1、中华人民共和国出入境检验检疫行业标准SN/T 1876-2007 医学媒介生物标本采集、制作及保存规程Rules of collecting, making and preserving for specimen of medical vectors 2007-04-06发布2007-10-16实施中华人民共和国发布国家质量监督检验检疫总局SN/T 1876-2007 目次I 1 范围2 要求3 对象4 准备.5 标本采集6 标本制作7 标本保存8 资料整理、统计和分析附录A(规范性附录)鼠类标本采集、制作4附录四规范性附录)蚤类标本采集、制作附录C(规范性附录)蚊类标本采集、制作附录D(规范
2、性附录)蝇类标本采集、制作.附录E(规范性附录)蝉类标本采集、制作四附录k规范性附录)蜗类标本采集、制作. . . . . . . . . . . . . . . . 14 附录G(规范性附录)茧蝶标本采集、制作附录H(规范性附录)蝶类标本采集、制作附录l(规范性附录)呐类标本采集、制作.附录J(规范性附录)蛇类标本采集、制作附录K(规范性附录)国境口岸xxxx标本采集记录表.SN/T 1876-2007 目。吕本标准附录A、附录B、附录C、附录D、附录E、附录F、附录G、附录H、附录I、附录J、附录K均为规范性附录。本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本标准起草单位:中华人民共和国
3、河北出入境检验检疫局、中华人民共和国宁波出入境检验检疫局、中华人民共和国辽宁出入境检验检疫局。本标准主要起草人:李俊成、聂维忠、李德昕、王海军、汪仁杰、刘恩东、郑剑宁、丛武春。本标准系首次发布的出入境检验检疫行业标准。SN/T 1876-2007 医学媒介生物标本采集、制作及保存规程1 范围本标准规定了医学媒介生物标本采集、制作和保存的方法、程序。本标准适用于出入境检验检疫部门对医学媒介生物标本采集、制作和保存工作。2 要求2.1 标本保存场所要求标本保存场所应保持干燥、通风、阴凉、避光，避免阳光照射;可安装空调和去湿机保持适宜温湿度(温度保持50C250C，相对湿度保持在45%55%)防湿防
4、潮p放置防腐防蛙药物防霉防虫;标本柜密封良好;元活动物存在。2.2 标本保存要求应建立完整的标本档案。标本应记录完整，应按照不同类别和保存要求分别置于专门的标本盒和标本柜/架内保存，定期检查。标本柜和标本盒应做到防潮、防蛙、防震、防尘等四防要求。模式标本和陈列标本分开保存。模式标本专室或专柜保存，专人负责，严格管理，不对外陈列展示，特殊情况经相关人员许可后方准取出检视，不准带出标本室。3 对象本标准所包含的医学媒介生物种类为:鼠类、蚤类、蚊类、蝇类、蝉类、蜗类、蛮蝶、朦类、蚓类和蛇类。4 准备4.1 成立工作小组工作小组人数根据需要而定，参加人员应了解医学媒介生物形态结构和生态习性的基本知识、
5、标本采集、制作和保存的相关技能和要求及必要的个人防护知识和技能。由一名熟练掌握专业技术的人员担任组长，负责组织管理和对小组成员进行专业技术培训。4.2 制定工作方案根据国境口岸内拟监测采集不同种类医学媒介生物的地区及周边区域的地理环境、生态环境制定相应的工作方案，包括工作内容、范围、时间、地点、方法、工具等。4.3 工具和用品准备4.3. 1 标本采集工具和用品4.3. 1. 1 一般工具和用品GPS子持机、海拔仪、望远镜、放大镜、照相机、录像机、计算器、温湿度计、水温仪、水流速仪、风速仪、照度仪、pH值试纸/pH值测定仪、手电筒、记录表、标记笔、在盘、卷尺、不锈钢米尺、摄子、平皿、毒瓶、指型
6、管/小玻瓶、放大镜、乙酷/三氯甲皖、敌百虫、气雾杀虫剂、酒精、吸管、胶布、棉花、纸盒、软纸、塑料袋、昆虫采集包、交通工具及其他用品。根据监测采集医学媒介生物不同种类增减相应工具和用品。4.3. 1. 2 鼠类标本采集工具和用品捕鼠笼、鼠夹、卵圆钳、诱饵、鼠袋、粘鼠板。4.3. 1. 3 蚤类标本采集工具和用品鼠袋、熏鼠箱、探蚤棒、集蚤器、白搪瓷盆、粘蚤纸、毛刷、筐子、毛笔。SN/T 1876-2007 4.3. 1. 4 双翅目昆虫标本采集工具和用品昆虫采集网、诱蚊灯、诱蝇笼、吸蚊枪、铁锹、诱饵、小在盘(盛放诱饵)、白搪在盘、水勺、水盆、吸管、水桶、蚊类饲养笼、糖水、棉签、刀片、高筒雨靴。4.
