1、ICS 65.020.01 B 16 GB 中华人民共和国国家标准GB/T 28107-2011 枣大球盼检疫鉴定方法Detection and identification of Eulecanium gigantea CShinji) 2011-12-30发布2012-06-01实施数码防伪中华人民共和国国家质量监督检验检亵总局中国国家标准化管理委员会发布中华人民共和国国家标准枣大球蜻检擅鉴定方法GB/T 28107-2011 * 中国标准出版社出版发行北京市朝阳区和平里西街甲2号(100013)北京市西城区三里河北街16号(100045)网址总编室:(010)64275323发行中心:(
2、010)51780235读者服务部:(010)68523946中国标准出版社秦皇岛印刷厂印刷各地新华书店经销* 开本880X 1230 1/16 印张1字数23千字2012年5月第一版2012年5月第-次印刷唔书号:155066. 1-41659定价18.00元如有印装差错由本社发行中心调换版权专有侵权必究举报电话:(010)68510107GB/T 28107-2011 目U昌本标准按照GB/T1. 1一2009给出的规则起草。本标准由全国植物检疫标准化技术委员会CSAC/TC271)提出并归口。本标准起草单位:中华人民共和国山西出入境检验检疫局、山西大学、中华人民共和国天津出入境检验检疫局
3、、中国检验检疫科学研究院、中华人民共和国吉林出入境检验检疫局。本标准主要起草人:李惠萍、丁三寅、连庚寅、谢映平、黄国明、陈乃中、党海燕、魏春艳、吴海军、牛春敬、田丽红、赵悠悠。I GB/T 28107-2011 枣大球盼检疫鉴定方法1 范围本标准规定了枣大球蛤Eulecaniumgigantea (Shinji) 的检疫鉴定以雌成虫的形态学特征作为依据，明确了现场检查、标本制备、镜检鉴定、样品保存的方法。本标准适用于枣大球蛤的检疫鉴定。2 术语和定义下列术语和定义适用于本文件。2. 1 尾裂(臀裂)anal c1eft 在蛤科中，阶虫的旺门位置向内凹入，虫体后面出现一条狭缝，被称为尾裂或臀裂。
4、2.2 旺极anal plate 在尾裂背底，胆门之上盖有两块三角形的硬化板，称为旺板。2.3 缸环anal ring 胆门凹人位于一筒状结构之内，后者叫胚筒(analtube) ，在旺筒的外端有一硬化环。由两个月牙形的环组成，是旺门的开口，称为旺环。胚环上有一至几列环孔，并常有旺环毛6根8根。2.4 气门路stigmatic groove 胸气门到体缘有成列的盘腺，形成气门路。2.5 气门洼stigmatic depr臼sion气门路在体缘一端的体壁有不同程度的凹陷，称为气门洼。2.6 气门剌stigmatic spine 在气门路体缘一端即气门洼处的刺称为气门和j。2. 7 盘腺disca
5、l pores 一类孔状的腺体结构，分泌蜡质物覆盖于虫体表面。助科中的特征盘腺有五格腺、多格腺和盘状孔。五格腺(q山nquelocularpores)圆形，中心有一格，周围围绕五格。多格腺(mul tilocular pores)中心具一格，周围围绕多格(五格以上)。盘状孔(preopercularpores)圆形，不分格，仅为具有颗粒状表面的膜状结构。2.8 管腺tubular ducts 一类柱形或近柱形的腺体结构，分泌蜡丝形成虫体覆盖物或卵囊。蛤科中的特征管腺为瓶状腺。1 GB/T 28107-2011 瓶状腺(invaginatedtubular duct) ，呈柱形管筒，管口内端膨大
