1、标准下载网()ICS 65. 020. 30 B 43 中华人民共和国国家标准GB 23238-2009 种猪常温精液Boar fresh semen 2009-03-09发布2009-05-01实施中华人民共和国国家质量监督检验检瘦总局申非中国国家标准化管理委员会战叩前本标准第4章、第8章是强制性的，其余为推荐性的。本标准的附录A、附录B为规范性附录。本标准由中华人民共和国农业部提出。本标准由全国畜牧业标准化技术委员会归口。GB 23238-2009 本标准起草单位z全国畜牧总站、北京市畜牧兽医总站、农业部种猪质量监督检验测试中心(广州、深圳市康达尔养猪有限公司、北京养猪育种中心、惠州华美(
2、畜牧)科技有限公司。本标准主要起草人:刘长春、薛明、云鹏、肖炜、刘小红、林雪、马振强、张海栓、孙德林。I GB 23238-2009 种猪常温精液1 范围本标准规定了种猪常温精液的要求、抽样、试验方法、判定规则以及标志、包装、贮存和运输。本标准适用于种猪常温精液产品。2 规范性引用文件下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。GB/T 2828. 1 计数抽样检验程序第1部分:按接收质
3、量限(AQL)检索的逐批检验抽样计划(GB/T 2828.1-2003 , ISO 2859-1: 1999 , IDT) GB/T 2828. 2计数抽样检验程序第2部分:按极限质量(LQ)检索的孤立批检验抽样方案(GB/T 2828. 2-2008, ISO 2859-2: 1985 , NEQ) GB/T 2828. 11 计数抽样检验程序第11部分:小总体声称质量水平的评定程序3 术语和定义3. 1 3.2 3.3 3.4 3.5 下列术语和定义适用于本标准。原精液ejaculated semen 采集后未经稀择处理的精液。常温精液fresh semen 经稀释处理后在16C-18 C
4、环境中保存仍具有受精能力的种猪精液。精子活力sperm motility 在37C环境下直线前进运动精子数占总精子数的百分率。直线前进运动精子数pr吨ressivemotility 精液中呈直线前进运动精子的总数。精子畸形率abnormal sperm percentage 畸形精子数占总精子数的百分率。4 要求4. 1 原精液4. 1. 1 来源来惊于具有种用价值，体型外貌和生产性能符合种用要求，三代系谱资料齐全，体质健康的种猪。4. 1.2 外观乳白色，无脏性分泌物，无皮毛等异物。GB 23238-2009 4. 1.3 来精量二三100mL。4. 1.4 精子密度二注I亿/mL。4. 1
5、.5 精子活力注70%。4. 1.6 精子畸形率20%。4.2 常温精液产晶4.2. 1 外观乳白色，元杂质，包装封口严密。4.2.2 剂量地方品种40mL50 mL，其他80mL100 mL。4.2.3 精子活力二三60%。4.2.4 每剂量中直线前进运动精子数地方品种二三10亿，其他注25亿。4.2.5 精子畸形率运20%。4.2.6 有效期二三72h。5 抽样5. 1 方案5. 1. 1 生产方抽样按照GB/T2828. 2，采用极限质量(LQ)=8，孤立批模式A抽样，见附录A。5. 1.2 监督抽样按照GB/T2828. 11，监督总体为生产单位的种猪常温精液产品，采用监督质量水平(D
6、o)= 10，选用第二检验等级进行抽样，抽样程序见附录B。5. 1. 3 复检和仲裁抽样复检可根据原抽样方案确定;仲裁抽样按5.1.2规定的方案，并按7.3.2评定。5.2 抽样方法5.2. 1 确定样品数按种猪号(或批次号顺序排列，由抽样人员现场按样本头数随机确定种猪常温精液样品数。5.2.2 取样量对确定取样的种猪(或批次)，从其精液贮藏容器中随机抽取两个剂量种猪常温精液。5.3 样晶贮存、运输样品贮存、运输应符合8.3，8.4的规定。5.4 样晶捡验时间样品检验应在有效期内完成。6 试验方法6. 1 常温精液外观用目测法，其结果应符合4.2.1的规定，剂量、精子活力、直线前进运动精子数、
