1、ICS 71. 100.70 Y 42 CiB 中华人民共和国国家标准GB/T 31858-2015 眼部护肤化妆品中禁用水溶性着色剂酸性黄1和酸性橙7的测定高效液相色谱法Simultaneous determination of acid yellow 1 and acid orange 7 prohibited using in eye cosmetics-High performance Iiquid chromatograpby 2015-07-03发布2016-02-01实施气，OJrr叫川刑-4Fmff-4-Fa-严号。军陆目中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局串士中国国家标准化
2、管理委员会a叩前本标准按照GB/T1.1 -2009给出的规则起草。本标准由中国轻工业联合会提出。.a. 曰本标准由全国香料香精化妆晶标准化技术委员会(SAC/TC257)归口。GB/T 31858-2015 本标准起草单位z杭州市质量技术监督检测院、上海市日用化学工业研究所、中国计量学院、德清县质量技术监督检测中心。本标准主要起草人z李琦、屠海云、俞晓平、沈群、芮叔、忧敏、肖海龙、杜晓婷、夏钟兴、赵凯、潘向荣、王啸、周敏、孙岚、陈美春、阮小娇、施华标、黄建挥。I GB/T 31858-2015 I 中口同本标准中的被测物质是我国化妆品卫生规范规定的眼部护肤化枚品中禁用物质，不得作为眼部化妆品
3、生产原料即组分添加到眼部护肤化妆品中。如果技术上无法避免禁用物质带人眼部化妆品时，则化妆品成品应符合化妆品卫生规范对眼部化妆品的一般要求，即在正常及合理的、可预见的使用条件下，不得对人体健康产生危害。目前我国尚未规定这些物质的限量值，本标准的制定，仅对眼部护肤化妆品中测定这些物质提供检测方法。E 1 范围眼部护肤化妆品中禁用水溶性着色剂酸性黄1和酸性橙7的测定高效液相色谱法GB/T 31858-2015 本标准规定了用液相色谱法测定膏霜、乳液、被体类眼部护肤化妆品中禁用的水榕性着色剂磁性黄1、酸性橙7的测定方法。本标准适用于眼部护肤化妆品中禁用水溶性着色剂酸性黄1和酸性橙7的测定，不适用于测定
4、含有酸性黄1和酸性橙7的色淀的眼部护肤化妆品。本标准方法检出限为1.5mg/闻，定量限为5.0mg/kg. 2 规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注目期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改单适用于本文件。GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法3 方法提要膏霜、乳液类眼部化妆品用三氯甲烧分散后，用水为榕剂进行提取s液体类眼部化妆品直接用水定容，然后用配有二极管阵列检测器(DAD)的液相色谱仪检测，外标法定量。4 试剂和材料除非另有说明，所用试剂均为分析纯，水为GB/T6682中规定的一级水。4.1 三氯甲烧。4
5、.2 乙酸镜。4.3 甲蹲z色谱纯。4.4 着色剂标准品z酸性黄1和磁性橙7，纯度不小于99.0%，分子式、相对分子质量、着色剂索引号、CAS号、结构式参见附录A.4.5标准储备溶液z准确称取1g(精确至0.0001 g)着色剂标准品(4.4)至1000mL容量瓶中，用水溶解并定容，配制成1000 mg/L的单个标准储备液，保存在棕色瓶中，4C保存。4.6 标准工作溶液z分别移取适量的标准储备溶液，配制成0.5mg/L,2.0 mg/L, 10.0 mg/L, 50.0 mg/L. 100.0 mg/L浓度的混合标准工作榕液，现配现用。4.7 乙酸镀缓冲榕液z称取1.54g乙酸镀(4.2)至1
6、000mL容量瓶中，加水溶解并定容，所用溶剂和溶液分析前过0.45m滤膜并用超声脱气。5 仪器和设备5.1 高效液相色谱仪，配二极管阵列检测器或紫外检测器，1 GB/T 31858-2015 5.2 高速离心机。5.3 起声波清洗仪。5.4 璇涡混合仪。5.5 分析天平z感量分别为0.0001 g和0.001g. 5.6 微孔捷膜:0.45m。6 分析步骤6.1 样晶处理6.1.1 膏霜、乳液类眼部化妆品z称取1.0g(精确到0.001g)样品于50mL离心管中，加入5mL三氯甲烧(4.1).涡糠振荡至样品分散均匀，准确加入10.00mL水，游涡振荡5min.6 500 r/min离心10 m
