血加入20ml稀释液中。计数前加入恪血剂。在确保红细胞完全榕解锵组细胞捞骸取歪i十人白细胞、恪血剂对白细胞汁数发生影响之前，对白细胞进行计数。6. 1 闸值的验证原理同红细胞计数，尸6.2 重叠校准0.02+20ml 回归线的相同。用计数6.4 如时搭血和6.5 输送如果已回流和吸人6.6 计数误
9、差36. 6. 1 由于不法的不精密度6.6.2潜在的复检测的次数与5.2最大允许偏倚为4句。考虑的影响因素应于马胞沉降、丢失和/或。细胞计数参考方范围等。3 的OON-的寸NF阳气的旨dF华人民共和卫生行业标准红细胞和白细胞计数参考方法WS/T 245 - 2005 国, l t 印张:O. 75 2006年5月第1版第1次印刷* 出版发行:人民卫生出报社(中继线们616688)地址:(100078)北京市丰台区方庄芳群圄3区3号楼网址:http:/阴阳.pmph. com E-mail: 印刷:北京新丰印刷厂经销:新华书店开本:880 x 1230 字数:15千字版次:2006年5月第1版书号.14117. 8 定价:4.00元著作权所有，请勿擅自用本书制作各类出版物，违者必究(凡属印装质量问题请与本社销售部联系退换)1/16 ws厅245-2005