7、精子畸形率的2 检验按附录A规定的方法，其结果应分别符合4.2.2-4. 2. 5的规定。6.2 检验分类6.2. 1 常规检验GB 23238-2009 是型式检验的一部分，即单项目检验，主要是在生产批入库前和销售前的检验。6.2.2 型式检验是评定产品质量是否符合标准的检验，即全部项目检验，在生产方抽样检验、监督抽样检验和复检、仲裁检验时所选定项的检验。6.2.3 检验项目检验项目和检验周期见表1。表1检验项目、周期检验类型检验项目要求中章、条试验方法中章、条常规检验外观、精子活力4.2.1、4.2.36.1 外观、精子活力、剂型式检验量、直线前进运动精4.2.1-4.2.5 6.1 子数
8、、精子畸形率7 判定规则7. 1 常规检验样品中任何一项目检验未达到本标准中要求规定的，则判为不合格。7.2 型式检验样品中任何一项目检验未达到本标准中要求规定的，则判为不合格。7.3 抽样检验对群体质量水平的评定7.3. 1 生产方检验引用GB/T2828.1，Ac为接收数，Re为拒收数，d为不合格品数。检验周期每生产批入库、出库生产方为保证质量每两周为一抽检周期，在周期内抽检一次该群种猪常温精液质量水平按照GB/T2828.2对样本进行检验，若样本中不合格品数dAc，则判可接收;样本中不合格品数d注Re，则判不可接收。7.3.2 监督检验按照GB/T2828. 11，样本中dr(不通过判定
9、数)，则判为可通过d二计，则判为不可通过。监督检验程序见附录B。8 标志、包装、贮存和运输8. 1 标志标明产品名称、剂量、生产单位、生产日期、批号、品种或类型、耳号、有效期和贮存温度。8.2 包装采用袋装、瓶装或管装，包装用袋、瓶或管应选用对精子元毒害作用且灭菌的一次性塑料制品。8.3 贮存8.3. 1 置于16C-18 C恒温箱内保存。8.3.2 每天摇动2次-4次。8.4 运输8.4. 1 置于16C-18 C的运输箱内运输。8.4.2 运输过程中避免强烈震动和碰撞。3 GB 23238-2009 附录A(规范性附录)种猪常温精液质量检验方法A.1 抽样A. 1. 1 抽样A. 1. 1
10、. 1 生产方抽样按5.1.1确定样本数。A. 1. 1.2 监督抽样按5.1.2确定样本数。A. 1. 1.3 抽样方法按种猪号(或批次号顺序排列，由抽样人员现场按样本头数随机确定各样品种猪号。A. 1. 1.4 全部取样对已采精投产的种猪取样。A. 1.2 取样方法对确定取样的种猪，从其贮藏容器中随机抽取两个剂量的精液。A. 1.3 样晶收集抽样:从受检单位精液贮藏容器中按规定随机抽取样品。送样:生产、使用单位将抽取的样品送至检验机构。A. 1.4 样晶贮存、运输样品贮存、运输应符合8.3、8.4的规定。A.2 剂量检查A. 2.1 主要器材量筒。A.2.2 检查方法取两个剂量全部倒入量筒
11、内，准确检测其精液量。A.2.3 计算两个剂量平均数为样品的剂量，按式(A.l)计算。式中zQ一一剂量值，单位为毫升(mL);nl一一第一样品剂量，单位为毫升(mL);n2一一第二样品剂量，单位为毫升(mL)。A.3 精子活力检查A. 3.1 主要仪器和器材Q= n十n2一一2 显微镜、恒温水搭锅、试管、载玻片、盖玻片、恒温装置、滴管等。A.3.2 检查方法.( A.l ) 取两个剂量的常温精液轻轻摇动均匀，分别用滴管取精液约25L置于载玻片上并加盖玻片，在4 GB 23238-2009 37.C条件下，用显微镜(200倍.400倍)观察精子活力。每样片观察3个视野，并观察不同液层内的精子运动
12、状态，进行全面评定。A.3.3 计算三个视野活力评价值的平均数按式(A.2)计算。式中zM一一活力.%;nl一一第一视野活力.%;n2一一第二视野活力.%;n3一-第三视野活力，%。A.4 每剂量中亘钱前进运动的精子数A. 4.1 主要器材M=!.1 +n2 +叫3 .( A.2 ) 血球计数板、血盖片、血色素管、刻度吸管、小试管、计数器、显微镜、滴管、3.0%氯化铀溶液。A.4.2 检查方法用血色素管准确吸取50L样品，使用3.0%氯化铀榕液0.95mL与其混匀。将备好的血球计数板用血盖片将计数室盖好，用小吸管吸取，滴一滴于血盖片边缘，使精液自行流入计数室，均匀充满，不允许有气泡或厚度过大，