7、in.上层清液经0.45m微孔捷膜(5.6)过墟，滤液以待进祥。6.1.2 液体类眼部化妆品z准确称取1.0g(精确到0.001g)样品于10mL容量瓶中，用水定容至刻度，混匀后经0.45m微孔捷膜(5.6)过滤，滤液以待进样。6.2 测定6.2.1 溜相色谱分桥参考条件液相色谱分析参考条件如下:a) 色谱柱:C18柱(250mm X4 6 mm.i.d.5m)或其他效果等同的色谱柱zb) 柱温:30C; c) 进样量:10L;d) 流动相z甲酶，乙酸镀缓冲溶液(4.7); e) 流速，1.0mL/min; f) 检测波长:240nm; g) 梯度洗脏条件见表1。表1梯庭洗脱条件步骤时间甲蹲m
8、m % 。0.00 30 1 2.00 30 2 9.00 95 3 12.50 95 4 13.00 30 5 15.00 30 6.2.2 栋准工作曲线绘制乙酸镀缓冲溶液% 70 70 5 5 70 70 用配制的标准工作榕液(4.6)绘制以标准工作溶液中被测组分峰面积为纵坐标，标准工作榕液浓度为横坐标的标准工作曲线。水溶性着色剂酸性黄1和酸性橙7混合标准物质色谱图和标准样品光谱图参见附录B。GB/T 31858-2015 6.2.3 试梓测定将试样(6.1)按色谱条件(6.2.1)进行测定，外标法定量，样品溶液中的被测物的响应值应在掠准曲线线性范围内，超出线性范围则应稀释后再进样测定。6
9、.2.4 定性确证液相色谱仪对样品进行定性测定，进行样品测定时，如果检出酸性黄l和酸性橙7的色谱峰的保留时间与标准品相一致，并且在扣除背景后的样品色谱图中，两种物质的可见吸收图谱与标准品的可见吸收图谱一致，则可初步认定样品中存在被测物。必要时，阳性样品参考附录C方法进行确证。6.3 空白试瞌除不称取样品外，均按上述测定条件和步骤进行。6.4 平行试验按以上步骤，对同一试样进行平行试验测定。7 结果计算试样中着色剂的含量按式(1)计算z式中zw=e. xvx 1000 -m X 1000 w 一样品中着色剂的质量分数，单位为毫克每千克(mg/kg)I p 根据标准曲线计算所得样被中着色剂的质量浓
10、度，单位为毫克每升(mg/L); V 定容体积，单位为毫升(mL);m 称样量，单位为克(g)。8 回收率和精密度. ( 1 ) 在添加浓度25mg/kg.1 000 mg/kg拖围内，回收率在83.1%.98.8%之间，相对标准偏差小于8.4%。9 允许羞在重复条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的10%。3 GB/T 31858-2015 附录A资料性附录酸性黄1和踵性檀7的分子式、相对分子质量、着色荆索引号、CAS号、结构式酸性黄1和酸性橙7的分子式、相对分子质量、着色剂索引号、CAS号、结构式见表A.1.表A.1酷性黄1和睡性橙7的分子式、相对分子质量、着色剂索引号
11、、CAS号、结构式序号着色剂名称分子式相对分子质量着色剂索引号CAS号结构式j ONa F |飞N2 1 磁性黄1ClO H Nz Naz 0 8 S 358.19 CI 10316 846-10-8 、h4 N2 2 截性橙7! C16HllNzNaO.,S 350.32 CI 15510 633-96 5 JbS 4 . mAU 300 200 150 100 50 。2 说明21一一酸性黄1(5.35 min); 2一磁性橙7(10.89mi的。4 GB/T 31858-2015 附录B资料性附录标准物质擅相色谱圈和光谱固2 6 8 10 12 14 mm 圄B.1水溶性着色剂酸性黄1和