7、3. 1. 5 蝉瞒标本采集工具和用品布旗、电热集蜗器、集蜗器、暖瓶、毛笔、筐子、鼠笼、鼠袋、自搪瓷盆。4.3. 1. 6 董蝶标本采集工具和用品诱萤蝶盒/瓶、诱饵、粘蝉纸、塑料袋。4.3.2 标本制作工具和用品4.3.2. 1 标本制作工具解剖镜、显微镜、放大镜、解剖针、解剖台、解剖板、展翅板、白搪在盘/不锈钢盘(盘内可将解剖板放入)、白搪瓷盘、白搪瓷脸盆、大头钉/昆虫针、三级板、慑子、剪刀、子术刀、持针钳、手术缝合针、眼科手术器械、酒精灯、小烧杯、酒精灯架、各型吸管、干燥器、回软器、恒温烘干箱、筐子、毛笔、毛刷、直尺、卡尺、小台秤、天平。4.3.2.2 标本制作用品标本盒、标本瓶、平皿、广
8、口磨砂瓶、小磨砂瓶、吸管、指型管/小玻瓶、软木块、载玻片、盖玻片、胶布、棉花、塑料泡沫板、标签、白色纸卡、白纸、铅笔、脱脂记录表、标记笔、4号铁丝、细线绳、线、义眼、标本固定支架。4.3.2.3 标本制作药剂阿拉伯树胶、加拿大树胶、分析纯石炭酸、10%氢氧化押/氢氧化纳、酒精(浓度分别为50%、70%、95%和100%)、甘油、5%10%甲醒、蒸馆水、1%冰乙酸、石炭酸、二甲苯、丁香油、无色指甲油、防腐剂(毗霜膏)、双氧水、滑石粉、沸水。4.3.3 标本保存工具和用品4.3.3. 1 标本保存工具和用品标本柜、标本架、鼠类固态标本盒、鼠类生态标本盒、头骨标本盒、针插标本盒、浸泡标本盒、胶粘标本
9、盒、标本瓶、指型管/小暖瓶、磨砂广口瓶、吸管、胶布、棉花。4.3.3.2 标本保存防腐药剂棒脑块、酒精、甘油、甲醒、敌敌畏、干燥剂。4.3.3.3 标本记录存档工具和用品电脑、!照相机、扫描仪、档案柜、文件夹、记录表、标签、标记笔及其他用品。4.3.4 个人防护用品紧口工作服、线子套、乳胶手套、防护镜、鞋、口罩、毛巾、肥皂、消毒剂、气雾杀虫剂及其他用品。5 标本采集5.1 采集范围国境口岸区域及其周边向外延伸500m2 000 m的邻近区域。采集范围可根据采集对象及口岸实际情况调整。5.2 采集方法根据拟采集的医学媒介生物不同种类采用相应方法和技术对所选定的调查采集范围内进行水平分布调查、垂直
10、分布调查和生境调查，尽可能多地采集标本数量。鼠类标本采集见附录A，蚤类标本采集见附录B，蚊类标本采集见附录C，蝇类标本采集见附录D，牌类标本采集见附录E，瞒类标本采集见附录F，茧赚标本采集见附录G，朦类标本采集见附录H，内类标本采集见附录1，此类标本采集见附录J。5.3 填写记录表每次监测采集结束后均应填写规定的医学媒介生物监测采集记录表，按表内项目逐项填写，特别是2 生态学资料保证内容全面，准确无误。记录表见附录Kc6 标本制作6.1 选取标本SN/T 1876-2007 将采集的医学媒介生物进行简要分类计数，选取体形完整无损有代表性的医学媒介生物并进行相应的测量、称重及体表形态学描述记录后
11、制作标本。6.2 标本制作根据医学媒介生物不同种类采用相应方法和技术制作标本。鉴定后将编号、种名(包括拉丁名称)、采集地点、采集日期填入标签，固定于相应部位。鼠类标本制作见附录A，蚤类标本制作见附录B，蚊类标本制作见附录C，蝇类标本制作见附录D，蝉类标本制作见附录E，瞒类标本制作见附录F，茧蝶标本制作见附录G，朦类标本制作见附录H，内类标本制作见附录1，此类标本制作见附录J。6.3 填写记录表每次标本制作结束后均应填写规范的记录表，做到内容全面，准确无误。7 标本保存7.1 鼠类固态标本和生态标本保存固态标本鉴定后与头骨放入同一标本盒内再放入相应的标本柜内避光干燥保存，盒内放入适量棒脑块等防霉
12、防蛙药物保存，定期检查补充，防止霉变和虫蛙。生态标本保存同上。如发现虫虹，可采用蒸熏剂蒸熏除虫。7.2 针插标本保存针插标本鉴定后插入标本盒内再放入相应的标本柜内避光干燥保存，盒内放入适量棒脑块等防霉防蛙药物保存，定期检查补充，防止霉变和虫蛙。7.3 玻片标本保存玻片标本放入玻片标本保存盒内，放入相应标本柜内避光干燥保存。7.4 浸泡标本保存放入浸泡标本柜内避光保存，定期检查，补充或更换酒精甘油或甲醒溶液等保存液，保持标本完全浸泡于保存液中。7.5 胶粘标本保存同针插标本保存。8 资料整理、统计和分析8.1 资料整理在医学媒介生物鉴定结束后，根据医学媒介生物鉴定结果确定医学媒介生物种类、种群组
13、成、新种、媒介种、优势种群、常见种、稀有种和外来种，对新种和外来种进行生物形态学描述并请相关专家核定，列出国境口岸地区本次监测的医学媒介生物种类名表。8.2 统计和分析对各种资料记录表进行收集整理，并进行必要的技术统计分析。8.3 总结报告根据医学媒介生物鉴定结果分析情况，汇总有关数据图表，写出医学媒介生物标本鉴定总结报告。3 SN/T 1876-2007 附录A(规范性附录)鼠类标本采集、制作A.1 要求A.1.1 鼠类标本采集、制作时工作人员应做好个人防护，防止被感染或鼠体外寄生媒介叮咬。A. 1.2 在鼠传疾病疫区采集鼠类标本时，工作人员须经过严格培训合格后方可进行工作。对采集到的鼠类标
