1、中华人民共和国国家标准职业性慢性铅中毒诊断标准及处理原则GB 11504-89 Diagnostic criteria and principles of management 。roccupational chronic lead poisoning 职业性慢性铅中毒是生产中长期接触铅烟或铅尘所致的全身性疾病。其早期表现为叶琳代谢障碍、神经衰弱综合征和消化系统症状,中毒较重时出现贫血、腹绞痛,严重时出现铅性麻痹或中毒性脑病。1 主题内容与适用范围本标准规定了职业性慢性铅中毒诊断标准及处理原则。本标准适用于生产中接触铅烟或铅尘而引起的慢性中毒2诊断原则应根据确切的职业史和以神经、消化、血液系统
2、损害为主的临床表现及有关实验室检查,参考作业环境调查,进行综合分析后,方可诊断。3诊断及分级标准3. 1 铅吸收有密切铅接触史,尚无铅中毒的临床表现,尿铅二三0.39 mol/L (0. 08 mg/L)或0.48 mol/24 h (0. 1 mg/24h);或血铅二;,2. 41 mol/L ( 50 g/dL);或诊断性驱铅试验后尿铅注1.45 mol/L (0. 3 mg/L)而3.86 mol/L(O. 8 mg/L)者。3.2轻度中毒3. 2. 1 常有轻度神经衰弱综合征,可伴有腹胀、便秘等症状,尿铅或血铅量增高。具有下列一项表现者,可诊断为轻度中毒2a. 尿8氨基乙酸丙酸二月0.
3、5 mol/L(4 mg/L)或45.8 mol/24 h(6 mg/24 h); b. 尿粪叶琳半定量二三(十十)$ 血红细胞游离原叶琳(FEP)注2.31 mol/L(l30吨dL),或红细胞铸原叶琳(ZPP)2.08 mol /L(l30 g/dL)。3.2.2 经诊断性驱铅试验,尿铅二三3.86 mol/L(O. 8 mg/L)或4.82 mol/24 h(l mg/24 h)者。3.3 中度中毒在轻度中毒的基础上,具有下列一项表现者,可诊断为中度中毒za. 腹绞痛gb. 贫血gc. 中毒性周围神经病。3.4 重度中毒具有下列一项表现者,可诊断为重度中毒2a. 铅麻痹g中华人民共和国卫
4、生部1989-03-25批准1990-02-01实施215 GB 115 04二89b. 铅脑病。4 治疗原则可用金属络合JY!J如依地酸二锅钙、二琉基丁二酸销等驱铅治疗,同时辅以对症疗法。铅吸收者是否需予驱铅治疗,可根据具体情况而定5 劳动能力鉴定5. 1 铅吸收可继续原工作,36月复查一次5. 2 轻度中毒驱铅治疗后可恢复工作,一般不必调离铅作业。5.3 中度中毒驱铅治疗后原则上调离铅作业5. 4 重度中毒必须调离铅作业,并根据病情给予治疗和休息。6健康检蛮的要求铅作业工人应作就业前体检,并每年定期体检一次体检时需作内科检查、尿铅或血铅、尿粪日卡琳或尿6氨基乙就丙酸、红细胞游离原叶琳或铸原
5、叶琳测定。7职业臻忌证a. 明显贫血,b. 神经系统器质性疾病$c. 明显的肝、肾疾病sd. 心血管器质性疾病ge. 饪赈和哺乳期妇女。216 Al 原理GB 1150 4 - 8 9 附录A尿中铅的测定一一双硫臆比色法补充件在酸性介质中,利用硫酸、硝酸、高氯酸的氧化作用,破坏尿中的有机质,使铅呈离子态,然后在pH8. 5 11. 0与双硫踪反应,生成红色络合物,经氯仿萃取后比色定量。A2仪器分光光度计,A3试Ja. 硫酸(优级纯)I b. 硝酸(优级纯hc. 高氯酸优级纯,d. 1.1x10-m。l/L(O.04%)盼红指示剂z称取0.1 E盼红放在小乳钵中,加2滴无铅水研磨溶解,再加元铅水