12、酸性檀7的混合标准样晶色谱固拿DAD1.5.044(591 rnAU ,) Ref=4. 950 & 5.244 mAU 500 400 300 2 100 。200 3400 500 600 700 800 nm a) 磁性黄1圄B.2水溶性着色荆酸性黄1和酷性幢7的标准样晶光谱圄5 GB/T 31858-2015 6 mAU 1000 800 600 400 200 。*DADl. 10.630(1038 mAU,-) Ref=10. 470 & 11. 124 200 300 400 500 600 700 800 nm b) 酸性橙7注g通过比较不同时间点的光谱图鉴定色谱峰的纯度，通过
13、对每一针样品中的着色剂峰选取三个位置(峰前沿、峰顶、峰后沿的光谱图，进行比较，如果三个位置的光谱图峰形完全一致，则证明色谱峰为单一纯度，如果三个位置的光谱图峰形不一致，则说明含有杂质峰.圄B.2(续)GB/T 31858-2015 附录C(资料性附录眼部护肤化妆晶申禁用的水溶性着色剂醺性黄1和酸性橙7的渡相色谱属谱确认方法C.1 试剂和材料除非另有说明，所用试剂均为分析纯，水为GB/T6682中规定的一级水。C.l.1 乙酿镀:0.02 mol!L. C.1.2 甲酶z色谱纯.C.2 仪器和设备液相色谱质谱联用仪。C.3 测定C.3.1 溃榈色谱分析参考条件液相色谱测定参考条件如下:a) 色谱
14、柱:C18柱000mm X 4.6 mm，粒径3.2m)或其他效果等同的色谱柱，b)柱温:30C; c) 进样量:5L;d) 流动相:70%甲膊，30%乙搜镀缓冲溶液ze)流速10.50mL/min. 在上述色谱条件下;2种着色剂的标准样晶色谱图参见图C.1。C.3.2 质谱分析参考条件质谱测定参考条件如下za) 电离方式z电喷雾电离，正离子模式Fb) 喷孬电压:3.0kV; c) 雾化温度:300C; d) 毛细管温度1450C; 的黯气压力:45ArbC1 3.5 L/min) I () 辅助气压力，15Arb03.5 L/min) I g) 碰撞气、销气、辅助气z液氮(99.999%);
15、h) 扫描模式z多反应监测(MRM)模式，2种着色剂的质谱参数参见表C.1，2种着色剂的质谱图参见图C.2.7 GB/T 31858-2015 表C.1质谱参数序号着色剂名称保留时间锥孔电压监测离子对mtn v 酸性黄11.70 269.0 105.1 ; 100 24 1.077.1 2 磁性橙72.40 329.2 128.1 ; 100 156.1 101.1 圄C.1水溶性着色荆酸性黄1和醺性槌7的混合标准梓晶色谱圄8 川萨+阳且4(1.786 111in) (1田10001-坷的时d酸性黄12.8 2. 7 2.6 2. 5 2毡2.3 2.2 2.1 2 1. 9 1.8 1. 7
16、 1.6 1. 5 1.4 1. 3 1. 2 1.1 0.9 0.8 0.7 0.6 0.5 0.4 0.3 0.2 0.11 I 101. 099 61 。回国回961田106110 ti5 120 125 1切Counts vs.Mass-to-Charge (m/z) a) 磁性黄1固C.2水溶性着色荆酸性黄1和酷性橙7的质谱圄140 146 碰撞能量eV 15 15 30 30 GB/T 31858-2015 橙性醺时也叫回国阴阳+ 以222且且LLLLLLLLL队队队aoaaoax 101. 099 61 128.09961 76剧团团团1田1由UO116 1剖1甜1曲:由1401
17、崎150165 Counts vS.M踊s-to-Charge(m/z) b) 酸性橙7圄C.2(续)9 气 . 的FON|的户何H筒。华人民共和国家标准眼部妒肤化妆晶中禁用水溶性着色剂酷性黄1和酸性橙7的测定高效溜相色谱法GB/T 31858 - 2015 国中* 中国标准出版社出版发行北京市朝阳区和平里西街甲Z号(100029)北京市西拔区三里河北街16号(10004日网址总编室，(010)68533533发行中心:(010)51780238读者服务部沃010)68523946中国标准出版社秦皇岛印刷厂印刷各地新华书店经销4峰开本880X1230 1/16 印张1字数20千字2015年8月第版2015年8月第一次印刷* H号:155066. 1-52094定价18.00元如有印装差错由本社发行中心调换版权专有侵权必究举报电话，(010)68510107GB/T 31858-2015