14、本应妥善处理。A. 1.3 采集到的鼠类标本均应先行检查鼠体外寄生媒介后放入白布袋内带回冷冻或浸泡在酒精甘泊中暂时保存。A. 1.4 标本制作中所需的毗霜膏等剧毒药剂的使用保存应符合相应部门要求，应有完善的管理程序。A.2 标本采集A. 2.1 捕鼠笼诱捕法采用捕鼠笼诱捕法在室内外进行诱捕采集，将采集的鼠类用乙酷/三氯甲皖麻醉毒死后装入鼠袋内，做好记录和标记，然后带回实验室进行标本制作。A. 2. 2 捕鼠夹夹捕法和粘鼠板粘捕法对一些使用捕鼠笼诱捕法无法诱捕的鼠类和场所采用捕鼠夹夹捕法和粘鼠板粘捕法进行采集，将采集的鼠类装入鼠袋内，做好记录和标记，带回实验室进行标本制作。A. 2. 3 毒饵毒
15、杀法或蒸慧法选择国境口岸内或交通工具有鼠活动的场所采用毒饵或蒸熏剂蒸熏灭鼠，采集被杀灭的鼠类装入鼠袋内，做好记录和标记，带回实验室制作标本。A. 2. 4 填写记录表每次采集结束后均应规范填写鼠类监测采集记录表，按表内项目逐项填写，特别是生态学资料保证内容全面，准确无误。记录表见附录KoA.3 标本制作A. 3.1 选取标本在做好个人防护的条件下将采集的鼠类进行简要分类计数，检查采集体外寄生的蚤、蝉、蜗等媒介，进行测量后，剖开下腹部，彻底浸泡消毒48h以上，选取头骨、体形完整有代表性的鼠类测量记录性别、体长、尾长、耳长、后足长度和体重后制作标本。A. 3. 2 固态标本制作A. 3. 2.1
16、剥皮4 a) 将选好的鼠类标本放在解剖板上，在腹部正中皮肤上自外生殖器前(小型鼠类约1cm，大型鼠类Zcm)至胸软骨处下缘剪开一个纵切口，不剪开腹部肌肉部分;b) 用摄子夹住皮肤切开部分，以解剖刀背先自切口两侧，然后向后部轻轻剥离，使皮肤与皮下组织分离，至旺门处从皮肤内面把肠剪断;c) 脱出后腿，在腔骨上端剪断，留下腔骨;d) 将鼠尾基部自内侧剥脱1cmZ cm，用左手食指和中指夹住鼠尾剥脱出的根部，右手用慑子夹住鼠尾剥脱出的基部固定，左手用力抽出鼠尾椎骨;巳)翻脱鼠皮，脱出前腿，自挠尺骨近端剪断前腿，留下挠尺骨;f) 向前脱出头部，自耳基部割断外耳道，在眼部轻轻切开皮肤与眼相连的皮肤，直至将
17、鼻口相连SN/T 1876-2007 的皮肤完整剥离下来。A. 3. 2. 2 剔除肌肉和皮下脂肪用手术刀剔除腔骨和尺骨上的肌肉，刮去皮下脂肪，用石膏粉把所刮下的脂肪搓掉。A. 3. 2. 3 涂抹防腐剂用毛笔或小毛刷在皮肤内面和腔骨、尺骨上均匀涂上防腐剂，不留空白。A. 3. 2. 4 填充鼠体a) 选取一段比鼠尾长度长出1cm3 cm的4号铁丝，按照鼠尾椎的形状和长度缠绕棉花，其粗细程度较鼠尾椎稍细，均匀涂上防腐剂，插入鼠尾部。b) 选取一段比鼠体长度短1cm3 cm的4号铁丝，前端用棉花缠成鼠头大小形状，插入头部，后端与尾部铁丝相连。c) 向鼠体内填充棉花，至头部、四肢、背部与鼠体原来的
18、形状相似。四肢应填实，背部应填平。用线将腹部切口及口缝合起来。A. 3. 2. 5 整理外形用梳子将鼠体毛梳理平整，放在木板上，前足向前并行，爪向下，下顿紧贴前肢，后肢向后并行，后足腹面向上，鼠腹部紧贴木板，在左后肢上系上标签，用大头针或昆虫针固定四足在木板上在阴凉处晾干。A. 3. 2. 6 头骨标本制作自颈部剪下头骨放入烧杯内加水煮3min5 min取出，剔除肌肉，注意不要损坏骨悟部分;自枕大孔处将脑组织掏出;用双氧水进行漂白后在日光下晒干，与鼠体标本编为同一个编号保存。A. 3. 3 生态标本制作A. 3. 3.1 剥皮a) 前部过程同A.3. Z. 1 a)A. 3. Z. 1叶。b)
19、 将皮剥至颈部时，自枕骨后剪断颈部，将脑组织自枕大孔处掏出。A. 3. 3. 2 剔除肌肉和皮下脂肪及涂抹防腐剂同A.3. Z. Z和A.3. Z. 3 0 A. 3. 3. 3 填充鼠体a) 选取一段比鼠尾长度长3cm5 cm的4号铁丝，按照鼠尾椎的形状和长度缠绕棉花，其粗细程度较鼠尾椎稍细，均匀涂上防腐剂，插入鼠尾部。b) 选取一段比鼠体长度长3cm5 cm的4号铁丝，前端自枕大孔处插入头部。c) 选取比鼠前后肢长度长3cm5 cm的4号铁丝各2根，一端从前肢和后肢插入，自足掌穿出Z cm3 cm，另一端与尾部和头部铁丝相连。d) 向鼠体内填充棉花，至形状与鼠体原来的形状相似。用线将腹部切
