1、ICS 65.020.01 B 16 道B中华人民共和国国家标准GB/T 28076-2011 三叶斑潜蝇检疫鉴定方法Detection and identification of Liriomyza trifolii CBurgess) 2011-12-30发布2012-06-01实施数码防伪中华人民共和国国家质量监督检验检蔑总局中国国家标准化管理委员会发布中华人民共和国国家标准三叶斑潜蝇检瘟鉴定方法GB/T 28076-2011 当&中国标准出版社出版发行北京市朝阳区和平里西街甲2号(100013)北京市西城区三里河北街16号(100045)网址总编室:(010)64275323发行中心:
2、(010)51780235读者服务部:(010)68523946中国标准出版社秦皇岛印刷厂印刷各地新华书店经销蜂开本880X 1230 1/16 印张o.75 字数17千字2012年4月第一版2012年4月第一次印刷善书号:155066. 1-44632定价16.00元如有印装差错由本社发行中心调换版权专有侵权必究举报电话:(010)68510107GB/T 28076-2011 前言本标准按照GB/T1. 1一2009给出的规则起草。本标准由全国植物检疫标准化技术委员会CSAC/TC271)提出并归口。本标准起草单位:中国检验检疫科学院、中华人民共和国广东出入境检验检疫局、中华人民共和国山东
3、出入境检验检疫局、中华人民共和国云南出入境检验检疫局、中华人民共和国北京出入境检验检疫局、中华人民共和国湖南出入境检验检疫局、中华人民共和国江西出入境检验检疫局、中华人民共和国广西出入境检验检疫局。本标准主要起草人:陈乃中、吴佳教、魏晓棠、刘海军、刘忠善、张俊华、江丽辉、卢建、姜金林、黄丽莉、冯贤。I GB/T 28076-2011 三叶斑潜蝇检疫鉴定方法1 范围本标准明确了三叶斑潜蝇的检测、饲养、标本制作和室内鉴定等方法。本标准适用于进出境植物检疫、国内植物检疫和大田防治工作中的三叶斑潜蝇的检测、饲养和鉴定。2 术语和定义下列术语和定义适用于本文件。2. 1 内顶墨inner vertica
4、ls 单眼三角区后侧面2对鬓靠内的1对鬓。2.2 外顶鬓outer verticals 单眼三角区后侧面2对票靠外的1对票。2.3 后顶鬓postverticals 位于单眼三角区后方的1对票。2.4 露vibrissae 位于口器上面颊下角部位最粗的1对票。2.5 上眶鬓upper orbitals 位于眼眶上半部的鬓。2.6 下眶鬓lower orbitals 位于眼眶下半部的鬓。2. 7 眶毛orbital setulae 着生于眼眶部位的细毛。2.8 盾片scutum 双翅目昆虫中胸节背板位于盾间沟和小盾沟之间的骨片。2.9 中侧片anepisternum 中胸节的上前方侧片。是位于背
5、侧片与腹侧片之间、翅侧片之前的大型骨片。2. 10 腹侧片katepisternum 中胸节的下前方侧片。是位于中侧片下方的一近似三角形的骨片。1 GB/T 28076-2011 2. 11 端阳体distiphallus 雄成虫阳茎的端部构造，又称阳茎端。3 三叶斑潜蝇基本信息学名:Liriomyzatrifolii CBurgess , 1880)。异名:L.alliovora Frick,1925o 俗名:American serpentine leafminer、serpentineleaf miner和chrysanthemumleaf miner 0 属于双翅目Diptera，潜蝇
6、科Agromyzidae，植潜蝇亚科Phytomyzinae，斑潜蝇属LiriomyzaMiko 斑潜蝇属在全世界已知共370余种，属内形态上与三叶斑潜蝇近似的重要多食性种类还有美洲斑潜蝇L.sativae Blanchard、南美斑潜蝇L.huidobrensis C Blanchard)和番茄斑潜蝇L.bryoniae Kalten bacho 三叶斑潜蝇的其他信息参见附录A。4 方法原理根据三叶斑潜蝇的危害状，在检疫现场或发生疑似三叶斑潜蝇的田地，肉眼观察寄主叶片，取得幼虫或蝠虫样，饲养获得成虫，解剖制作雄外生殖器标本，用显微镜观察，根据形态特征对种类进行判定。5 器材和试剂5. 1 器