6、至250mL; e. 氯仿g每!00mL氯仿中加lmL乙醇,f. 缓冲液z称取JOOg拧糠酸溶于70mL无铅水中,置冷水浴中,分次加入100mL氨水,边加边振摇,冷却后加入3g无水亚硫酸锁,溶解后加氨水至250mL,将此液移至1L分液漏斗中,用透光度60%双硫踪氯仿溶液萃取铅,至双硫踪氯仿液保持绿色不变为止。再用适量氯仿洗去残留的双硫踪至氯仿层呈无色透明为止,奔去氯仿层,加500mL氨水,于冰箱内保存,g. !. 5 mol/L(l0%)佩化饵溶液a取10g氟化梆优级纯,溶于无铅水中,并稀释至100mL; h. 双硫踪氯仿溶液双硫踪的提纯s溶解o.05 g双硫踪于50mL氯仿中,如有不榕物可过
7、滤,然后移入250mL分液漏斗中,用1100氨水萃取23次每次约25mL),此时双硫踪转入氨水层中,合并氨水溶液,过滤后放至分液漏斗中,用盐酸酸化,使双硫踪析出,用氯仿萃取23次,每次约20mL,此时双硫惊转入氯仿层,将此浓双硫踪氯仿潜液用重蒸馆水洗涤氯仿提取液2次,然后放在棕色瓶内,于冰箱中保存。取提纯的双硫踪用氯仿稀释至透光度为60% (于波长510nm下测量hI. 双硫踪洗除液s取10mLl. 5 mol/L(10%)氟化饵溶液与30mL氨水混合,用无铅水稀释至500mL; j. 铅标准溶液s称取!.5984 g硝酸铅(105烘2的,用少量水溶解,移入1L量瓶中,加10mL硝酸,用无铅水
8、稀释至刻度,此溶液浓度为4.8X10-mol/L(l. 0 mg/mL)的铅,作为贮备液,将此液用1:99硝酸稀释JOO倍,成为4.8X JO 5mol/L(l0吨mL)的铅溶液,作应用液A4 尿样分析步骤A4. 1 取50mL尿样于锥形烧瓶中,同时另取2个锥形烧瓶,各加50mL无铅水,作为空白对照,各加3mL硫酸、5mL硝酸,加热消化至炭化,离火稍冷A4. 2 加0.5 mL高氯酸,摇匀,加热使瓶内产生大量白色烟雾,继续加热使白色烟雾升至瓶口且溶液为无色透明,取下放冷。A4. 3 混色法z用40mL无铅水分次溶解内容物,并转移至125mL分渡漏斗中,加2滴酷红指示剂,摇217 GB 1150
9、4-89 匀加缓冲液至溶液呈红色,再加1mL缓冲液,冷却后,加1mLI.5mol/L(I0%)佩化饵溶液,摇匀,加10mL60%透光度的双硫踪氯仿溶液,振播100次,待分层后,将氯仿层用脱脂棉过滤,于波长510nm T以氯仿为参比液比色,A4. 4 单色法z向混色法所得的双硫踪铅氯仿萃取液中加入30mL双硫踪洗涤液,振摇50次,分层后吸去水层,再加20mL双硫踪洗涤液,振摇30次,分层后,将氯仿层用脱脂棉过滤于波t是510nm下以氯仿为参比液比色A5 标准曲线的绘制A5. 1 取0、0.I、o.3、o.5、o.7、0.9 mL铅标准应用液(相当于0、1、3、5、7、9啤铅)分别置于150mL锥