20、口缝合起来。e) 将四肢所露出的铁丝一端固定在所选定的固定支架/支撑物上，将鼠形整理成所拟定的姿势，梳理好鼠毛，按上义眼，将标签系在左后肢上，放阴凉处晾干。A. 3. 4 浸泡标本制作对无需制成标本的可直接剖开鼠腹部，放入盛有75%酒精甘油或5%甲醒溶液的玻瓶内密封，加贴标签或用铅笔书写好标签放入瓶内后保存。A. 3. 5 鼠种鉴定对采获的鼠类进行鼠种鉴定，计数各鼠种数量，对非常见鼠种请专家指导鉴定。A. 3. 6 填写标签鉴定后将种名(包括拉丁名称)、性别、体长、尾长、耳高、后足长度、体重、采集地点、采集日期等填入标签。标签系在左后肢上。A. 3. 7 填写记录表每次标本制作结束后均应填写规
21、范的记录表，做到内容全面，准确无误。5 SN/T 1876-2007 B.1 要求附录B(规范性附录)蚤类标本采集、制作B.1.1 蚤类标本采集、制作时工作人员应做好个人防护，防止被叮咬感染。B. 1.2 在鼠疫疫区采集蚤类标本时，工作人员须经过严格培训后方可进行工作。对采集到的蚤类标本应妥善保存处理。B.2 标本采集B. 2.1 宿主动物体外寄生蚤采集采集蚤类时工作人员应做好个人防护。采用捕鼠笼捕捉活鼠或其他方法(如:鼠夹、挖洞、枪击等)捕鼠，每只鼠装入一个白色鼠袋，扎紧袋口，带回实验室，用乙酶/三氯甲:民麻醉后，在白搪瓷盘/盆中拣蚤，然后对仍停留在毛中的蚤类用毛刷或筐子仔细梳筐鼠体检蚤，均
22、装入盛有75%酒精的玻瓶内，做好记录和标记，留作标本制作。其他宿主动物体外寄生蚤可参照上述方法采集。B. 2. 2 宿主动物洞干蚤采集用探蚤棒探鼠洞，上下左右转动几次后慢慢拉出，边拉边用拣蚤慑将探蚤棒上的蚤类拣下，装入盛有75%酒精的玻瓶内，做好记录和标记，带回实验室进行标本制作。B. 2. 3 宿主动物巢穴蚤采集B. 2. 3.1 集蚤器采集法挖掘宿主动物巢穴，迅速将全部巢穴内容物及窝内浮士一起装入白布袋，做好标记，带回实验室将窝巢内容物倒入集蚤器进行检集，装入盛有75%酒精的玻瓶内，做好记录和标记，留作标本制作。B.2.3.2 清水漂浮法将窝巢内容物倒入白搪瓷盆内加水搅拌，待水面静止澄清后
23、，检查水面上的蚤类，装入盛有75%酒精的暖瓶内，做好记录和标记，带回实验室制作标本。B.2.3.3 直接检查法将窝巢内容物逐次倒入白搪在盆内直接进行检集。采集到的蚤装入盛有75%酒精的玻瓶内，做好记录和标记，带回实验室制作标本。B. 2. 4 室内游离蚤采集在室内布放粘蚤纸沾捕游离蚤，将沾捕到的蚤类用毛笔沾取酒精自粘蚤纸上取下，放入盛有75%酒精的玻瓶内，做好记录和标记，带回实验室制作标本。B. 2. 5 填写记录表每次采集结束后均应规范填写蚤类监测采集记录表，按表内项目逐项填写，特别是生态学资料保证内容全面，准确无误。记录表见附录K。B.3 标本制作B. 3.1 选取标本将采集的标本先做初步
24、鉴定，然后用酒精浸泡或选取有代表性的虫体完整的蚤制成玻片标本进行保存。6 SN/T 1876-2007 B. 3. 2 浸泡标本制作将采集的蚤类直接放入盛有75%酒精甘油的小玻瓶内密封，加贴标签或用铅笔书写好标签放入瓶内后保存。B. 3. 3 玻片标本制作a) 腐蚀:将蚤标本放入10%氢氧化饵或氢氧化纳榕液浸泡腐蚀，在室温下进行腐蚀1d3 d。见蚤体颜色由深棕色变为淡棕色，呈半透明时即可。如遇有的蚤刚吸过血，腹内留有血块，则可在解剖镜下用解剖针或昆虫针自蚤的第2、3腹节处刺破，加快腐蚀腹内残留物。b) 中和:将腐蚀好的蚤用蒸馆水冲洗2次，放入1%冰乙酸溶液中，中和作用时间约Zh。然后再用蒸锢水
25、浸泡1ho c) 脱水:将蚤移入酒精中逐级浸泡脱水，酒精浓度分别为50%、70%、95%和无水酒精，时间各为30 minZ ho再移入石炭酸与二甲苯等量溶液中浸泡30min 1 ho d) 透明:脱水后的跳蚤移入二甲苯透明1hZ4 h，再移至丁香油中1hZ4 h，使其进一步透明软化。巳)封片:将透明好的蚤标本放在载玻片中央，在解剖镜下进行整姿。在蚤体上滴1小滴加拿大树胶，将各足用小慑子拉直，摆正体位，使跳蚤的头向左、腿向下。每张玻片封藏1只或同种的1雌1雄，轻轻盖上盖玻片，用手指轻压盖玻片底边，然后将加拿大树胶由盖玻片上边的空隙滴加渗入，避免蚤移动和产生气泡。f) 干燥:将封固好的标本置于40
26、0C50oC干燥箱内烘干3d4 d。g) 封边:在盖玻片四边用指甲油封闭。加贴标签，放入玻片标本盒内保存。B. 3. 4 蚤种鉴定在解剖显微镜下对蚤类进行蚤种鉴定，计数各蚤种数量。对非常见蚤种请专家指导鉴定。B. 3. 5 填写标签浸泡标本应用铅笔书写标签放入盛蚤的玻瓶内或贴于瓶外壁上。玻片标本标签与载玻片等宽，呈正方形，分为左右2张，左边填写蚤种中文名、拉丁学名、性别、鉴定人，右边自上而下填写宿主名、采集人、采集地点和采集时间。B. 3. 6 填写记录表每次标本制作结束后均应填写规范的记录表，做到内容全面，准确无误。7 SN/T 1876-2007 C.1 要求附录C(规范性附录)蚊类标本采