7、材可封口塑料袋、标签、培养皿、吸水纸、慑子、生物培养箱、小毛笔、指形管、纱布、冰箱、三角纸剪刀、昆虫针、滴管、培养皿、载玻片、盖玻片、体视显微镜s5.2 试剂荷燕尔胶(用阿拉伯树胶30g:蒸馆水50mL:水合氯醒200g :甘油20mL配方配制而成)、树脂胶、元水乙醇、氢氧化销或氢氧化饵、蒸馆水。6 检测与饲养6. 1 检测在检疫现场或发生疑似三叶斑潜蝇的田地，观察有关寄主植物叶片(参见附录A)，如发现上表发白、由细变粗、弯曲甚至缠绕的疑似虫道，观察虫道末尾有无半透明的幼虫，并进一步查找附近有无长椭圆形长约2.0mm的黄褐色蝠粒。如发现疑似蝠粒，用指形管盛装;女日发现上述幼虫，摘取叶片，用可封
8、口塑料袋装。上述管、袋均加标签，或编号，记录时间、地点、寄主、采集人等，带回实验室。6.2 饲养带虫叶片置于皿底铺有吸水纸的培养皿中，踊盛于指形管中，用纱布扎口，防止羽化成虫逃逸，放人生物培养箱中25.C30.C下培养。成虫羽化24h后可将指形管置于冰箱-l.C下不短于1h将成虫冷冻杀死。2 GB/T 28076-2011 7 标本的制作准备7. 1 成虫标本7. 1. 1 针插标本成虫标本可制作为针插标本。其中，粘虫用的三角纸应用三角纸剪刀制作;可用荷燕尔肢或其他d快干的树脂胶作为粘虫胶;成虫翅向外方、头部露出、侧身粘在三角纸尖上F要有注明地点、寄主、羽化时间等信息的标签。7. 1. 2 浸
9、泡标本也可以用元水乙醇浸泡保存成虫标本。但如果要备分子试验用，则可用无水乙醇浸泡，并冷冻保存。7.2 雄外生殖器玻片标本用昆虫针取下雄虫腹部(见附录B)投入5%氢氧化销或氢氧化饵溶液中煮沸3min-5 min(体视显微镜下观察，以骨质部分保留深色、肌肉脂肪等溶解为佳);用滴管吸移至培养皿装薄层蒸锢水中浸洗;在体视显微镜下(载物台为白色背景)用细针解剖，除去背腹板等物，仅剩第9背板及其附属构造(雄外生殖器);用针尖粘取第9背板及其附属构造至载玻片上荷燕尔肢滴中，体视显微镜下整姿，尽量使雄外生殖器构造在视野中为正面图像;封片;自然干燥或用烘箱45.C24 h烘干。8 实验室鉴定将成虫标本置于体视显
10、微镜下，雄外生殖器玻片标本置于显微镜下，观察是否符合以下鉴定特征(见附录B和附录。8. 1 潜蝇科成虫的鉴别特征体小或微小，长1.5 mm-4. 0 mm.有髦，后顶罢分歧，上眶鬓分歧，下眶鬓内向。翅C脉仅在Sc脉端处折断，Sc脉端部退化为一槽痕或与R脉合并，R脉3分支直达翅缘。腹部扁平，雌第7节长而骨化，不能伸缩。8.2 植潜蝇亚科Phytomyzinae成虫的鉴别特征Sc脉端部退化为一榴痕，独立于Rl脉之基伸达前缘脉。8.3 包括三叶斑潜蝇在内的具经济意义Liriomyr.aspp.成虫鉴别特征上额眶鬓2对，眶毛后倾;小盾片通常为黄色;翅C脉伸达M1+2脉端，它们终止于翅端附近，有第2横脉
11、。8.4 三叶斑潜蝇的鉴别特征8.4.1 成虫8.4. 1. 1 头部触角各节亮黄色E内、外顶鬓均着生于黄色区域，至少外顶鬓着生于黑黄交界处。3 GB/T 28076-2011 8.4. 1. 2 胸部盾片黑色无光泽，带灰白色绒毛被(侧光照射可见);小盾片鲜黄色;中侧片下缘具黑斑，腹侧片大部分黑色;翅M山脉末段长是次未段的约3倍;足基节黄色，腿节大部分黄色，有时有淡褐色条纹，腔节、跚节暗褐色。8.4. 1.3 雄外生殖器阳茎端阳体基半部分明显凸起，中间部位继缩明显;柄部(中阳体)长，长度接近端阳体长度。8.4.2卵白色，长椭圆形，长约0.25mm。8.4.3 幼虫和蝠幼虫3龄，初产幼虫长约0.
