1、GB 5009.5-85 中华人民共和国国家标准 食品中蛋白质的测定方法 Method for determination of protein in foods GB 5009.585 本标准适用于各类食品中蛋白质的测定。 1 原理 蛋白质是含氮的有机化合物。食品与硫酸和催化剂一同加热消化，使蛋白质分解，分解的氨与硫酸结合生成硫酸铵。然后碱化蒸馏使氨游离，用硼酸吸收后再以硫酸或盐酸标准溶液滴定，根据酸的消耗量乘以换算系数，即为蛋白质含量。 2 试剂 所有试剂均用不含氨的蒸馏水配制。 2.1 硫酸铜。 2.2 硫酸钾。 2.3 硫酸。 2.4 2%硼酸溶液。 2.5 混合指示液：1份0.1甲基
2、红乙醇溶液与 5份0.1溴甲酚绿乙醇溶液临用时混合。也可用 2份0.1甲基红乙醇溶液与1份0.1次甲基蓝乙醇溶液临用时混合。 2.6 40氢氧化钠溶液。 2.7 0.05N硫酸标准溶液或0.05N盐酸标准溶液。 3 仪器 定氮蒸馏装置：如图所示。 1 电炉；2水蒸气发生器（2L平底烧瓶）；3螺旋夹；4小玻杯及棒状玻塞；5反应室；6反应室外层；7橡皮管及螺旋夹；8冷凝管； 9蒸饬液接收瓶 4 操作方法 4.1 样品处理：精密称取O.22.0g固体样品或25 g半固体样品或吸取1020ml液体样品（约相当氮 3040mg），移入干燥的 100ml或 500ml定氮瓶中，加入 0.2g硫酸铜，3 g
3、硫酸钾及 20ml硫酸，稍摇匀后于瓶口放一小漏斗，将瓶以45角斜支于有小孔的石棉网上。小心加热，待内容物全部炭化，泡沫完全停止后，加强火力，并保持瓶内液体微沸，至液体呈蓝绿色澄清透明后，再继续加热0.5h。取下放冷，小心加20ml水。放冷后，移入100ml容量瓶中，并用少量水洗定氮瓶，洗液并入容量瓶中，再加水至刻度，混匀备用。取与处理样品相同量的硫酸铜、硫酸钾、硫酸按同一方法做试剂空白试验。 4.2 按图装好定氨装置，于水蒸气发生瓶内装水至约23处，加甲基红指示液数滴及数毫升硫酸，以保持水呈酸性，加入数粒玻璃珠以防暴沸，用调压器控制，加热煮沸水蒸气发生瓶内的水。 中华人民共和国卫生部1985-
4、05-16发布 1985-12-01实施 中华人民共和国卫生部发布实施GB 5009.5-85 4.3 向接收瓶内加入 10ml 2硼酸溶液及混合指示液1滴，并使冷凝管的下端插入液面下，吸取10.0ml样品消化稀释液由小玻杯流入反应室，并以10ml水洗涤小烧杯使流入反应室内，塞紧小玻杯的棒状玻塞。将 10m140氢氧化钠溶液倒入小玻杯，提起玻塞使其缓缓流入反应室，立即将玻塞盖紧，并加水于小玻杯以防漏气。夹紧螺旋夹，开始蒸馏。蒸气通入反应室使氨通过冷凝管而进入接收瓶内，蒸馏5 min。移动接受瓶，使冷凝管下端离开液面，再蒸馏1 min。然后用少量水冲洗冷凝管下端外部。取下接收瓶，以 0.05N硫
5、酸或0.05N盐酸标准溶液滴定至灰色或蓝紫色为终点。 同时吸取 10.0ml试剂空白消化液按 4.3操作。 4.4 计算 10010010014.0)(21= FmNVVX 式中：X样品中蛋白质的含量，； V1样品消耗硫酸或盐酸标准液的体积，ml； V2试剂空白消耗硫酸或盐酸标准液的体积，ml； N硫酸或盐酸标准溶液的当量浓度； 0.0141N硫酸或盐酸标准溶液1 ml相当于氮克数； m样品的质量（体积）， g（ml）； F氮换算为蛋白质的系数。蛋白质中的氮含量一般为 1517.6%，按 16计算乘以 6.25即为蛋白质，乳制品为6.38，面粉为5.70，玉米、高粱为6.24，花生为5.46，米为5.95，大豆及其制品为5.71，肉与肉制品为6.25，大麦、小米、燕麦、裸麦为5.83，芝麻、向日葵为 5.30。 附加说明： 本标准由全国卫生标准技术委员会食品卫生标准分委员会提出，由卫生部食品卫生监督检验所归口。 本标准由卫生部食品卫生监督检验所负责起草。 中华人民共和国卫生部1985-05-16发布 1985-12-01实施
