1、中华人民共和国国家标准食品添加剂糖化酶制剂Fo。dadditive Glucoamvlase preperatlon UDC 661. 733 664 GB 8276-87 本标准适用于由发酵法生产，经提纯和j取，供食品生产作添加剂用的糖化酶制剂。1 技术要求1. 1 外观s固体时，粉状，无结块。液体时，黄褐色，允许有少量凝集物1. 2 项目和指标表1指标项目固体30 000, 40 000, 50 000, 60 000, 酶活力，u/g(mL) 80 ooo, 100 000, 150 ooo. 200 000 水分，%小于8 0 细度（通过40日铜网筛，%不低于80 酶活力保存率（室温，
2、半年），%不低于80 _j;金属以Pb计，%不超过0.004 铅，%不超过o. 001 呻（以A，计），%不超过o. 000 3 黄曲霉毒素酌，%不超过0 000 000 5 大肠菌群，个lOOg(mL) 不多于30 沙门氏菌不得栓出2试验方法2. 1 外观z用目视判定。中华人民共和国轻工业部198710-19批准90 液体20 000. 30 000 40 000 50 000 60 000. 80 000 1988 02-01实施2.2酶活力测定2 2. 1 试剂GB 8276-87 2 2. 1 1 o. IN乙酸乙酸销缓冲溶液（pH4.6) I称取6.7g乙酸纳（CH,COONa 3H
3、,0J，吸取冰乙酸2.6mL，用蒸馆水溶解定容至IOOOmL，上述缓冲榕液应以自费度计校正pH值。2 2. 1 2 O. 05N硫代硫酸铺溶液z按GB601化学试剂标准溶液制备方法中2.7执行。2213 O.lN礁液2按GB601 化学试剂标准溶液制备方法中2.10执行。2 2. 1 4 O. IN氢氧化锅溶液z按GB601 化学试剂标准溶液和j备方法中2.2执行。2-215 2N硫酸溶液z量取分析纯浓硫酸（比重J.84) 5. 6mL缓缓加入适量蒸偏水中，冷却后用蒸馆水定容至JOOmL，摇匀。2. 2. 1. 6 20 %氧氧化销榕液z称取20g分析纯氢氧化俐，用蒸馆水溶解定容至！OOmL.
4、2.2.1.7 2%可溶性淀粉溶液z称取可榕性淀粉2.00g，然后用少量蒸馆水调匀，徐徐倾入已沸的蒸馆水中，煮沸至透明，冷却，用蒸馆水定容至JOOmL，此榕液需当天配制。注可向野性淀粉应符合HG3 3095质量标准要求。2.2.2 测定程序2.2.2. 1 待测酶液的制备z称取酶粉2.000 Og （或J.OOmL酶液），但l入SOmL烧杯中用少量的乙酸乙酸锅缓冲溶液（pH4.6）溶解，并用玻璃棒捣碎，将上层清液小心倾入适当的容量瓶中，沉渣再加入少量上述缓冲溶液。如此反复捣研34次，最后全部移入容量瓶中，用缓冲溶液定容至刻度，摇匀，用4层纱布过滤。再用滤纸槽，滑，滤液供测定用。浓缩酶液可直接吸
