1、ICS 65100B 17N Y中华人民共和国农业行业标准NYT 11561卜2008农药室内生物测定试验准则 杀菌剂第1 0部分：防治灰霉病试验盆栽法GuideUne for laboratory bioassay of pesticidesPart 10：Potted plant test for fungicide control Botrytis cinerea Pers20080516发布 20080701实施中华人民共和国农业部发布前 言农药室内生物测定试验准则杀菌剂为系列标准：第1部分：抑制病原真菌孢子萌发试验凹玻片法第2部分：抑制病原真菌茵丝生长试验平皿法；第3部分：抑制黄瓜霜
2、霉菌病菌试验平皿叶片法第4部分：防治小麦白粉病试验盆栽法；第5部分：抑制水稻纹枯病菌试验蚕豆叶片法；第6部分：混配的联合作用测定；第7部分：防治黄瓜霜霉病试验盆栽法；第8部分：防治水稻稻瘟病试验盆栽法；第9部分：抑制灰霉病菌试验叶片法；第10部分：防治灰霉病试验盆栽法；第11部分：防治瓜类自粉病试验盆栽法；第12部分：防治晚疫病试验盆栽法；第13部分：抑制晚疫病菌试验叶片法；第14部分：防治瓜类炭疽病试验盆栽法；第15部分：防治麦类叶锈病试验盆栽法；第16部分：抑制细菌生长量试验浑浊度法；本部分是农药室内生物测定试验准则杀菌剂的第10部分。本部分由中华人民共和国农业部提出并归口。本部分起草单位
3、：农业部农药检定所。本部分主要起草人：徐文平、朱春雨、刘学、吴新平、张薇、袁善奎。NYT 115610 2008农药室内生物测定试验准则 杀菌剂第10部分：防治灰霉病试验盆栽法NYT 1 156 1020081范围本部分规定了盆栽法测定杀菌剂防治灰霉病的试验方法。本部分适用于农药登记用杀菌剂防治黄瓜、番茄、草莓、葡萄等作物灰霉病的室内生物活性测定试验。2仪器设备普通实验室常规仪器设备。21电子天平(感量o1rag)。22喷雾器械。2 3人工气候箱。2 4保湿箱。2 5移液管或移液器等。3试剂与材料方法所用试剂，凡未指明规格者，均为分析纯；水为蒸馏水。3 1生物试材供试病菌为野生敏感型灰葡萄孢霉
4、Botrytis cinerea Pers菌株。记录菌种来源。供试作物为感灰霉病品种，盆栽培养至2片4片真叶期，编号备用。32试验药剂原药(或母药)。33对照药剂采用已登记注册且生产上常用的原药(或母药)，其化学结构类型或作用方式应与试验药剂相同或相近。4试验步骤41孢子悬浮液制备将试验用病原菌在适宜的培养基上培养，或将病组织保湿培养，待产生孢子后，用无菌水洗下孢子，并用2层4层纱布过滤，制成浓度为1105个孢子mL的悬浮液，备用。4 2药剂配制水溶性药剂用蒸馏水溶解稀释。其他药荆选用合适的溶剂(甲醇、丙酮、二甲基甲酰胺或二甲基亚砜等)溶解，用o1吐温一80或其他合适的表面活性剂水溶液稀释。根
5、据药剂活性，设置5个7个系列质量浓度，有机溶剂最终含量一般不超过051。制剂可以直接用水稀释。43药剂处理将药液均匀喷施于叶面至全部润湿，待药液自然风干后备用。每处理3盆，4次重复，并设只含溶剂和表面活性剂而不含有效成分的处理作空白对照。1NYT 115610200844接种与培养用孢子悬浮液喷雾接种。保护性试验在药剂处理后24 h接种；治疗性试验在药剂处理前24 h接种。接种后移至保湿箱中(相对湿度95以上，温度2022。C)黑暗条件下培养24 h，然后在20。c25。C、12 h光暗交替(光照强度5 000Lux10 000Lux)、相对湿度8090的条件下培养7 d。4 5调查待空白对照
6、病叶率达到50以上时，分级调查各处理发病情况，每处理至少调查30片叶，分级方法为：0级：无病斑；1级：病斑占整个叶面积的5以下；3级：病斑占整个叶面积的515；5级：病斑占整个叶面积的1525；7级：病斑占整个叶面积的2550；9级：病斑占整个叶面积的50以上。5数据统计分析5I计算方法根据调查数据，计算各处理的病情指数和防治效果。5 1 1病情指数按公式(1)计算，结果保留小数点后两位。X一写字灿。式中：X病情指数；N各级病叶数；f相对级数值；N调查总叶数。51 2防治效果按公式(2)计算，结果保留小数点后两位。P一CK面-fPT；K 100式中：P防治效果，单位为百分数()；CK空白对照病情指数；PT药剂处理病情指数。5 2统计分析(2)用DPS(数据处理系统)、SAS(统计分析系统)或SPSS(社会科学统计程序)等标准统计软件对药剂浓度对数值与防效几率值进行回归分析，计算各药剂的EC5。、EC90等值及其95置信限，并进行各药剂处理问的差异显著性分析。6结果与报告编写根据统计结果进行分析评价，写出正式试验报告。
