1、GB!T 8314- 2002 前言本标准是对GB!T8314 1987(茶游离氨基酸总量测定的修订。本标准修订主要是按照GB!T1. 1一1993(标准化工作导员。第1单元3标准的起草与表述规则第1部分:标准编写的基本规定的要求，对GB!T8314-1987在格式和文字上作了一些修改，具体技术内容没有变动。卒标准自实施之日起，同时代替GB!T8314-19870 本标准由中华全国供销合作总社提出。本标准由中华全国供销合作总社杭州茶叶研究院归口。本标准起草单位:中华全国供销合作总社杭州茶叶研究院。本标准主要起草人周E龙、孙安华、钟萝。本标准由中华全国供销合作总社杭州茶叶研究院负责解释。l :i
2、 2 中华人民共和国国家标准GB/T 8314-2002 茶游离氨基酸总量测定Tea Determination of free amino acids content 代替GB!T8314 1987 1 范围本标准规定了对茶叶中游离氨基酸总量测定的原理、仪器和用具、试剂和溶液、操作方法及结果计算方法。本标准适用于茶叶中游离氨基酸总量的测定。2 引用标准下列标准所包含的条文，通过在本标准中引用而构成为本标准的条文。本标准出版时，所示版本均为有效。所有标准都会被修订，使用本标准的各方应探讨使用下列标准最新版本的可能性。3 GB/T 8302-2002 茶GB/T 8303-2002 茶GB/T
3、8312-2002 茶GB/T 8313-2002 茶定义本标准采用下列定义。取样磨碎试样的制备及其干物质含量测定咖啡碱测定茶多酣测定游离氨基酸free amino acids 茶时水浸出物中呈游离状态存在的具有任氨基的有机酸。4 原理氨基酸在pH8.0的条件下与苟三翻共热，形成紫色络合物，用分光光度法在特定的波长下测定其含量。5 仪器和用具实验室常规仪器及下列各项.5. 1 分析天平:感量O.001 g , 5.2 分光光度仪。6 试剂和溶液所用试剂应为分析纯(AR)，水为蒸馆水。6. 1 pH8. 0磷酸盐缓冲液:按GB/T8313 .2002中6.2的规定，配制1/15mol/L磷酸氢二
4、纳(6.2.1)和1/15mol/L磷酸二氢饵(6.2.2)溶液。然后取1/15mol/L的磷酸氢二锅溶液95mL和1/15mol/L 磷酸二氧仰济液5mL.混匀。中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局2002.06-17批准2002.12.01实施l :i 3 GB/T 8314-2002 6.2 2%南三酬溶液:称取水合苟芒酣(纯度不低于99%)2g，加50mL水和80mg氯化亚锡(SnCI， 2H，O)搅拌均匀。分次JJO少量水溶解，放在暗处，静置一昼夜，过滤后加水定容至100mLo 6. 3 茶氨酸或谷氨酸标准液称取100mg茶氨酸或谷氨酸(纯度不低于99%)溶于100mL水中，作为母
5、液。准确吸取5mL母液，加水定容至50mL作为工作液(1mL含茶氨酸或谷氨酸O.1 mg) 0 7 操作方法?1 取样按GB/T8302的规定。7.2 试样制备接GB/l、8303的规定。7.3 测定步骤7. 3. 1 试液的制备战GB/T8312-2002中1，1的规定。7.3.2 测定准确吸取试液(7.3.1)lmL，注入25mL的容量瓶中，加0.5mL pH8. 0磷酸盐缓冲液(6.1)和。.5mL 2%甜三酣溶液(6.2) ，在沸水浴中加热15min。待冷却后加水定容至25mLo放置10min后，用5mm比色杯，在570nm处，以试剂空白溶液作参比，测定吸光度(A)。7.3.3 氨基酸
6、标准曲线的制作分别吸取O.0、1. 0、1.5.2.0、2.5、3.0mL氨基酸工作液(6.3)于一组25mL容量瓶中，各加水4 mL、pH8.0磷酸盐缓冲液(6.1)0.5mL和2%苟三liIiJ溶液(6.2)0.5mL，在沸水浴中加热15min，冷却后ho水定容至25mL，按7.3.2的操作测定吸光度(A)。将测得的吸光度与对应的茶氨酸或谷氨酸浓度绘制标准曲线。8 结果计算8.1 t算方法茶叶中游离氨基酸含量以干态质量分数表示，按式(1)计算游离氨基酸总量(以茶氨酸或谷氨酸计)(%) 式中J.，试液总量，mL;L? 测定用试液量，mL;M 试样量，日，C ,/ Ll 1 000 L , Mo X m X 100 C 根据7.3. 2测定的吸光度从标准曲线上查得的荼氨酸或谷氨酸的毫克数;m 试样卡物质含量，%。( 1 ) 如果符合重复性(8.2)的要求，则取两次测定的算术平均值作为结果，结果保留小数点后一位。8.2 重复性同样品的两次测定值之差，每100日试样不得超过O.1 g 0 1 :,!