5、取定量于容量瓶中，用缓冲溶液稀释定容至费l度。注2制备酶液时酶液浓度最仔控制在f肖娓O.OSN硫代硫酸销空白一一样品）的差数为36mL左有（以每毫升酶活力约5090单位均宦2.2.2.2 测定于甲、乙两支50mL比色管中分别加入2%可溶性淀粉溶液25mL,0.M乙酸乙酸纳缓冲溶液（pH4.6l5mL.摇匀a于40士o.2的恒温水浴中预热5IOn1in.在甲管中加入酶制备液z. Om_ （酶的总活力约l10 l 70单位）立即ic时，播匀。在此温度下准确反应lh后立即在甲、乙商管各加20%氮氧化锅溶液。2mL，摇匀将两管取出迅速用水冷却，并于乙管中补加酶制备液z.OmL 作为对照）取两管中七述反
6、应液各5mL放入礁量瓶中准确加入。IN棋液！OmL，再加O.N氢氧化饷溶液！5mL边加边摇晃），放置暗处ISmin，加入ZN硫酸ZmL.用o.05N硫代硫酸纳溶液滴定毫无色为终点。2. 2. 2. 3 计算lg酶粉或！mL酶液在40、H4.6的条件下，lh分解可溶性淀粉产生！mg葡萄糖的酶量为个酶活力单位。I 32. 2 X= A） x N 90. 05 x一一xn ”. . ( 1 ) 2 5 式中X一酶活力单位，叫区mL); A一一空白试验消耗硫代硫酸例溶液的毫升敬R一一样品消耗硫f.；.硫酸纳榕液的毫升数；N一硫代硫酸糊f阔的当量浓度：，稀释倍数：go. 05 lmL!N硫代硫俄纳相当葡
7、萄糖毫克数，l/2一一折算成ln1L酶液的量32. 2一反应液总体丰J .毫升数$5一一吸取反应液的毫升数。为计算方便可按稀辑倍数参考表计算系数乘以i滴定空白和样品所消耗。.05N硫代硫酸制溶液Yl 的差值（A-B）为酶活力单位表2为稀释倍数参考表。稀释倍敬原液2 5 10 15 20 25 30 2. 3 水分2.3. 1 测定程序事GB 8276-87 表Z稀释倍数参考表数精串倩数系数14-5 35 507. 5 29 40 580 72.5 45 652. 5 145 50 725 217.5 100 l 450 290 200 2 900 362-5 250 3 625 435 于己知
8、恒重的40mmX25mm称量皿中，称取酶粉约2.000饵，在105110恒温干燥箱内烘施，移至干燥器中冷却，称重，再在干燥箱内烘干直至恒重2.3.2 计算式中X1 样品中水分的含量，%，W一一称量皿质量，g;W1 烘干前皿加样品质量，g;w，一一烘干后皿加样品质量，目。2.4 细度2.4. 1 测定程序w-w. 1古拔一气ifXlO。”. ( 2 ) 称取IOOg酶粉用40目标准分样筛（铜筛）筛分，称其未通过的酶粉质量e2.4.2 计算式中x, 酶粉样品细度，%.M一一原酶粉质量，g;m一一筛后留存酶粉质量，g。2.s酶活力保存率式中x, 酶活力保仔率%：E一一原酶粉（液）活力zJ: 检测酶活
9、力竹2-6 重金属2. 6- 1 试开1J2.6.1.1 硝酸：分析纯2-6 1.2 硫酸分析纯。92 X，与空XlOO “. ( 3 ) x，斗XJO。”.（4 ) CB 8276-87 2.5. 1. 3 盐酸s分析纯。2- 6. 1- 3. 1 6N盐酸g量取500mL盐酸，用蒸馆水稀释至1OOOmL。2. 6 1 3. 2 lN盐酸2量取83mL盐酸，用燕馆水稀稀至1OOOmL. 2.s. 1.4 氨水g分析纯。2. 6. 1. 4. 1 5N氨水2量取333mL氨水，用蒸馆水稀释至1OOOmL. 2-6-1-4.2 IN氨水z量取66mL氨水，用蒸馆水稀释至1OOOmL. 2. 6.