27、集、制作在蚊媒疾病疫区采集蚊类标本时，工作人员应做好个人防护防止被叮咬感染，但禁止吸烟、涂驱蚊剂。C.2 标本采集C. 2.1 成蚊标本采集C. 2. 1. 1 诱蚊灯诱捕法采用诱蚊灯诱捕法在室外进行诱捕采集，将采集的蚊类毒死后计数，做好记录和标记，然后带回实验室进行标本制作。C. 2. 1. 2 昆虫采集网网捕法对一些使用诱蚊笼诱捕法无法诱捕的蚊类和不适合使用的场所采用昆虫采集网网捕法进行采集，将采集的蚊类毒死后做好记录和标记，带回实验室进行标本制作。C. 2. 1. 3 眼蚊枪眼捕法选择国境口岸室内有成蚊停息活动的室内场所采用吸蚊枪吸捕成蚊，毒死后做好记录和标记，带回实验室制作标本。C.
28、2. 1. 4 入帐诱法在蚊类室外草生栖息场所采用入帐诱法进行采集，用于持电动吸蚊器捕成蚊，用毒瓶内毒杀，将采集的蚊类毒死后做好记录和标记，带回实验室进行标本制作。C. 2. 2 蚊蛐及自由标本采集在蚊蝴草生场所用水勺捞取或用吸管吸取蚊蝴和蚊虫雨，装入水桶或瓶内带回实验室进行饲养或将蚊蝴用50oC60oC的热水杀死，使虫体伸直然后放入盛有75%酒精瓶内，做好记录和标记，带回实验室制作标本。C. 2. 3 填写记录表每次采集结束后均应规范填写蚊类监测采集记录表，按表内项目逐项填写，特别是生态学资料保证内容全面，准确无误。记录表见附录KoC.3 标本制作C. 3.1 选取标本将采集或饲养的蚊类进行
29、简要分类计数，选取体形完整无损有代表性的蚊类制作标本OC. 3. 2 针插标本制作8 a) 准备:用左手拇指和食指轻轻夹住软木块两侧，平放于玻璃桌面上，用右手拇指和食指捏住或用止血钳夹住微针中部，微针针尖自软木块上面中间中右四分之一处垂直插透，然后将软木块翻转过来，保持微针尾部与现璃面垂直，轻压软木块，使微针针尖部分伸出，微针末端与软木块持平;选取3号昆虫针做主针，自软木块另一端四分之一处与微针反方向垂直穿透，直至主针末端。b) 插针:将选好的成蚊标本放入平皿内，用昆虫针将其尽量拨至腹面向上，右手拇指和食指捏住软木块主辛十端两侧，保持微针针尖对准蚊体六足中间轻轻垂直插入，针尖不能穿透蚊体中胸背
30、板。SN/T 1876-2007 c) 整姿:调整主针使软木块停留于主针中上三分之一处，3号针在右，微针在左，头部向前，用慑子轻轻拉直各足，将双翅向两侧面分别拉开保持张开形状。d) 干燥:将制好的标本放阴凉干燥处待自然干燥后插入标本盒内。巳)回软:干标本应放入回软器内回软后再按照上述步骤制作标本。因软所需时间根据蚊种体型大小和干燥程度而定，一般需2h4 hc C. 3. 3 玻片标本制作C. 3. 3.1 成蚊尾器玻片标本制作a) 腐蚀:对于一些需解剖尾器鉴定的蚊种用剪刀垂直剪下尾器，放入10%氢氧化饵/氢氧化铀水j容液内浸泡腐蚀24h48 h，或加热煮沸5min进行腐蚀。b) 中和:将标本移
31、入加有1滴2滴乙酸的酸性水中，中和残留的氢氧化饵/氢氧化铀，然后逐次用蒸馆水浸泡清洗2遍3遍。c) 脱水:移入75%酒精脱水30min，再入85%、95%、100%酒精中各20mi口，进行脱水。d) 封片:将脱水后的标本取出放在载瑛片中间部位，背面朝上，头部朝前，加1滴树胶酌，摆正标本。待标本稍干固定后再加适量树胶酣完全覆盖标本稍干后将盖玻片放在上面轻轻压平标本。巳)干燥:制好的玻片标本放阴凉处自然干燥或用60cC70cC烤箱烤干。f) 封边:在盖玻片四边用指甲油封闭。与所剩余的标本编为同一个编号，贴上标签，放入玻片标本盒内保存。C.3.3.2 蚊蛐玻片标本制作a) 脱水:选取4龄蚊蝴移入75
32、%酒精中脱水10min，再先后移入95%和无水酒精中各脱水30 mi口。b) 封片:将脱水后的标本取出放在载玻片上，使虫体背面朝上，头部向前，用手术刀从中部横向切断，摆正位置，将下半段放置于上半段右边，与头部平齐，呼吸管向里，待酒精挥发后在标本上面滴加一滴加拿大树胶酣完全覆盖标本，稍干后将盖玻片放在上面轻轻压平标本。c) 干燥:制好的瑛片标本放阴凉处自然干燥或用60cC70cC烤箱烤干。d) 封边:在盖玻片四边用指甲油封闭。贴上标签，放入玻片标本盒内保存。C. 3. 4 浸泡标本制作对采集的蚊蝴和虫目标本可直接放入盛有75%酒精甘泊的小玻瓶内密封，加贴标签或用铅笔书写好标签放入瓶内后保存。C.
