1、ICS 65100B 17中华 人民共和N Y国农业行业标准NYT 1154132008农药室内生物测定试验准则 杀虫剂第1 3部分：叶碟喷雾法Guideline for laboratory bioassay of pesticidesPart 13：Leaf-disc spraying method20080516发布 20080701实施中华人民共和国农业部发布刖 昌农药室内生物测定试验准则杀虫剂为系列标准第1部分：触杀活性试验点滴法；第2部分：胃毒活性试验夹毒叶片法；第3部分：熏蒸活性试验锥形瓶法；第4部分：内吸活性试验连续浸液法；第5部分：杀卵活性试验浸渍法；第6部分：活性试验浸虫法
2、；第7部分：混配的联合作用测定；第8部分：滤纸药膜法；第9部分：喷雾法；第10部分：人工饲料混药法；第11部分：稻茎浸渍法；第12部分：叶螨玻片浸渍法；第13部分：叶碟喷雾法；第14部分：浸叶法；本部分是农药室内生物测定试验准则杀虫剂的第13部分。本部分由中华人民共和国农业部提出并归口。本部分起草单位：农业部农药检定所。本部分主要起草人：嵇莉莉、林荣华、倪珏萍、姜辉、欧晓明、陶岭梅、张弘。NYT 1154 132008农药室内生物测定试验准则 杀虫剂第13部分：叶碟喷雾法NYT 1154 1320081范围本部分规定了叶碟喷雾法测定杀螨剂杀螨活性的试验方法。本部分适用于农药登记用杀螨剂室内生物
3、测定试验。2仪器设备普通实验室常规仪器设备。21体视显微镜。2 2孔径2 crfl打孔器。2 3直径9 crn海绵块。2 4 Potter喷雾塔。25恒温培养箱或恒温养虫室。3试剂与材料方法所用试剂，凡未指明规格者，均为分析纯；水为蒸馏水。31生物试材朱砂叶螨(Tetranychus cinnabarinnum t30isduval)、柑橘全爪螨(Panonychus cirri Wcgregov)等螨类。3 2试验药剂原药(或母药)。3。3对照药剂采用已登记注册且生产上常用农药的原药(或母药)，其化学结构类型或作用方式应与试验药剂相同或相近。4试验步骤41试材准备选择室内饲养、生理状态一致的
4、雌成螨。选取生长一致的寄主植物叶片(例如蚕豆叶片、棉花叶片、柑橘叶片等)，用打孔器做成叶碟，在培养皿内放置一湿海绵块，其上放滤纸，滤纸上放叶碟，每皿2个叶碟，将室内饲养的成螨或若螨接种到叶碟上，每叶碟15头20头。42药剂配制原药用有机溶剂(丙酮、二甲基亚砜、甲醇等)配置成母液，再用005o1TritonX一100(或01的吐温一80)水溶液按照等比或等差的方法配置5个7个系列质量浓度。43 Potter赜雾塔准备将Potter喷雾塔的喷雾压力调整在l，47105 Pa的稳定状态，将洗净的喷雾头先用丙酮清洗2次，再用蒸馏水清洗2次。1NYT 1154 13 20084 4药剂处理将培养皿置于P
5、otter喷雾塔底盘进行喷雾，喷液量为1mL，药液沉降1min后取出，转移至饲养条件下饲养。每处理不少于4次重复，并设不含药剂(含所有有机溶剂和乳化剂)的处理作空白对照。45饲养与观察将处理的试虫置于温度为(25-+-1)、光周期L：D-(16：8)h条件下饲养和观察。特殊情况可以适当调整试验环境条件。46检查处理后48 h检查试虫死亡情况，分别记录总虫数和死虫数。根据试验要求和药剂特点，可以缩短或延长检查时间。5数据统计与分析5 1计算方法根据调查数据，计算各处理的校正死亡率。按公式(1)和(2)计算，计算结果均保留到小数点后两位：P一丙K100式中：P死亡率，单位为百分数()；K表示死亡虫数，单位为头；N表示处理总虫数，单位为头。 肛精X100式中：P。校正死亡率，单位为百分数()；P。处理死亡率，单位为百分数()；(1)(2)P。空白对照死亡率，单位为百分数()。若对照死亡率20，试验需重做。5 2统计分析采用几率值分析的方法对数据进行处理。可以用SAS统计分析系统、POLO等软件进行统计分析，求出毒力回归线的LC。和LC4。值及其95置信限、b值及其标准误差(sD)，评价供试药剂对生物试材的活性。6结果根据统计结果进行分析评价，写出正式试验报告。