10、形烧瓶中,各加50mL无铅水。A5. 2 各加3mL硫酸、5mL硝酸,加热消化至水分蒸尽,离火稍冷A5. 3按A4.2A4. 4操作。A5. 4 以吸光度为纵坐标,铅量为横坐标,绘制成标准曲线。AS 计算根据测得样晶吸光度减去试剂空白吸光度,查标准曲线,得样品中铅的含量,按式(Al)计算样品中铅的含量阳ol(昭)尿中铅的含量(mol/L(mg/L)分析样品的体积【!0-3L(mL)( Al ) Al说明 本法的检测下限为0.0006 mg I b. 本法的回收率为98100%I 本法的精密度以变异系数表示)为3.)9. 2 % ( 19吨Pb范围hd. 应取新鲜尿样进行测定,如样品需要放置,则
11、按50mL尿加30mL硫酸保存,e. 所用试剂可根据空白试验结果,决定是否需要提纯,一般试剂空白的吸光度不起过).02 I 玻璃仪糟使用前需用。.79 mol/L(5 % )硝酸浸泡、洗涤,再用无铅水冲洗,g. 双硫踪易被氧化,日光、高温、一些金属离子及氧化剂均能氧化双硫惊为二苯硫代倩二踪,因此在提纯、保存、分析各个环节应注意保持双硫踪的纯度和稳定性g色h. 盼红指示剂在酸性癖液中呈橙红色,中性溶液中呈黄色,碱溶液中(pH8.5及以上时才呈红附录B血中铅的测定一无焰原子吸收光谱法(补充件)Bl 原理血液经稀硫酸处理后,随即导入石墨炉原子化器原子化,并根据其特征谱线的吸收强度定量。的仪器. 配有
12、石墨炉的原子吸收分光光度计sb. 铅空心阴极灯,c. 石锺管原子化器,218 GB11504 89 d. 微量取样器,e. 具寨聚四氟乙烯塑料)样品杯管hf. 旋涡混匀器。83试剂. 铅标准液精确称取光谱纯金属铅!.0000 g溶于少量浓硝酸后,移至IL容量瓶内,以超纯水稀释至IL,此液浓度为4.8 10 3mol/L(l. 0 mg/mL),测试时将此液用O.024 mol/L(O. 15%)硝酸逐级稀释成4.8 10-1mol/L(O. I g/mL)和9.7 10-1mol/L(O. 2 g/mL)的铅标准应用液pb. 硝酸(MOS级) c. 实验用水z由纯水器制成的超纯水(18MQcm
13、)或将重蒸水经石英亚沸蒸馆提纯sd. 肝素。84 血样分析步骤84. 1 取20L血样,置于盛有O.18 mLO. 024 mol/L(O. 15%)硝酸的具塞样品杯中,充分摇匀使溶血84. 2试剂空白,以0.024 m。l/L(0.15%)硝酸作为试剂空白。84.3 自动进样(手动进样)IO L注入石墨管中进行原子化,测其原子吸光度,测得样品的吸光度减去试剂空白吸光度,查标准曲线,得样品中铅的含量,再乘以稀释倍数。B5 标准曲线的绘制取新鲜人血(肝素抗凝,用旋涡器充分混匀,在6个具盖样品杯中,分别加入铅标准溶液4.8 10-1 mol/L(O. 1吨mL)O.00、o.02、o.05、o.1
14、0、0.15 mL租铅标准溶液9.7 10-1mol/L(O. 2 且mL)O.1 mL, 用O.024 mol/L(0.15%)硝酸使各管体积为0.18 mL,加入正常人血20吟,此时各管相应浓度为04.8 10-1mol/L(O100吨L),加盖剧烈振摇,使其溶血,按上述分析步骤进行测定,以不同浓度所测得的吸光度为纵坐标,铅浓度为横坐标,绘成标准曲线。BS说明a. 本法的检测下限为2.08 10 mol/L(O. 43 g/L)稀释血样sb. 本法的回收率为98104%c. 本法的精密度(以变异系数表示为J.7 4. 2%(0. 02 o. 05吨Pb范围,d. 使用的玻璃、塑料器皿及注射