6、有硬化框，因大小差异又分为大瓶状腺和小瓶状腺。3 枣大球蛤基本信息枣大球蛤(E.gigantea)隶属于同翅目(Homoptera)，昕科(Coccidae)，大球蛤属(EulecaniumCock erell)。枣大球.flt其他信息参见附录A。4 方法原理根据枣大球阶的寄生危害特点，检查其寄主植物，获取不同发育期的虫体，将若虫饲养至成虫，制成显微玻片进行观察，依据成虫的显微形态特征对种类进行鉴定。5 仪器、用具和试剂5. 1 仪器生物显微镜、体视显微镜、水浴锅。5.2 用具放大镜、剪刀、小刀、慑子、昆虫解剖针、小毛笔、养虫瓶、铝盒、纸袋、吸水纸、1.5 mL离心管、6cm表面皿、载玻片、凹
7、面载玻片、盖玻片、解剖刀、酒精灯、滤纸、标签。5.3 试剂70%乙薛、95%乙蹲、元水乙薛、10%氢氧化铀(或10%氢氧化饵)溶液、冰醋虚、酸乙酶溶液(冰醋酸:95%乙醇z蒸馆水体积比为2: 9 : 9)、酸性品红(酸性品红95%乙酶饱和溶液)、二甲苯、石炭酸二甲苯溶液(石炭酸z二甲苯体积比为1: 2)、中性树胶、乙醇-甘油保存液(70%乙醇z甘油的体积比为50: 1)。6 现场检查6. 1 叶片检查用放大镜检查寄主植物叶片正面、反面及叶脉两侧。如有黄色、淡黄色或黄褐色的固着虫体，体被白色蜡壳、蜡片或蜡块，则将带虫叶片取下，放人养虫瓶。6.2 枝条检查检查枝条、分叉、裂缝、芽腋及其附近，重点检
8、查枝的向地一侧:二如有灰褐色并被龟裂状蜡层的虫体，或被一层污白色毛玻璃状蜡壳虫体，则连寄主采下，放入养虫瓶或用吸水纸包被，再放入纸袋内，置于铝盒中;二如有红褐色至紫褐色半球形或近球形的虫体，或体被灰白色薄蜡粉;或为亮褐色至亮黑褐色的虫体干尸，则均连同寄主采下，用吸水纸包被，再放入纸袋内，置于铝盒中。6.3 将现场所取虫样标本送实验室鉴定。2 GB/T 28107-2011 7 实验室检疫鉴定7. 1 症状检查检查送检样品(参见6.1和6.2)，将虫样轻移入70%乙醇或乙醇-甘油保存液中固定保存。7.2 标本制备将现场所取和实验室挑取的虫样标本按固定、加热、解剖清洗、染色、脱色、脱水、封片的步骤
9、制成玻片标本(参见附录B)。7.3 镜检鉴定将玻片标本置于生物显微镜下观察形态特征，先确定是否属于蛤科(参见C.1)，然后确定是否属于大球蛤属(参见C.2)，最后核对种的特征，并与近似种相区分(参见C.3)。8 枣大球蛤鉴定特征8. 1 雌成虫8. 1. 1 田间形态特征(参见圄D.1)8. 1. 1. 1 产卵前的雌成虫虫体长18.8mm，宽18.0mm，高14.0mm，属于大球阶属中个体最大者F产卵前的年轻雌成虫体鼓起近半球形，头半部高突，后半部略狭而斜;体黑红褐色至紫褐色，或有些发绿红褐色，体背有暗红色或红褐色花斑组成的4个纵列，各斑块间不连续。靠近背中央的2列花斑较小，呈明显的3对4对
10、，外侧2纵列斑块常由6块组成。体被灰白色绒毛状薄蜡粉，蜡粉覆盖虫体不严，光滑的体壁和花纹闪光清晰可见。8. 1. 1. 2 雌成虫虫体干尸虫体干尸固着树枝很紧，可持续1年甚至更长时间不易脱落，用于捏干尸，可感到体壁薄，易将顶部捏碎。8.1.2 显微形态特征(参见图E.1)8. 1. 2. 1 体腹面腹面可见触角1对，7节，以第3节最长，第4节突然变细。足3对，均小，腿节小于气门盘直径，腔节的长为酣节的1.3倍，町、爪冠毛均细尖。胸气门2对，每条气门路上五格腺20个25个，呈不规则1列。多格腺分布于腹面中区，尤以腹部为密集。大瓶状腺在腹面亚缘区成密集带状分布，小瓶状腺见于胸部中区。8.1.2.2