33、 3. 5 蚊种鉴定在解剖显微镜下对采获的蚊类进行蚊种鉴定，计数各蚊种数量，对非常见蚊种请专家指导鉴定。C. 3. 6 填写标签鉴定后将种名(包括拉丁名称)、性别、采集地点、采集日期填入标签。针插标本插在标本下方用三级板逐一固定不同高度;玻片标本标签与载玻片等宽，呈正方形，将标签贴在载玻片的左端。C. 3. 7 填写记录表每次标本制作结束后均应填写规范的记录表，做到内容全面，准确无误。9 SN/T 1876-2007 D.1 要求附录D(规范性附录)蝇类标本采集、制作蝇类标本采集、制作时工作人员应做好个人防护，防止被感染。D.2 标本采集D. 2.1 成蝇标本采集D. 2. 1. 1 诱蝇笼诱
34、捕法采用诱蝇笼诱捕法在室外进行诱捕采集，将采集的蝇类毒死后计数，做好记录和标记，然后带回实验室进行标本制作。D. 2. 1. 2 昆虫采集网网捕法对一些使用诱蝇笼诱捕法无法诱捕的蝇类和不适合使用的场所采用昆虫采集网网捕法进行采集，将采集的蝇类毒死后做好记录和标记，带回实验室进行标本制作。D. 2. 1. 3 室内毒饵毒杀法选择国境口岸内有成蝇活动的室内场所采用毒饵毒杀成蝇，采集被毒杀的成蝇，做好记录和标记，带回实验室制作标本。D. 2. 2 蝇蝴标本采集在蝇蝴草生地划出一平方尺取表面至10cm深的范围，摊平草生物，拣出全部蝇姐计数，用水洗净外表后投入沸水中杀死，再放入75%酒精瓶内，带回实验室
35、制作标本。D. 2. 3 填写记录表每次采集结束后均应规范填写蝇类监测采集记录表，按表内项目逐项填写，特别是生态学资料保证内容全面，准确无误。记录表见附录K。D.3 标本制作D. 3.1 选取标本将采集的蝇类进行简要分类计数，选取体形完整无损有代表性的蝇类制作标本。D. 3. 2 针插标本制作a) 插针:根据成蝇体型大小选取适宜型号昆虫针，用左手拇指和食指轻轻夹住蝇中胸两侧，右手拇指和食指捏住昆虫针中上三分之一处，针尖自中胸背板中线右侧插入，从腹面六足中间插出，成蝇停留于昆虫针中上三分之一处。b) 整姿:用摄子轻轻拉直各足，将双翅向两侧面分别拉开保持张开形状。雄性麻蝇应将尾器拉出固定。c) 干
36、燥:将制好的标本放阴凉干燥处待自然干燥后插入标本盒内。d) 回软:对干标本应放入回软器内回软后再按照上述步骤制作标本。因软所需时间根据蝇种体型大小和干燥程度而定，一般需4h12 h。D. 3. 3 玻片标本制作D. 3. 3.1 成蝇尾器玻片标本制作10 a) 腐蚀:对于一些需解剖尾器鉴定的蝇种用剪刀垂直剪下尾器，放入10%氢氧化饵/氢氧化铀水溶液内浸泡腐蚀24h48 h，或加热煮沸5min进行腐蚀。SN/T 1876-2007 b) 中和:将标本移入加有1商2滴乙酸的酸性水中，中和残留的氢氧化饵/氢氧化纳，然后逐次用蒸馆水浸泡清洗2遍3遍。c) 脱水:移入75%酒精脱水30min，再入85%
37、、95%、100%酒精中各20mi口，进行脱水。d) 封片:将脱水后的标本取出放在载玻片中间部位，背面朝上，头部朝前，加1滴树胶酷，摆正标本。待标本稍干固定后再加适量树胶酣完全覆盖标本稍干后将盖玻片放在上面轻轻压平标本。e) 干燥:制好的瑛片标本放阴凉处自然干燥或用600C700C烤箱烤干。f) 封边:在盖玻片四边用指甲油封闭。与所剩余的标本编为同一个编号，贴上标签，放入玻片标本盒内保存。D. 3. 3. 2 蝇蝴玻片标本制作一龄、二龄幼虫经处理后把后端折过来后气门朝上，采用整体封片制成玻片标本。三龄幼虫可切头、尾、躯三部分，躯包括17腹节沿背部中央纵线剪开摊平后，与头、尾封在同一玻片上，其他
38、制作方法、程序同上。D. 3. 4 浸泡标本制作对解剖的尾器元需制成瑛片的和蝇蝴标本可直接放入盛有75%酒精甘油的小暖瓶内密封，加贴标签或用铅笔书写好标签放入瓶内后保存。D. 3. 5 蝇种鉴定在解剖显微镜下对采获的蝇类进行蝇种鉴定，计数各蝇种数量，对非常见蝇种请专家指导鉴定。D. 3. 6 填写标签鉴定后将种名(包括拉丁名称)、性别、采集地点、采集日期填入标签。针插标本标签插在标本下方用三级板逐一固定不同高度;玻片标本标签与载玻片等宽，呈正方形，将标签贴在载玻片的左端。D. 3. 7 填写记录表每次标本制作结束后均应填写规范的记录表，做到内容全面，准确无误。11 SN/T 1876-2007