15、器等洗净后,必须在1 1硝酸中浸泡过夜,用重蒸水淋洗干净后,最后用超纯水至少淋洗三次,烘干包装备用,e. 采血房间应洁净,防止环搜中的铅污染血样sf. 采血时,用。.48 mol/L(3%)硝酸棉球、超纯水棉球、酒精棉球依次擦净被检者取血部位的皮肤gg. 仪器工作条件(PE 3030型原子吸收分光光度计,HGA500型石墨炉,AS-40自动进样器)波长283. 3 nm 干燥!OOC 50s !Os 灯电流8 mA 灰化500 30 s IO s 狭缝0. 7 nm 原子化2200 0 s 4 s 石墨容器热解涂层石墨管j净化2600 1 s 4 s 能量59 载气流量为300mL/min 原
16、子化时停气219 C1 原理GB 1150 4 - 8 9 附录C血中原畔喻的测定一一荧光光度法(补充件原口琳(FEP)为荧光物质。血样经生理盐水稀释后,用乙酸乙酶和冰乙酸混和液破坏血中红细胞,使原吟琳溶解于混和液中,再以稀盐酸萃取原Pr琳,在激发光波长403nm时,发射光在605nm波长处显示其荧光谱峰,根据荧光强度定量C2仪器. 离心机80-1型,b. 旋涡混合器,xw80型sc. 电磁低压吸引器,CX-1型gd. 具塞试管,e. 荧光分光光度计或930型荧光光度计q试弗j. 肝素抗凝剂g取一支12500u肝素抗凝剂,用O.154 mol/L(O. 9%)氯化销溶液稀释至25mL(500
17、u/mL) 1 b. 50g/L(5%)硅藻土生理盐水悬浮液g称取Sg硅藻土(kiesl-gubr 化学纯,以生理盐水配制成JOO mL1 c. 4 I I乙酸乙醋冰乙酸1!和液zd. O. 5 mol/L盐酸,e. 原叶琳标准贮备液:用十万分之一天平精确称取o.00100 g原吟琳加入12.5 mL盐酸溶解,移入100mL容量瓶中,用去离子水稀释至刻度,此溶液浓度为18m。l/L(JO.。g/mL)原叶琳,f. 原口卡琳标准应用液z取0.50 mL贮备液置于50mL容量瓶中,用4 I乙酸乙酶冰乙酸混合液稀释至刻度,此溶液为0.18 mol/L(O. I啤mL)的原卧琳。C4 血样分析步骤C4
18、. 1 取20L耳垂或手指血置于盛有0.J mL肝素抗凝剂溶液的小试管中,加入2滴硅藻土生理盐水悬浮液,混匀加入4.0 mL乙酸乙醋冰乙酸混和液。C4.2 另取2个小试管,一为空白管,一为标准管,各加2滴硅藻土生理盐水悬浮液,在空白管中加入4.0 mL乙酸乙醋冰乙酸混合液,标准管中加入0.5 mL原叶琳标准应用液含原吟琳。.05 g)再加3.5 mL 乙酸乙醋冰乙酸混和液c4.3 将溶液混匀后,离心(3000r/min)15 min,将上精液分别移入25mL具塞试管中,各加4.0 mLO. 5 mol/L盐酸用旋涡混合器旋涡2min或手振摇5min,待分层后,弃去上层有机溶剂。c4. 4将下层
19、稀盐酸溶液在30min内,分别用比色皿,在激发光波长403nm(狭缝10nm)、发射波长605 nm(狭缝5nm)处,灵敏度3+0,测其荧光强度。目标准曲线的绘制取6支离心管,向各管中加入2滴硅藻土生理盐水混悬液,然后配制表Cl中标准系列g220 管号原叶琳标准应用液 O. 18 mol/L(O I g/mL ),mL4 I乙酸乙酶冰乙酸混合液,mL 。4 GB 1150 4 - 8 9 表Cl2 3 O. I o. 3 3. 9 3. 7 4 5 6 o. 5 o. 7 J. 0 3.5 3 3 3. 0 原叶琳含量,mol(g)0 o. 018(0. 01) o. 054(0. 03) o