11、 体缘体缘具缘刺，尖锥形。气门洼不显，气门刺与缘刺近似，略小，相互靠近。8. 1. 2. 3 体背面旺板三角形2块，合成正方形，其后角外缘有长、短毛各2根。旺周体壁幼时不硬化，老熟期硬化，GB/T 28107-2011 元网纹。旺环宽，有内、外列孔及环毛8根。腺体在背面盘状孔丰富，有少量小瓶状腺。背剌散布。8.2 雄成虫(参见图D.2和图F.6)8.2. 1 虫体体长2.35mm-3. 50 mm，翅展4.80mm-5. 20 mmo头部黑褐色，前胸、腹部、触角和足为黄色。8.2.2 头部触角丝状，10节，长约1.50 mmo单眼5对，背、腹眼各l对，侧眼在头之两侧各3个，呈弧形排列，环绕于头
12、部触角周缘。8.2.3 胸部中胸气门和后胸气门各1对，周围均无腺体分布。前翅1对，半透明。后翅退化为平衡棒，呈叶片状。胸足3对，腔节末端有1长距。爪稍弯曲，末端有小齿。爪冠毛和酣冠毛各1对，即冠毛粗，爪冠毛较细，末端均膨大呈球形8.2.4 腹部腹部8节，具刚毛，在腹面和背面稀疏分布，腹部末端数量最多，约8根，簇生。第8节有一尾突。阳茎黯长度约为体长之半，基部上方两侧各有一个尾槽，尾槽内壁具多格腺和租长刚毛2根，尾槽内各生出一根白色细长的蜡丝，长度约为体长的3倍。8.3卵长圆形，初产时为白色，渐变粉红色。卵在体下常被白色细蜡丝搅裹成块，不易散开。8.4 1龄若虫8.4. 1 田间形态特征(参见圈
13、D.3)固定后若虫扁平，草履形，体被白色透明蜡质，成平滑的薄蜡壳，其背中部有一条隆线。透过蜡壳可见体色淡黄，眼色淡红。8.4.2 显微形态特征(参见图F.1) 8.4.2. 1 虫体椭圆形，体长O.60 mm-O. 72 mm，宽0.30皿m-O.50 mmo 8.4.2.2 触角6节;足3对，发达，具附冠毛和爪冠毛各1对，均细长，末端明显膨大。8.4.2.3 体缘刺细尖，稀疏分布，腹部之缘刺略长于头部的，最末1根最长，约70m。8.4.2.4 胸气门2对，直筒状，气门刺各3根，锥状等大;气门路上有五格腺4个-5个，排成1列。8.4.2.5 胚门位于虫体背面腹部末端，臀裂浅而宽，旺筒伸至臀裂之
14、间且明显外露。胚板表面具网纹。胚板端毛3根，中央l条极长，约380mo旺环毛6根，背面2根最长，约300mo8.5 2龄若虫8.5.1 田间形态特征(参见圄D.3和图D.4)8. 5. 1. 1 发育前期虫体体被白色半透明介壳，边缘有长方形白色蜡片12对，头部前端为1块，前、后胸气门处各有一条白色蜡丝覆盖于长方形蜡片之下，背中隆线加宽，背部有前后两个环状壳点(蜡块)，臀末两根白色蜡丝部分露出介壳。4 G:S/T 28107-2011 8.5. 1. 2 发育中期虫体背部有前、中、后3个环状壳点。8.5. 1. 3 越冬后，2龄雌若虫体被一层灰白色半透明呈龟裂状的蜡层，蜡层外附少量白色蜡丝，体缘
