1、 中华人民共和国国家标准 肉与肉制品 钙含量测定 GB/T 9695.13-88 Meat and meat products-Method for determination of calcium 1 主题内容与适用范围 本标准规定了肉和肉制品中钙含量的测定方法。 本标准适用于肉和肉制品中钙含量的测定。 2 引用标准 GB 9695.19 肉与肉制品 取样方法 3 原理 试样经灰化后制成稀盐酸溶液, 在弱酸性溶液中, 钙离子与草酸根离子生成草酸钙沉 淀。过滤后, 将沉淀溶于硫酸溶液中, 然后用高锰酸钾标准溶液滴定草酸根离子, 求出钙 的含量。 反应式为 : CaCl2 (NH4)2C2O4
2、CaC2O42NH4Cl CaC2O4 H2SO4 CaSO4 H2C2O4 5H2C2O4 2KMnO4 3H2SO4 2MnSO4 K2SO4 10CO2 8H2O 4 试剂 所用试剂均为分析纯, 所用水为蒸馏水或相当纯度的水。 4.1 盐酸 (GB 622):1:1 溶液。 4.2 硫酸 (GB 625):1:5 溶液。 4.3 硫酸(GB 625):1:24 溶液。 4.4 甲基红(HG 3-958):0.1乙醇溶液。 4.5 尿素(GB 696) 。 4.6 草酸铵(HG 3-976) :3 溶液。 4.7 氢氧化胺(GB 631): 1:49 溶液。 4.8 高锰酸钾(GB 643
3、): 0.02N 标准溶液。 4.8.1 高锰酸钾标准溶液的配制: 称取高锰酸钾 0.63g 置于容量为 2L 的三角烧瓶中, 加水 1L 溶解, 缓绥加热煮沸 1 2h, 于阴暗处放置过夜, 用 G4 玻璃过滤器过滤, 滤液贮于清洁、 干燥的棕色试剂瓶中, 混匀。 4.8.2 高锰酸钾标准溶液的标定 4.8.2.1 0.02000N 草酸钠标准溶液的配制: 称取预先在 105 110干燥 2h 的优级纯草酸 钠 (HG 3-976)0.670 0g, 溶解后定容到 500mL 容量瓶中, 混匀。 4.8.2.2 标定: 移取 20.00mL 草酸钠标准溶液置于 100mL 锥形瓶中, 加 1
4、:5 硫酸溶液 5mL,加 热至 60 80 ,用待标定的高锰酸钾标准溶液滴定至溶液呈微红色保持 30sec 不褪色为终 点。测定至终点时溶液温度不应低于 60。 高锰酸钾标准溶液的当量浓度(N) 按下式计算: 20 0.020 00 N = .(1) V 式中:N高锰酸钾标准溶液的当量浓度； Y滴定时高锰酸钾标准溶液的用量,mL。 5 仪器和设备 5.1 实验室常规设备。 5.2 绞肉机: 不锈钢质, 孔径不超过 4mm。 5.3 坩埚 :石英或铂质。 5.4 玻璃过滤器:G4 。 6 试样 6.1 按 GB 9695.19 取样。 6.2 取有代表性的试样 200g,用绞肉机至少绞两次,
5、混匀。绞好的试样装入带盖的试样 盒中备用。 6.3 绞好的试样要尽快分析, 若不立即分析, 要密封冷藏贮存, 防止变质和成分发生变 化。贮存的试样在启用时必须重新均质。 7 分析步骤 7.1 试样前处理: 称取试样 20g(精确至 0.001g)放入坩埚中, 置于 130 10的电烘箱中 烘 2 4h, 使试样脱水。将坩埚在可调电炉上缓慢加热使试样炭化, 开始时用小火细心加 热 ,以防止试样溅出, 待大烟冒过后提高温度, 使试样完全炭化, 直至不冒烟为止。炭化好 的试样放入高温炉中, 于 550 20下灰化 4h。灰化好的试样应是灰白色, 若灰分中有黑 色颗粒时, 应取出坩埚放至室温后加水或稀
6、盐酸湿润, 在电烘箱中烘干后再次于 550 20 高温炉中灰化, 直至灰分呈灰白色。 7.2 测定 :将灰分用 1:1 盐酸 2.5mL 溶解, 转移到 100mL 烧杯中, 稀至 50mL,此时试样溶液 的盐酸浓度为 1。在试样溶液中加甲基红指示剂 3 滴、草酸铵溶液 10mL,再加尿素 4.0g, 使之溶解。盖上表面皿, 在电热板上缓慢加热, 持续微沸状态。当甲基红的红色逐渐变为 澄色时, 草酸钙的结晶即沉淀出来, 当溶液变成黄橙色时停止加热, 放冷, 室温下放置 4h 以上或过夜。用慢速滤纸过滤, 将沉淀转移到滤纸上, 用稀氨水洗液洗表面皿和烧杯 4 次。 而后继续用稀氨水洗液洗涤沉淀物
