1、ICS 65. 120 B 46 道国中华人民共和国国家标准G/T 13092一2006代替GB/T13092-1991 饲料中霉菌总数的测定Enumeration of molds count in feeds 2006-06-09发布中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局中国国家标准化管理委员.2006-09-01实施中华人民共和国国家标准饲料中霉菌总数的测定GB/T 130922006 9峰中国标准出版社出版发行北京复兴门外三里河北街16号邮政编码:100045网址电话:6852394668517548 中国标准出版社秦皇岛印刷厂印刷各地新华书店经销9峰开本880X12301/16 印张
2、O.5 字数9千字2006年10月第一版2006年10月第一次印刷唔书号:155066. 1-28133定价8.00元如有印装差错由本社发行中心调换版权专有侵权必究举报电话:(010)68533533GB/T 13092一2006前言本标准是对GB13092-1991(饲料中霉菌的检验方法的修订。本标准与GB13092-1991相比主要差异如下:补充规定了检验程序中磨碎的细度;一一补充并规范设备和材料的具体规格;根据GB/T4789.2-2003(食品卫生微生物学检验菌落总数测定修改了计算方法;一一-为了与国际及国内的统一，将霉菌总数的单位修改为:cfu每克(或每毫升)，即cfu/g(mL)。
3、自本标准实施之日起，GB13092-1991同时废止。本标准的附录A为规范性附录。本标准由全国饲料工业标准化技术委员会提出并归口。本标准起草单位:国家饲料质量监督检验中心(北京)。本标准主要起草人:李丽蓓、饶正华、杨曙明、苏晓鸥。本标准于1986年首次发布，1991年第一次修订。I 饲料中霉菌总数的测定1 范围本标准规定了饲料中霉菌总数的测定方法。本标准适用于饲料中霉菌总数的测定。2 规范性引用文件GB/T 13092-2006 下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议
4、的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。GB/T 4789.2-2003 食品卫生微生物学检验菌落总数测定GB/T 6682-1992 分析实验室用水规格和试验方法GB/T 14699. 1饲料采样3 术语和定义下列术语和定义适用于本标准。3. 1 每菌总数molds count 饲料检样经处理并在一定条件下培养后，所得1g检样中所含霉菌的总数。4 原理根据霉菌生理特性，选择适宜于霉菌生长而不适宜于细菌生长的培养基，采用平皿计数方法，测定霉菌数。5 设备及材料5.1 分析天平:感量O.001 g。5.2 恒温培养箱:(2528) oC士lOC。5
5、.3 冰箱:普通冰箱。5.4 高压灭菌器:2.5kg。5.5 水浴锅:(4577) oC士lOC。5.6 振蔼器:往复式。5. 7 微型1昆合器:2900 r/min。5. 8 灭菌玻璃三角瓶:250mL, 500 mL。5.9 灭菌试管:15 mmX 150 mm。5.10 灭菌平皿:直径90mm。5. 11 灭菌吸管:lmL，10mLo5.12 灭菌玻璃珠:直径5mm。5. 13 灭菌广口瓶:100mL, 500 mL。5. 14 灭菌金属勺、刀等。GB/T 13092一20066 培养基和试剂除特殊注明，所用试剂均为分析纯;水符合GB/T6682-1992三级水规格。6. 1 高盐察氏培
6、养基:制备方法见附录A。6.2 稀释液:称取氯化铀8.5g，珞于1000 mL蒸馆水中，分装后，1210C高压灭菌30min。6.3 试验室常用消毒药品。7 测定程序霉菌测定程序见图1。图1霉菌测定程序8 试样的制备按照GB/T14699. 1方法进行采样，采样时必须特别注意样品的代表性和避免采样时的污染。首先准备好灭菌容器和采样工具，如灭菌牛皮纸袋或广口瓶，金属勺和刀，在卫生学调查基础上，采取有代表性的样品，粉碎过0.45mm孔径筛，用四分法缩减至250g。样品应尽快检验，否则应将样品放在低温干燥处。2 GB/T 13092-2006 9 分析步骤9. 1 以无菌操作称取检样25g(或25m
7、L)，放入含有225mL灭菌稀释液的玻璃二角瓶中，置振荡器上，振摇30min，即为1: 10的稀释液。9.2 用灭菌吸管吸取1: 10稀释液10mL，注入带玻璃珠的试管中，置微型说合器上j昆合3min，或注入试管中，另用带橡皮乳头的1mL灭菌吸管反复吹吸50次，使霉菌抱子分散开。9.3 取1mL 1 : 10稀释液，注入含有9mL灭菌稀释液试管中，另换一支吸管吹吸5次，此液为1: 100稀释液。9.4 按上述操作顺序作10倍递增稀释液，每稀释一次，换用一支1mL灭菌吸管，根据对样品污染情况的估计，选择三个合适稀释度，分别在作10倍稀释的同时，吸取1mL稀释液于灭菌平皿中，每个稀释度作两个平皿，
8、然后将凉至45C左右的高盐察氏培养基注入平皿中，充分泪合，待琼脂凝固后，倒置于(2528)C士1C恒温培养箱中，培养3d后开始观察，应培养观察一周。10 计算10. 1 通常选择霉菌数在10个100个之间的平皿进行计数，同稀释度的2个平皿的霉菌平均数乘以稀释倍数，即为每克(或每毫升)检样中所含霉茵总数。10.2 稀释度选择和霉菌总数报告方式按表1表示。表1稀释度选择和霉菌总数报告方式稀释液及霉菌数两稀释液霉菌总数/报告方式/例次稀释度选择之比cfu/g( mL)J cfu/g( mL)J 10 1 102 103 l 多不可计80 8 选1O100之间8000 8. OX 103 2 多不可计
9、87 12 均在10 100之间比值2取较2.1 小数9500 9.5X103 4 多不可计多不可计110 均100取稀择度最高的数110 000 1. 1 X 105 5 9 2 。均10取稀释度最低的数90 90 均无菌落生长则以1乘以最低稀1X10 10 6 。释度多不可计均不在10100之间取最接近1010 200 1. OX 104 7 102 3 或100的数注:cfu/g(mL)与个/g(mL)相当。CON-NgmFH阁。GB/T 13092-2006 附录(规范性附录)高盐察氏培养基A 2 g 1 g O. 5 g O. 5 g 0.01 g 60 g 30 g 20 g 1000 mL 成分硝酸铀磷酸二氢押硫酸镜(MgS04 7H2Q) 氯化梆硫酸亚铁氧化铀煎糖琼脂蒸锢水A.1 制法A.2 加热榕解，分装后，1210C高压灭菌30min。必要时，可酌量增加琼脂。侵权必究版权专有并书号:155066. 1-28133 定价:8.00元GB/T 13092-2006