15、的缘刺被蜡层覆盖呈白色。8.5.2 显微形态特征(参见圄F.2)8.5.2. 1 虫体椭圆形，黄褐至栗褐色，体长1.00 mm1. 30 mm，宽O.50 mmO. 70 mm。8.5.2.2 头部具单眼1对。触角为7节。8.5.2.3 足发达，腿节长度大于气门盘直径。8.5.2.4 体缘刺密集l列，锥状，粗大，亚缘剌l列，细小，刚毛状。胸气门扩大呈喇叭状，各气门路上五格腺到多格腺已多至10个15个，呈不规则排列，气门刺与缘刺巳元大区别。8.5.2.5 虫体背面散布锥状小刺。虹筒加长，疏松网状，虹板的长端毛消失，胚板端毛5根，旺环毛6根。管状腺体在虫体腹面成宽亚缘带，在腹部中央零散分布。8.6
16、 3龄若虫(参见图F.3)虫体背、腹两面管状腺数量增多，在亚缘区成带状排列，在背中和缘区散布。8. 7蜗8.7.1 田间形态特征(参见图D.4)越冬后雄踊被一层茧壳，长椭圆形，不太突，毛现璃状半透明，背面有圆形、直角形等蜡块，茧壳上以缝分成几小块，雄茧边缘有成列的短细蜡丝。8.7.2 显微形态特征(参见圈F.4和图F.5)8.7.2. 1 雄预蝠体近梭形，黄褐色。体长1.20 mm1. 80 mm，宽O.40 mmO. 60 mm，各器官和附肢发育不完全，具有触角、足、翅芽的雏形。8.7.2.2 雄蝠体色深褐，长椭圆形，离蝠。体长1.70 mm2. 00 mm，宽0.50mm-O. 70 mm
17、。元眼。触角10节。翅芽半透明，宽度和厚度均增加，已达中足。胸部背板骨化明显。腹部分节明显，可见8节，密布有微刺毛，腹部体缘具三角锥状刚毛，腹部末端数量最多。交配器钝圆锥形，表面光滑，基部有4根6根微型刚毛，在末端刚毛密集分布，约18根20根。9 结果判定以雌成虫鉴定特征为主要依据，其余虫态的形态特征可作参考，符合8.1描述的可鉴定为枣大球蛤(E. gigantea)。10 标本和样晶保存将枣大球昕及重要的为害状标本妥善保存，各龄若虫、蝠和成虫均可用乙醇甘油保存液保存，成虫也可制成玻片标本保存，同时记录害虫名称、来源、截获时间、地点、人员等相关信息。对检出该阶虫的样品，要进行元害化处理。5 G
18、B/T 28107-2011 A.1 寄主附录A(规范性附录)枣大球蛤其他信息国槐(50horajaonical L. )、刺槐(Robiniaseudo-acaciaL. )、枣(Zizyhussativa Gaertn. )、酸枣(Zizyhuss切osusHu)、朴树(Celtissinensis Pers.)、椰榆(UhnusrvifoliaJ acq. )、法桐(Platanus orientalis L. )、奕树(Koelreuteriaaniculata Laxm)、臭椿(Ailanthusaltissima Swing)、香椿(Cedrelasinensis A. Juss)
19、、楝(Meliaazedarach L. )、胡桃(Juglans regia L. )、苹果(Malusumila Mill. )、桃(Prunusersica Stokes)、樱花(Prunusserrulata Lindl.)、板栗(Castnea mollissima Blume)、文冠果(Xanthocerassorb价liaBunge)、蒲公英(Taraxacumsp.)、苦菊(Chrysanthemum sp. )、甘草(GlycyrrizaUralensis Fisch. G. Glabra L. )等。A.2 分布枣大球!llt原记录于日本，现巳扩散到俄罗斯(远东地区)和中国