12、5mm，老熟幼虫长约3.0mm，略呈姐形。蝠长椭圆形，长约2.0mm , 腹面扁平，有突出的前、后气门，后气门有3个指状突。9 结果判定以8.1、8.2，8.3、8.4.1为主要依据，8.4.3和附录C可作参考，符合8.4.1.1和8.4.1.2的可初步判定为三叶斑潜蝇，且符合8.4.1.3的可判定为三叶斑潜蝇。10 标本保存经过鉴定的三叶斑潜蝇标本应永久保存，并加注明时间、地点、寄主、采集人等信息的标签。4 G/T 28076-2011 附录A(资料性附录)三叶斑潜蝇其他信息A.1 地理分布韩国、日本、菲律宾、印度、塞浦路斯、以色列、黎巴嫩、土耳其、也门、奥地利、比利时、保加利亚、克罗地亚、
13、捷克、丹麦、芬兰、法国、德国、匈牙利、冰岛、意大利、马耳他、荷兰、挪威、波兰、葡萄牙、罗马尼亚、俄罗斯、斯洛伐克、斯洛文尼亚、西班牙、瑞典、瑞士、英国、南斯拉夫、贝宁、象牙海岸、埃及、埃塞俄比亚、几内亚、肯尼亚、马达加斯加、毛里求斯、马约特岛、尼日利亚、留尼汪、塞内加尔、南非、苏丹、坦桑尼亚、突尼斯、赞比亚、津巴布韦、加拿大、美国、巴哈马、巴巴多斯、百慕大、哥斯达黎加、古巴、多米尼加共和国、瓜德罗普、危地马拉、马提尼克岛、特立尼达和多巳哥、巴西、哥伦比亚、法属圭亚那、圭亚那、秘鲁、委内瑞拉、美属萨摩亚、密克罗尼西亚、关岛、北马里亚纳群岛、萨摩亚、汤加(其中有的国家或地区声称已根除。我国台湾和大
14、陆局部也有发生。大陆实施官方控制。A.2 寄主檀物该虫为害包括重要花卉、果、蔬、棉和牧草等在内的20余科植物。重要的寄主作物包括菊花、扶朗花、大丽花、百日菊、石竹花、丝石竹花、黄瓜、南瓜、甜瓜、西瓜、旱芹、番茄、辣椒、马铃薯、豌豆、菜豆、直豆、甜菜、曹菜、蒜、韭、洋葱、青菜、白菜、高宦、首宿和棉等。其中菊科、茄科、葫芦科和旱芹是三叶斑潜蝇的嗜食寄主。A.3 生物学及传播途径产卵于寄主叶片表皮下，幼虫孵出后即潜食叶肉，主要危害上表皮下的栅栏组织，叶面上表可见弯曲缠绕的虫道，幼虫老熟后弹出，在土中或叶片上化蝠。成虫取食叶片汁液，交配、产卵。卵、幼虫和踊等随寄主叶片传带是主要传播途径。A.4 三叶斑
15、潜蝇及其相关种类的危害状寄主植物叶片上弯曲虫道及取食刻点是斑潜蝇可能存在的标识性被害状。斑潜蝇成虫取食刻点圆，直径约0.2mm，在叶片上表呈现为白色小斑点。三叶斑潜蝇及美洲斑潜蝇、番茄斑潜蝇幼虫主要潜食叶片上面部分的栅栏组织，并在取食过程中排出粪便，因此，外观虫道为白色，并透过虫道上留下的叶片上表皮可见虫道两侧交替出现的断续的黑色线状细斑。斑潜蝇种类和寄主种类等因素对虫道式样有一定影响，三叶斑潜蝇的虫道在一些寄主上缠绕比较紧密，末端甚至成块状，而美洲斑潜蝇、番茄斑潜蝇的虫道比较疏松，南美斑潜蝇的虫道常顺叶脉伸展和或限于叶脉之间。南美斑潜蝇及田间常见的豌豆彩潜蝇Chomatomyiahortic
16、ola Goureau既危害叶片上面部分的栅栏组织，也危害下面的海绵组织，故叶片下表也可见虫道。斑潜蝇幼虫老熟后，一般弹出化蝠，其弹出孔呈半圆性裂缝。豌豆彩潜蝇的蝠(白色)主要在虫道内化蝠，往往露出前截在叶片下表外。5 GB/T 28076-2011 附录B(规范性附录)三叶斑潜蝇及其重要近缘种成虫重要形态特征下眶祟复眼上眶霆单眼M1+2 外顶层内顶黑后顶黑圄B.1三叶斑潜蝇头部背面观图B.2三叶斑潜蝇翅脉示意图图B.3三叶斑潜蝇雄成虫腹部(采自Collins)图B.4三叶斑潜蝇雌成虫腹部(采自Collins)箭头所指为端阳体图B.5斑潜蝇雄外生殖器侧观圄(采自Collins)6 GB/T 2
17、8076-2011 FEN-hoNH因。GB/T 28076-2011 附录(规范性附录)三叶斑潜蝇及其重要近缘种成虫鉴别检索表C 内、外顶室主均着生于黄色区域，或至少外顶票着生于黑黄交界处2内、外顶罢均着生于黑色区域，或至少内顶票着生于黑黄交界处中胸盾片带灰白色绒毛被;M3+4脉末段长是次末段长的约3倍;幼虫和蝠后气门有3个指状突三叶斑潜蝇Liriomyzatrifolii CBurgess) 中胸盾片元如上述灰白色绒毛被;M3+4脉末段长是次末段长的约2倍;幼虫和蝠后气门有7-12个指状突番茄斑潜蝇L.bryoniae Kaltenbach M3刊脉末段长是次末段长的约3倍-4倍;触角鲜黄色;腿节主要为鲜黄色;幼虫和蝠后气门有3个指状突.美洲斑潜蝇L.sativae Blanchard M川脉末段长是次末段长的2倍-2.5倍;触角棕黄色;腿节有黑色斑块或全为黑色;幼虫和蝠后气门有6-9个指状突南美斑潜蝇L.huidobrensisCBlanchard) l 2 3 侵权必究。，u内UECO AAAU-1EEAE . 赞nu zd F气uv唱AE. 号一价书一定版权专有16.00元GB/T 28076-2011 打印日期:2012年5月14日F002