20、. 090(0. 05) o. 126(0 07) o. 180(0 10) 将溶液混匀后,按上述操作步骤C4.3 C4. 4进行操作,以峰高扣除空白的峰高)为纵坐标,原吟琳最为横坐标,在坐标纸上绘制标准曲线。注如用930型荧光光度计测定,则应选用第一滤色片波长420nm(581 G型光电比色计上42号滤色片h第二滤色片波K550nm1机械调零,调节100开关至最大,灵敏度开关重5档时,测定荧光强度cs 计算在标准曲线的线性范围内,根据样品测得的峰高(cm或格数)按式(Cl)计算s血中原叶琳(FE凹的含量mol/L(g/100mL血)样品管峰高(cm或格数)一空白管峰高(cm或格数o. 05
21、一x 1000 标准管峰高(cm或格数一空白管峰高(cm或格数o. 02 Cl说明Cl. 1 本法的检测下限为o.005吨。Cl. 2 本法的回收率为90%100%。C7.3 本法的精密度(以变异系数表示)为. o. 23!. 06% (0. 01 0. I吨一一荧光分光光度汁b. o. 2 4 8. 33%(0. 01 0. I吨)930型荧光计。Cl. 4 样品收集和保存的要求z. 采血时,血样中要加入肝素就凝剂,防止血液凝固,b. 血样要冷藏保存,一般可保存3天。C7.5 操作中的有关注意事项a. 操作中使用的玻璃器皿,要用清洁液浸泡,不能用肥皂粉清洗,b. 各种试剂一定要用去离子水配制
22、。Dl 原理附录D血中镑原畔固体的测定一仪器法(补充件 ( Cl ) 铸原叶琳(ZPP)具有特征性的荧光光谱,在激发光波长420nm时,发射光波长为594nm,用表面荧光法测量其荧光强度进行定量D2仪器a. 血液荧光计(AVIV Hematofluorometer) ; b. 盖玻片24mm 24 mm1 221 GB 11504 89 血红蛋白吸管。D3血样分析步骤将ZPP标准片置于仪器的测量架上进行测定,如显示数据与标准片一致,说明仪器工作正常。换上清洁的盖玻片,先测空白时的读数,然后加一滴血(约1020L),使铺满测量区测样品读数。D4 计算如仪器测定值用何gHb表示,则需同时测定血红蛋
23、白,并用式(01)、(02)计算sZPP吨gHb样品读数一空白读数. (01) ZPP mol/L(g/dL )= ZPP g/gHb X Hb g/L(g%) (02) 式中:Hbg/L一一用氟化高铁血红蛋白法测定的1000 mL血中血红蛋白的克数。D5 注意事项a. 所用盖玻片必须很清洁,如手指触及测量区即能引起结果偏离;b. 血液标本如未铺满测量区,或内有气泡,都能影响测定结果3 缺铁性贫血患者钵原卧琳亦可能增高gd. 本仪器宜在室温1825下操作。E1 原理附录E尿中B氨基乙酷丙酸的测定一一乙酷乙画萃取比色法(补充件)在pH为4.6及温度lOOC的条件下,尿中B氨基乙酷丙酸。ALA)与