10、 1- 5 pH3. 5的乙酸盐缓冲液z称取25.0g乙酸镀溶于25mL蒸馆水中，加6N盐酸45mL，用稀盐酸或稀氨水调节pH至3.5 .用蒸馆水稀释至lOOmL.2.s.1.s 1%盼歌指示液2按GB603.配制。2.s.1.1 饱和硫化氢水，按GB603配制（此溶液于使用前制备）。2-6-1-8铅标准榕液每毫升含Q.Olmg铅按GB602配制，临用前用蒸馆水稀释10倍。2. 6- 2 测定程序2.s.2. 1 样品处理称取5.Og样品置于250mL凯氏烧瓶或三角烧瓶中，加1015mL硝酸浸润样品放置片刻（或过夜后，缓缓加热，待作用缓和后稍冷，沿瓶壁加入5mL硫酸再缓缓加热至瓶中溶液开始变成
11、棕色，不断漓加硝酸（如有必要可滴加些高氯酸）至有机质分解完全，继续加热，至生成大量的二氧化硫白色烟雾。最后溶液应呈无色或微带黄色。冷却后将溶液移入50mL容量瓶中，用水洗涤三角烧瓶，将洗液并入容量瓶中，加蒸锢水至刻度，混匀，每lOmL该溶液相当于lg样品。取同样重的硝酸、硫酸按上述方法作试剂空白试验。2.s.2.2 样品测定2.s.2.2. 1 溶液Ag吸取含铅标准液lmL于50mL纳氏比色管中，加水至25mLj昆匀，加1滴1%盼欧指示液g用稀盐酸或稀氨水调节pH至中性（盼歌红色褪去。加入pH3.5的乙酸盐缓冲液5mL，用蒸馆水稀释至40mL,），昆匀备用。“ 2.s.2.2.2溶液B：取一支
12、与溶液A所配套的纳氏比色管，加入20mL样品液，加蒸馆水至25mL混匀，加l滴1%盼歌指示液，用稀盐酸或稀氨水调节pH至中性（盼歌红色褪去），加入pH3.5的乙酸盐缓冲液5mL，用蒸馆水稀释至40mL,i昆匀备用。2.s.2.2.3 溶液c，取一支与溶液A、B所配套的纳氏比色管，加入与溶液B相同量的样品液，再加入与溶液A相同量的铅标准液，加蒸锢水至25mL，棍匀，加L滴1%酸欧指示液，用稀盐酸或稀氨水调节pH至中性（盼Ill红色刚褪去），加入pH3.5的乙酸盐缓冲液5mL，用蒸馆水稀释至40mL,j昆匀备用。2.s.2.2.4 向各管中加入lOmL新鲜制备的硫化氢饱和液，jfi匀，放置lOmi
13、n后在白色背景下观察，溶液B的色度不得深于溶液A的色度，溶液C的色度应与溶液A的色度相当或深于溶液A的色度。2. 7铅按GB5009. 12食品中铅的测定方法中的双硫腺单色法执行。样品处理采用硝酸硫酸法。2-8硝按GB5009. 11食品中总碑的测定方法中的银盐法执行。样品处理采用硝酸硫酸法。2.9黄曲霉毒素B,按GB5009. 22食品中黄曲霉毒素队的测定方法执行。2. 10大肠菌群按GB4789. 3食品卫生微生物学检验大肠菌群测定执行。2. 11 沙门氏菌按GB4789. 3食品卫生微生物学检验沙门氏菌检验执行。93 GB 8276-87 3检验规则3. 1 产品需经生产厂技术部门检验，
14、并签发合格证方可出厂。生产厂以每一生产班次或每一罐进库的量为同一批次的产品。3.2 订货单位若需抽样检验，应从该酶制剂中抽取两份，按本标准规定的试脸方法进行检验若有一个样品或一项指标不符合标准的要求，应与生产厂协商，再取一倍量的同批样晶共同进行复验，如仍不合格时，则全批产品作为不合格品，退交生产厂处理。若产品经复验合格，订货方应承担试验费用如不合格，应由生产厂家承担试验费用。4 标志、包婆、运输、贮存4. 1 酶制剂的外包装箱，除注明晶名、生产厂名、规格、注册商标外，还应注明食品添加剂，箱里并应附有产品检验合格证，合格证上印有品名、批号、数量、规格、生产日期、检验员等4.2 内包装为食品用塑料袋，包装分为2kg、3kg，应印有注册商标、产品名称、规格、重量、生产厂名。4.3本品含有生物活性物质，对光线、温度、湿度易引起失活。在运输途中应避免日光曦晒和雨淋。贮存仓库应保持清洁、阴凉、干燥、通风附加说明：本标准由中华人民共和国轻工业部、卫生部提出。本标准由轻工业部食品发醇工业科学研究所、卫生部食品卫生监督检验所归口。本标准由无锡酶制剂厂、轻工业部食品发酵工业科学研究所、天津市卫生防病中心、无锡市卫生防疫站负责起草。94