7、 4 5 次。将滤纸连同沉淀置于原烧杯中, 用玻璃棒将滤 纸摊开并贴附于烧杯壁上, 用 1:24 热硫酸溶液 50mL 将沉淀冲下溶解。待沉淀完全溶解后, 在水浴中加热至 60 80 ,用高锰酸钾标准溶液乘热滴定至溶液呈微红色, 将滤纸全部浸 入溶液中, 搅拌, 继续滴定至溶液呈微红色 30s 不褪色为终点, 滴定至终点时溶液温度不 应低于 60。 同一试样进行两次测定, 并做空白试验。 8 分析结果的计算 计算公式: NV 0.020 04 10*-3 X (mg/kg) = .(2) m 10*-3 式中:X 钙的含量,mg/kg; N高锰酸钾标准溶液的当量浓度; V滴定时高锰酸钾标准溶液
8、的用量, mL; m试样的质量,g; 0.020 040钙的毫克当量。 当分析结果符合允许差的要求时, 则取两次测定的算术平均值作为结果, 精确到 0.1mg/kg。 9 允许差 由同一分析者同时或相继进行的两次测定的结果之差, 不得超过平均值的 10。 附 录 A 原子吸收法 (补充件) Al 原理 试样经灰化后制成 1的盐酸溶液, 以锶或镧溶液消除阴离子效应, 原子化后, 在 422.7nm 处测定, 其吸收量与钙浓度成正比, 与标准系列比较测定钙的含量。 A2 试剂 所用水为重蒸馏水。 A2.1 硝酸锶(GB 669):10 溶液。 A2.2 碳酸钙(GB 1898) 。 A2.2.1
9、钙标准贮备液: 溶解预先在 105 110干燥 2h 的基准碳酸钙 2.4970g 于少量 3N 盐 酸中, 稀释定容至 1000mL,此溶液的钙浓度为 1mg/mL。 A2.2.2 钙标准工作液: 吸取钙标准贮备液 10.00mL 稀释定容至 100mL,此溶液的钙浓度为 0.1mg/mL。 AQ 仪器和设备 A3.1 原子吸收分光光度计。 A4 分析步骤 A4.1 试样前处理: 称取试样 3 5g(精确至 0.001g)放入坩埚中, 以下按高锰酸钾间接容 量法试样前处理进行。 A4.2 试样溶液的制备: 将灰分用 1:1 盐酸 2.5mL 溶解, 转移到 50mL 容量瓶中, 定容, 摇
10、匀。吸取上述溶液 10.00mL 放入 50mL 容量瓶中, 加 1:1 盐酸 2mL、 10硝酸锶溶液 2.5mL,定 容 ,混匀, 此时试样溶液的盐酸浓度为 1。 A4.3 标准系列溶液的制备: 吸取钙标准工作液 0、 1、 2、 3、 4、 5mL,分别置于 50mL 容量 瓶中, 加 1:1 盐酸 2.5mL、 10硝酸锶溶液 2.5mL,用水稀释至刻度, 混匀。此时容量瓶中 溶液的钙浓度分别为 0、 2、 4、 6、 8、 10 g/mL,盐酸浓度为 1。 A4.4 测定 :将制备好的标准系列溶液、试样溶液、空白溶液分别喷入火焰中, 测定其吸 收值。测定条件: 灯电流 7.5mA,波
11、长 422.7nm,狭缝 1.3nm,空气流量 9.5L/min,乙炔流 量 2.5L/min,燃烧器高度 12.5mm。 (可根据仪器型号调至最佳条件。) 以钙浓度对应吸收值 绘制标准工作曲线, 根据试样溶液的吸收值从标准工作曲线上查出试样溶液的钙浓度。 同一试样进行两次测定, 并做空白试验。 A5 分析结果的计算 50 c 10*-3 x (mg/kg) = 1 m10*-3 5 式中:x 钙的含量,mg/kg; m称取试样的质量,g; c从标准工作曲线上查出的试样溶液的钙浓度, g/mL。 当符合允许差所规定的要求时, 则取两次测定的算术平均值作为结果, 精确到 0.1mg/kg。 A6 允许差 同高锰酸钾间接容量法。 附加说明: 本标准由中华人民共和国商业部食品局提出。 本标准由中国肉类食品综合研究中心归口。 本标准由中国肉类食品综合研究中心负责起草。 本标准主要起草人李气清、王绪茂、冯晓红、王学平。 中华人民共和国商业部 1988-02-25 批准 1989-03-01 实施