24、乙酸乙酸乙酶缩合生成口比咯化合物。此化合物可被乙酸乙酣萃取,并与改良显色剂(对二甲氨基苯甲隆)作用生成红色化合物,根据颜色深浅进行比色定量。E2仪器a. 具塞比色管(10mL),具塞离心管(10mL); b. 离心机$ 水浴锅gd. 分光光度计E3试剂a. 乙航乙酸乙酶;b. 乙酸乙酶gc. 乙酸盐缓冲液(pH4.6),于700mL水中加入57mL冰乙酸、82g无水乙酸纳,溶解后加水1 000 mL; d. 对工甲氨基苯甲酸改良显色剂g于50mL量筒中,依次加入30mL冰乙酸、1g对工甲氨基苯甲醒、5mLll. 6 mol/L(70%l高氯酸(原装)、5mL水,溶解后,用冰乙酸稀释至50mL,
25、混匀,转入试剂瓶中,贮于冰箱中se. ll ALA标准液贮备液2准确称取氨基乙酸丙酸盐酸盐。ALAHCl)l2. 8 mg,用水溶解,并稀释至100mL。此液浓222 GB 1150 4 - 8 9 度为71;.8urnol/L(l mLlOO吨)ALA,贮于冰箱中可保存两个月以上,应用液z取贮备液10mL于100mL容量瓶中,并稀释至刻度,此液浓度约等于76.28mol/L(l mL = 10 g)ALA。E4 尿样分析步骤E4. 1 分别量取2mL尿样子两支10mL具塞比色管内,各加入2mL乙酸缓冲液,混匀,其一为样品管,另一为尿样空白管。向样品管中加入0.4 mL乙酸乙酸乙酶,向尿样空白
26、管中补加0.4 mL乙酸缓冲液,分别混匀,同时置沸水浴中加热10min,取出冷却至室温E4. 2 以下步骤按标准曲线的绘制E5.3E5.5进行目标准曲线的绘制E5. 1 取10mL具塞离心管6支,按表El配制标准色列z表El管号。I l-ALA标准应用液,mL。o. 2 水,mLI. 8 2 3 0 6 I. 0 I. 4 I. 0 4 I. 4 o. 6 5 2. 0 。0-ALA吉量,mol(g)2. 0 0 15.3(2) 45 8(6) 76 3(10) 106 8(14) 152 5(20) ES. 2 各加2mL乙酸缓冲液,O.4 mL乙酷乙酸乙酶,混匀,于沸水浴中加热10min,
27、取出冷至室温。E5. 3 各加4mL乙酸乙酶,加塞振摇50次,离心5min ,取出静置分层。ES. 4 各取2mL乙酸乙酶萃取液,于另外6支10mL具塞比色管中,各加改良显色剂2mL !JD塞振摇,静置10min. ES. 5 用比色皿在波长553nm(或绿色滤光片)下,以乙酸乙醋作参比,测得各标准管吸光度。E5. 6 以吸光度扣除空白吸光度)为纵坐标,ALA量为横坐标,在坐标纸上绘制标准曲线。ES 计算样品管吸光度减去尿空白管吸光度,查标准曲线得样品管中ALA含量mol(g)。El 说明尿中ALA的含量mol/L(mg/L)样品中ALA的含量mo!(闯)分析样品的体积10-L(mL). 乙酸
28、乙醋、乙酸乙酸乙黯最好为近期产品。改良显色剂宜新鲜配制sb. 加入显色JF!J后,应静置10min,比色应在30min内完成p(El ) c. 尿液易腐败,可导致pH升高,影响测定结果。如不能及时测定,应将尿液保存在冰箱中sd. 其他与对二甲氨基苯甲隆显色剂反应的阳性物质,由于不被乙酸乙醋萃取,故不干扰测定ze. 测定尿样时,可同时做标准测定(取2mL标准应用液。计算:U 0 1000 u - 0 ALAm。I/L(mg/L)一一x o. 02一一一一一102 s .(E2) 式中,u测定管吸光度,。一空白管吸光度$3一一标准管吸光度。223 Fl 原理GB 11504-89 附录F尿中8氨基