20、的局部地区。A.3 传播途径枣大球蛤固着在植株上为害，易随寄主的调运远距离传播和扩散。6 GB/T 28107-2011 附录B(资料性附录)玻片标本的制作B.1 将乙醇-甘油保存液中的虫体移入装有10%氢氧化铀(或10%氢氧化饵)溶液的离心管中，如是活体标本应预先在70%乙醇溶液中固定1h2 h后，再置于前述液体中。B.2 将放入标本的离心管置于40.C50.C的水浴锅中加热，定时观察，当虫体涨满内容物近透明时移至凹玻片上，在体视显微镜下解剖，一手执解剖刀，一手执解剖针，先用解剖刀的刀尖刺入虫体的背腹交接线上，再用解剖针在刀口皮层上刮动，逐渐向前剖开皮层，成背腹两面，并在虫体的一侧稍留一段相
21、连的部分，再用沸水将内容物冲洗掉。B.3 将洗干净的虫体移入表面皿中，滴入酸乙晖中和5min，用臆纸吸掉酸乙醇。B.4 再加入70%乙醇浸泡5min，吸掉乙醇，滴人酸性品红溶液，染色12h,._. 16 h B.5 用70%乙醇洗掉多余染色剂，再依次经过95%乙醇、元水乙醇，脱水各5min. B.6 用滤纸吸掉乙醇，滴入石炭酸-二甲苯溶液，3min后吸掉。B.7 滴入二甲苯3min后，将虫体移入载玻片上的中性树肢中整姿后盖仁盖玻片。B.8 待玻片标本晾干后，即可用生物显微镜来观察各虫态的形态特征，进行鉴定。7 GB/T 28107-2011 附录C(资料性附录)蛤科、大球蛤属雌成虫的鉴定特征及
22、枣大球蛤与近似种的区别C.1 蛤科雌成虫的鉴定特征体周围有一圈缘毛或缘剌;胸气门开口至体缘之间由五格腺组成了气门路;体末有一尾裂，其底端背面有两块相对的三角形旺板。C.2 大球蛤属雌成虫的鉴定特征触角6节8节，第3节最长。足分节正常，腿节长度约和气门盘直径等长;腔、跚关节不硬化，爪、甜冠毛各2根，爪下元齿。体背有筛状孔、杯状腺;腹面有五格腺、多格腺、杯状腺和暗框孔。气门洼不显，气门刺明显或否，明显时2剌3刺，不明显时和缘刺无区别。C.3 枣大球蛤与近似种的区别皱大球蛤E.kuwanai Kanda是枣大球蛤E.gigantea的近似种，常与枣大球蛤混合发生，生活习性相近，主要区别在于皱大球蛤:
23、8 一一雌成虫虫体鼓起呈半球形，长5.0 mm7. 0 mm，高4.0 mm6. 0 mm，略小于枣大球阶。产卵前虫体黄褐色，光亮，具虎皮状斑纹，一条蓝黑色背中线宽而明显，从头端直延伸至胚门边。体背侧具蓝黑色斑纹，体侧下缘有锯齿状色带，又似西瓜皮花斑;一一雌成虫虫体干尸，颜色暗淡，鲜艳花纹消失，体壁皱缩，木质化，用手捏捻不易碎;显微特征虹环毛6根。附录D(资料性附录)枣大球蛤田间形态特征图图D.1雌成虫GB/T 28107-2011 图D.2雄成虫机，鸣f fJ J 6气远图D.3叶片上1、2龄若虫图D.4越后枝条上的虫体(雌雄分化)9 G/T 28107-2011 触角I 1 , , 4 附
24、录E(资料性附录)枣大球蛤雌成虫显微形态特征图, 4 q iHY ; 矗I y , ,f!s .- , I . r illtl. 盘状肝r孔虹板图E.1枣大球蜻雌成虫显微形态特征图10 足GB/T 28107一2011附录F(资料性附录)枣大球蛤各虫态显微形态特征图 图F.1 1龄若虫图F.22龄若虫图F.33龄雌若虫图F.4雄预蝠图F.5雄蝠FEN-hOFNH目。GB/T 28107-2011 雄成虫飞、患图F.6m) 侵权必究nud F气nhu aaA Aq-EA-no phu nu -hd phd噜BA- 号一价书一定* 版权专有18.00元GB/T 28107-2011 打印日期:2012年5月22H F002