13、然后在显微镜下观察计数。A.4.3 计算a) 每剂量中精子数=5个中方格中的精子数X5(即25个中方格的总精子数)X 1O( 1 mm3内的精子数)X 1 OOO(每毫升精液的精子数)X20(精液稀释倍数)X剂量值上式可简化为:每剂量中精子数=5个中方格精子数XIOO万剂量值b) 每样品观察上下两个计数室，取平均值，如两个计数室计数结果误差超过5%.则应重检。c) 每剂量中直线前进运动的精子数按式(A.3)计算。c=sXm .( A.3 ) 式中zc 每剂量中直线前进运动精子数，单位为个;s一一每剂量中精子数，单位为个zm 活力，%。A.5 精子畸形率的检查采用姬姆萨染色检测法。A. 5.1
14、主要器材和材料显微镜、载玻片、小吸管、蒸馆水、姬姆萨染料、磷酸二氢铀、磷酸氢二铀、甲醒、甲醇、甘油等，所用试剂为AR级。A.5.2 试荆配制a) 磷酸盐缓冲液磷酸二氢饷(NaH2P04 2H20) 磷酸氢二锅(Na2HP04.12H20) 蒸馆水定容至100mL。b) 中性福尔马林固定液0.55 g 2.25 g 5 GB 23238-2009 40%甲醒HCHO(使用前经碳酸镜中和过滤)8.0mL 磷酸二氢铀(NaH2P04 2H20) 0.55 g 磷酸氢二铀(Na2HP04 12H20) 2.25 g 用0.89%氯化铀约50.0mL溶解后加人8.0mL中和后的甲醒，再加0.89%氯化铀
15、榕液定容至100.0mL。c) 姬姆萨原液姬姆萨染料1. 0g 甘油CSH5(OH)sJ66.0 mL 甲醇(CHsOH)66.0 mL 姬姆萨染料放人研钵中加少量甘油充分研磨至元颗粒为止，然后将甘油全部倒人并放人恒温箱中保温继续溶解4h，再加甲醇充分榕解混匀，过滤后贮于棕色瓶中待用，贮存时间越久染色效果越好。d) 姬姆萨染液姬姆萨原液2.0 mL 磷酸盐缓冲破3.0 mL 蒸馆水5.0 mL 现配现用。A.5.3 制片染色、镜检、计算6 允许同时使用精子活力检查的样品。a) 抹片:取精液一滴于载玻片一端，用另一边缘光滑的载玻片与有样品的载玻片呈35。夹角，将样品均匀地涂布于载玻片上，自然风干
16、(约5min) ，每样品制作两个抹片。b) 固定:在巳风干的抹片上滴1.0 mL-2. 0 mL中性福尔马林固定液，固定15min后用水冲去固定液，吹干或自然风干。c) 染色:将固定好后的抹片反扣在带有平槽的有机玻璃面上，把姬姆萨染液滴于槽和抹片之间，让其充满平槽并使抹片接触染液，染色1.5h后用水冲去染液，晾干待检。d) 镜检:将制备好的抹片在显微镜(400倍-600倍)下观察，每个抹片观察200个以上的精子(分左、右两个区)，取两片的平均值，两片畸形率的差值不大于6，可认为符合要求，若超过应重新制片检查。的精子畸形率按式(A.4)计算。式中zA一一畸形率，%;A1一一畸形精子数，单位为个p
17、S一一精子总数，单位为个。A=会叫.( A.4 ) 附录B(规范性附录)种猪常温精液监督检验程序B.l 监督总体是生产单位的种猪常温精液产品。B.2 不合格晶的分类按照GB/T2828. 11的规定，对不合格品不区分类别。B.3 规定监督质量水平按7.3.2确定监督质量水平Do=10。B.4 规定监督检验等级选定第二检验等级。B.5 检索监督抽样方案GB 23238-2009 按照GB/T2828. 11的规定，通过监督总体量N和规定的监督质量水平Do.检索抽样方案。B.6 抽取样本根据种猪样本量按5.2.1和5.2.2抽取种猪常温精液样品。B.7 检验样本按照4.2. 14. 2.5的项目和
18、6.1规定的检验方法及7.3.2规定的样品合格与否判别准则，逐一检验样本中的每一个样品，并统计被检样本中的不合格品数。B.8 监督总体的判断样本中不合格品数d不小于不通过判定数r.即d二三r.则判该监督总体为不可通过;样本中不合格品数d小于不通过判定数r.即dr.则判该监督总体为可通过。B.9 监督抽样方案的通过概率与检验功效按照GB/T2828. 11的规定执行。goN|的NmN阁。国华人民共和国家标准种猪常温精液GB 23238-2009 中中国标准出版社出版发行北京复兴门外三里河北街16号邮政编码:100045 网址电话:6852394668517548 中国标准出版社秦皇岛印刷厂印刷各地新华书店经销关印张O.75 字数15千字2009年4月第一次印刷开本880X12301/16 2009年4月第一版9峰书号:155066 1-36544 如有印装差错由本社发行中心调换版权专有侵权必究举报电话:(010)68533533GB 23238-2009