29、乙酷丙酸的测定一氯仿萃取比色法(补充件尿中ALA与乙酷乙酸乙酶在pH6.8及100条件下,作用生成毗咯衍生物,与对二甲氨基苯甲庭反应生成红色化合物,用氯仿提取,比色定量尿中干扰物质在弱酸性条件下先用正丁醇抽取去除),F2仪器721分光光度计。H试剂a. 3. 5 mol/L(20%l乙酸溶液(V/V); b. 正丁醇(分析纯),c. 氯仿(分析纯hd. O. 5 mol/L(M)磷酸盐缓冲液(pH6.8), O. 5 mol/L(M)Na2HPO,溶液称取Na2HP0412H2089. 54 g,用蒸馆水稀释至500mL。0. 5 mol/L(M)NaH2PO,溶液z称取NaH2P042H20
30、30. 01 g,用蒸馆水稀释至500mL。以上两种溶液等量混合即成pH6.8磷酸盐缓冲液ge. O. 2 mol/L(M)二氯化柔液g称取工氯化柔5.4304 g,用蒸缩水稀释至100mL置棕色瓶,保存在37C水温箱中,f. 显色JF!J称取对二甲氨基苯甲酸4g,加入冰乙酸128mL!. 6 mol/L(70%)浓高氯酸40mL,0.2m。l/L(M)二氯化柔液IOmL,浓盐酸40mL,混匀,置棕色瓶,冰箱备用,g. 乙默乙酸乙酶磷酸盐缓冲液乙酸乙酸乙醋1份加入19份磷酸盐缓冲液即成(If面用时需振摇) h. b-ALA贮存标准液i1;:!. 8mol/L ( 1 00 g/mL):准确称取
31、氨基乙酸丙酸盐酸盐(C5H,N03 HCI) 12. 8 mg置于100mL容量瓶中,用蒸倒水溶解并稀释至费j度$I. &-ALA应用标准液IG.5 rnol/L(20吨mL)2精确吸取ALA贮存标准液20mL,置于100mL容量瓶中用蒸缩水稀释至J度。F4 尿样分析步骤F4. 1 提取a于25mL具塞试管中加入尿液2mL,3. 5 mol/L(20%)乙酸溶液2mL及正丁醇BmL,紧塞,用力振摇30s,静置分层,另取具塞试管2只,作为空白管和测定管。各管加入经正丁醇抽提后的下层尿液0.5 mL. F4.2 显色在测定管中加入1.5 mL乙酷乙酸乙醋缓冲液,空白管中加入pH6.8磷酸盐缓冲液1
32、.5 mL, 分别混匀后置沸水浴中加热10min ,取出用冷水迅速冷却后,各管中加入2mL显色剂,混匀,放置10min,加入氯仿8mL,紧塞振摇20次,分层后用水泵或毛细管吸弃上层水液加入无水硫酸锅约1g.振摇除去水分,在1030min内,用光径。cm)比色杯于556nm处比色,以空白管校正吸光度至零点,读取吸光度,查阅标准曲线F5 标准曲线的绘制取具塞试管6只,分别标号为1、2、3、4、5、6,然后按表Fl进行操作g224 GB 1150 4 8 9 表Fl管号I 2 3 4 5 6 b-ALA应用标准液I.ic. mol/L(20 g/mL),mL 0 0 4 o. 8 J. 2 J. 6
33、 2 0 蒸铺水,mL2. 0 I 6 J. 2 O. 8 0. 4 0 相当ALA啻量,mol(g)0 IJ. 9(2) 23. 8(4) 35. 7(6) 47. 6(8) 59. 5(10) 加3.5 mol/L(20%)乙酸溶液2mL及正了醇8mL,紧塞,用力振摇30s,静置分层,吸取经正丁醇抽提后的下层液O.5 mL于另外6只具塞试管中,然后按尿样分析法中显色步骤进行操作,以1号管作空白管,读取各管吸光度读数,绘制标准曲线。F6 计算测定时,尿液、乙酸和正丁醇混匀抽提后,下层液O.5 mL仍相当于原来的尿标本O.5 mL。尿o-ALAmol/L(mg/L)0.5 mL尿内ALA之mo
