1、GB/T 14926.2994 1 主题内容与适用范围 本标准规定了小鼠多瘤病毒（以下简称PyV）的检验方法、试剂等，适用于检测实验小鼠群的PyV病毒的感染情况。 2 引用标准 GB/T 14926.18 实验动物 淋巴细胞性脉络丛脑膜炎病毒检验方法 GB/T 14926.24 实验动物 小鼠肺炎病毒检验方法 3 材料和试剂 3.1 PyV病毒毒种。 3.2 SPF小鼠胚原代细胞。 3.3 豚鼠红细胞。 3.4 酶标仪。 3.5 荧光显微镜。 3.6 离心机。 4 检验步骤 4.1 制备ELISA抗原：将Py病毒接种原代鼠胚细胞，每隔34天更换维持液，约1014天，当细胞病变（CPE）达到时收
2、获，抗原处理方法见GB/T 14926.18中4.1. 2.2。 4.2 制备玻片抗原：同上述ELISA抗原，当CPE达时涂片，涂片方法，抗原的鉴定和保存见 GB/T 14926.18中4.2.3。 4.3 制备PyV阳性血清：用Py病毒抗原免疫SPF小鼠。 4.4 制备Py阴性血清：采集无Py病毒感染的血清，作为阴性血清。 4.5 制备PyV血凝素抗原：Py病毒接种原代鼠胚细胞，每隔34天更换一次维持液，约1014天，当CPE达收获，冻融三次，低速离心取上清液即可。 5 检验方法和结果判定 5.1 HI法，见GB/T 14926.24中5.3使用16个血凝单位，放置41h，120阳性判为阳性。 5.2 IFA法，见GB/T 14926.18中4.2。 5.3 ELISA法，见GB/T 14926.18中4.1。 5.4 IEA法，见GB/T 14926.18中4.2。 页码，1/2GB/T 14926.29942006-3-30file:/C:InetpubwwwrootdatagbbBE92629R.htm 当检样出现阳性时，选用同一种方法或另一种方法重试。如为阳性则判为阳性结果。 6 结果报告 根据判定结果，作出报告。 页码，2/2GB/T 14926.29942006-3-30file:/C:InetpubwwwrootdatagbbBE92629R.htm