39、 E. 1 要求附录E(规范性附录)蝉类标本采集、制作在牌媒疾病疫区采集蝇类标本时，工作人员应做好个人防护防止被叮咬感染，但禁止吸烟、涂驱避剂。E. 2 标本采集E. 2.1 布旗法采用布旗法在室外草丛、灌木顶部进行采集，将采集的蝉类装入盛有少量温砂的玻瓶内或毒死放入盛有75%酒精瓶内计数，做好记录和标记，然后带回实验室进行标本制作。E. 2. 2 动物体表搜蝉法家畜和野生动物等奇主体上采集蝉类时，用小摄子或毛刷逆毛检查，仔细检查耳壳、眼险及颜面、颈部垂肉、腋下、胸部、乳房、腹股沟、会阴及月工门附近等容易被叮咬的部位。发现牌后，先用小摄子轻轻摇动，再果断摘取，防止假头断离。捕获的小型野生动物应
40、放在白布袋内扎紧袋口，带回实验室检查。将采集的牌类装入盛有少量湿砂的玻瓶内或毒死放入盛有75%酒精瓶内计数，做好记录和标记，然后带回实验室进行标本制作。E. 2. 3 野生动物洞穴搜蝉法收集野生动物洞穴中内容物及土壤等，装入白布袋内扎紧袋口，带回实验室放在大型白色瓷盆中仔细检查，或放在集瞒器中加热，收集其中的牌类。将采集的牌类装入盛有少量湿砂的玻瓶内或毒死放入盛有75%酒精瓶内计数，做好记录和标记，然后带回实验室进行标本制作。E. 2. 4 填写记录表每次采集结束后均应规范填写牌类监测采集记录表，按表内项目逐项填写，特别是生态学资料保证内容全面，准确无误。记录表见附录KoE. 3 标本制作E.
41、 3. 1 选取标本将采集或饲养的蝉类进行简要分类计数，选取体形完整无损有代表性的蝉类制作标本。对活的饱食蝉类应先放在装入盛有少量湿砂的暖瓶内饲养，等其自行消化胃内血液后再取出制作标本。E. 3. 2 玻片标本E. 3. 2.1 成虫玻片标本12 a) 腐蚀:将保存在70%酒精里的标本取出，放在小平皿或烧杯内，用蒸馆水清洗30min。放入5%10%氢氧化何(或氢氧化铀)溶液内，加热至虫体颜色由深色变成淡棕色。对吸血蝉类可用解剖针在腹部扎数个小孔加速体内血液腐蚀。然后后再取出制作标本。b) 中和:取出标本，在平皿内用蒸馆水洗2次3次，每次10mi口。移入5%乙酸溶液中和浸泡30 min，然后用蒸
42、馆水水洗2次3次，每次10mino c) 脱水:依次经过50%、75%、85%、95%酒精溶液中各浸泡60min、30min、20min, 10 min进行脱水。d) 封片:将洗净的载玻片放在白纸上，白纸画有载玻片大小的方框及其两条对角线，载玻片正好放在方框内。将4滴5滴加拿大树胶酣滴于载瑛片中心，稍稍摊平。用解剖针取出一只蝉，置于载玻片中心。在解剖镜下，调整牌位置，使其头朝下，各足伸展。等待加拿大树胶酣半干。SN/T 1876-2007 厚度高的蝉周围放一些碎小、洁净的盖瑛片。再用弯头慑子放上盖玻片，放时应先使盖玻片部分接触液面再轻轻将盖玻片放下，以免产生气泡和蝉移位。e) 干燥:放入450
43、C烘箱烘干5d7 do f) 封边:在盖玻片四周用无色指甲油封闭。载玻片加贴标签，放入玻片标本盒内鉴定保存。E. 3. 2. 2 幼蝉和若蝉a) 清洗:取出保存在70%酒精里的标本，放在小平皿内，用蒸馆水清洗30mino b) 脱水:依次经过50%、75%、8町5%、9闪5%酒精榕液中各浸泡脱水6omin口、3omin口、20min口、1川omin口1c) 透明:移入二甲苯溶液中浸泡3切omin口n，可用解剖针在腹部扎数个小孔使其透明充分。d) 封片:将洗净的载玻片放在白纸上，白纸画有载瑛片大小的方框及其两条对角线，载玻片正好放在方框内。将4滴5滴霍民液滴于载玻片中心，稍稍摊平。用解剖针取出一