34、l(g)数(标准曲线中查出)o. 5 =0. 5 mL尿中ALA之mol(g)数2”.”( Fl ) Fl说明. 当尿中ALA含量在76.28mol(lO吨)范围内,呈直线关系,当其含量高时,宜稀释后进行测定gb. 尿提取液须加入管之底部,使之与乙默乙酸乙酶充分混匀,不然结果偏低, 显色剂置于冰箱内,d. 空白管在一般情况下可省去ge. 尿样宜新鲜,腐败尿不能用,f. 正常人尿中含有少量o-ALA0注g上海市杨浦区中心医院1978年测定101例正常人一次尿,其结果b-ALA为17.78士5.27 mol/L(2. 97士o.88 mg/L). Gl 原理附录G尿中龚略略棕色素)的半定量测定(补
35、充件尿液中粪卧琳原经过氧化氢氧化成粪叶琳,粪吟琳在弱酸性尿中,用乙酿提取,含有粪叶琳的酷层在紫外灯下现红色荧光。G2仪器紫外灯(波长350410nm)。G3试$Ja. 9. 8 mol/L(30 % )过氧化氢液sb. 乙酸乙酷混合液gl份冰乙酸与3份乙隧混合,密塞贮存。?2j GB11504 89 G4 尿样分析步骤取25mL具塞试管加尿样20mL、9.8 mol/L(30%)过氧化氢一滴、乙酸乙酷混合液5mL0加塞颠倒混匀数次,放气,塞紧再振摇数十次,放置暗处1224h于紫外灯下观察结果。G5 结果判断正常人阴性z酷层蓝、绿或紫色GS说明阳性,酷层淡红色荧光s抖,酷层明显红色荧光,咐,酷层
36、深红色荧光g怖,酷层砖红色荧光。a. 粪叶琳的吸收光带350410nm1 b. 留尿于棕色瓶中,置暗处严禁受日光照射,避高温sc. 取新鲜尿或贮存于冰箱内不超过6天之尿测定,腐败之尿不能用。附录H正确使用标准的说明(参考件)H1 本标准适用于生产中接触铅烟或铅尘而引起的慢性中毒H2 诊断时应作环境调查,并结合职业史和临床表现综合分析方可确诊。H3铅中毒诊断指标比较多,各种指标的检测方法也有多种由于方法、仪器、地区等因素的区别,其正常值也有差别,目前尚未建立自己正常值的单位可以使用邻近地区所用的正常值,并参考本标准中提出的数据,但要求做到检测方法一致另外在诊断时,不能凭一次检验结果即下结论H4
37、铅性绞痛主要表现为顽固便秘几天后出现阵发性腹正中绞;!llJ样疼痛、腹软、喜按等需结合职业史、现场情况,在排除其他原因引起的类似疾病后方可诊断。H5 诊断性驱铅试验主要应用于一些长期在空气中铅超过国家最高容许浓度的现场工作的工人,有临床症状而化验指标仍属正常范围者,药物可用依地酸二销钙o.5). 0 g.分2次肌肉注射或加入5%葡萄糖液500mL中一次静脉滴注,对诊断性驱铅试验的尿铅值,应参考本标准并结合具体情况决定。HS 驱铅治疗常用依地酸二锅钙、二流基丁二酸销等,一般34日为一疗程,二疗程间隔停药34日。使用时应根据患者的具体情况结合药物的品种剂量而定团对轻度铅中毒的治疗建议一般不超过3疗程。附加说明2本标准由卫生部卫生监督司提出本标准由上海市劳动E生职业病防治研究所负责起草,由上海市杨浦区中心医院、上海医科大学、上海医科大学附属华山医院、中山医院参加起草。本标准由卫生部委托技术归口单位中国预防医学科学院劳动卫生与职业病研究所负责解释226