44、只标本，置于载玻片中心。在解剖镜下，调整蝉位置，使其头朝下，各足伸展。厚度高的蝉周围放一些碎小、洁净的盖玻片。再用弯头慑子放上盖玻片，放时应先使盖玻片部分接触液面再轻轻将盖玻片放下，以免产生气泡和蝉移位。巳)干燥:放入450C烘箱烘干5d7 d。f) 封边:在盖玻片四周用无色指甲油封闭。载瑛片加贴标签，放入瑛片标本盒内鉴定保存。E. 3. 2. 3 胶粘标本制作a) 准备:把白色纸卡剪成底边长0.4cm、高为1cm的等腰三角形。取一枚3号4号的昆虫针穿过三角卡底端中部，用三级台固定至昆虫针中上二分之一处。另取一枚昆虫针针尖沾一点乳胶，点在三角卡尖端上。b) 制作:将活蝉放入试管，投入乙酷棉球麻
45、醉毒死。但l入平皿内，使蝉背面朝上，用昆虫针针尖把蝉体右侧面粘起，放在点有胶液的三角卡尖端，并迅速向后撤针，以免把牌带起。粘好的标本如需调整，可用昆虫针针尖拨挑。c) 干燥:在昆虫针的中三分之一和下三分之一处插上标签，放阴凉处自然干燥后插入标本盒内。E. 3. 2. 4 浸泡标本将采集到的蝉放入装有700C80oC的热水的小平皿中杀死，使其保持肢体伸展的状态。将蝉放入指形管内，用铅笔书写好标签放入瓶内。用70%酒精力日至指形管的三分之二处，并滴加1%甘油2滴。指形管口封堵上一小团脱脂棉花。将指形管放置于磨口瑛璃瓶中，灌满70%酒精，滴加1%甘油适量，密闭保存，定期更换保存液。E. 3. 3 蝉
46、种鉴定在解剖显微镜下对采获的牌类进行蝉种鉴定，计数各牌种数量，对非常见蝉种请专家指导鉴定。E. 3. 4 填写标签鉴定后将种名(包括拉丁名称)、性别、采集地点、采集日期填入标签。胶粘标本插在标本下方用三级板逐一固定不同高度;现片标本标签与载玻片等宽，呈正方形，将标签贴在载玻片的左端。E. 3. 5 填写记录表每次标本制作结束后均应填写规范的记录表，做到内容全面，准确无误。13 SN/T 1876-2007 F.1 标本采集F. 1. 1 恙蜻标本采集F. 1. 1. 1 动物体表采集附录F(规范性附录)瞒类标本采集、制作用捕鼠笼捕捉活鼠，装入白色鼠袋，每袋1只，带回实验室用乙酷/三氯甲:院麻醉
47、杀死鼠，自耳部深处剪下鼠耳，放入平皿内，平皿置于铺有防蝇油纱布的白搪瓷盘内，将鼠耳外翻，在解剖镜下检查恙蜗幼虫，发现瞒类即用湿毛笔尖沾取瞒类放入盛有75%酒精瓶内计数。同时检查鼠的E门、乳房、生殖器腹锦鸡后退、尾椎骨上方等部位。鼠本背毛中的恙蜗可将鼠四足固定于木板上，背部向上，剪去背毛，放置30 min60 min，恙瞒幼虫自行爬出即可采获。做好记录和标记，然后带回实验室进行标本制作。其他动物可参照上述方法采集，对耳壳内寄生的蜗类用强光照射采集。F. 1. 1.2 布旗法采用白色绒布制作的布旗在室外草丛中摆动或草上慢慢拖动进行采集，发现蜗类即用?显毛笔尖沾取蜗类放入盛有75%酒精瓶内计数，做好
48、记录和标记，然后带回实验室进行标本制作。F. 1. 1.3 动物诱集法将小白鼠或大白鼠或野外捕获的活鼠装入鼠笼，置于野外草丛中24h48 h，取回检查，方法同F. 1. 1. 10 F. 1. 1. 4 漂浮法选择野外动物诱集阳性的地方，铲取地面浅层土壤，置于自搪瓷盆内，加水搅拌，待水面静止澄清后将漂浮物捞出置于解剖镜下检查采集恙瞒。F. 1. 2 革蜗标本采集F. 1. 2. 1 动物体表采集法用捕鼠笼捕捉活鼠，装入白色鼠袋，每袋1只，带回实验室用乙酶/三氯甲:院麻醉杀死鼠，在白搪瓷盘内检查鼠袋内面的革虫前，然后检查鼠体，发现革蜗即用湿毛笔尖沾取放入盛有75%酒精的平皿内，再将鼠放在白搪在盆
49、内，用筐子反复梳筐鼠毛，用放大镜检查采集梳下的革瞒，采集结束后加热酒精至700C，杀死后放入盛有75%酒精的小玻瓶内，做好记录和标记，然后带回实验室进行标本制作。其他动物可参照上述方法采集。F. 1. 2. 2 动物窝巢内革蜗采集法(电热集蜗器采集法)挖掘鼠和其他动物的窝巢，将巢内全部材料及巢内浮士一并装入白布袋内，带回实验室用电热集蜗器加热4h10h，采集革蜗。其他同F.1. 2.10 F. 1. 3 填写记录表每次采集结束后均应规范填写蜗类监测采集记录表，按表内项目逐项填写，特别是生态学资料保证内容全面，准确无误。记录表见附录K。F.2 标本制作F. 2.1 选取标本将采集的蜗类进行简要分类计数，选取体形完整元损有代表性的蜗类制作标
