1、ICS 65. 160 X 87 gB 中华人民共和国国家标准GB/T 13596-2004 代替GB/T13596 1992 烟草及烟草制品有机氯农药残留量的测定气相色谱法Tobacco and tobacco products-一Determination of organochlorine pesticide residues一Gas chromatographic method (ISO 4389: 2000 , MOD) 2004-12-14发布中华人民共和国国家质量监督检验检瘦总局中国国家标准化管理委员会2005-03-01实施发布GB/T , 3596-2004 前言本标准修改采
2、用国际标准ISO4389: 2000(烟草及烟草制品有机氯杀虫剂残留量的测定气相色谱法。本标准与ISO4389: 2000相比做了下列编辑性修改:一一一删除ISO4389: 2000的前言;一F增加了烟草萃取装置的规格。本标准与GB/T13596-1992(烟叶中有机氯杀虫剂残留量的测定方法相比主要变化如下:一一删除GB/T13596-1992的主题内容与适用范围(1992年版的第1章)j 一增加了范围;删除GB/T13596-一1992的取样(1992年版的第2章)j 增加了规范性引用文件(见本版的第2章h一删除GB/T13596-1992的测定(1992年版的第3章)j 一-增加了原理;增
3、加了试剂与材料;增加了仪器气一增加了采样及试样制备;十一增加了操作步骤;增加了结果的表述;一一一增加了重复性、再现性和回收率;一一修改了GB/T13596一-1992的测试报告(1992年版的第4章;本版的第10章)j 一二增加了附录A色谱图示例;增加了附录B实验室间试验研究结果;一一增加了参考文献。本标准的附录A、附录B是资料性附录。本标准由国家烟草专卖局提出。本标准由全国烟草标准化技术委员会(TC144)归口。本标准起草单位:国家烟草质量监督检验中心。本标准主要起草人:徐壳、唐纲岭、张戚、廖晓玲、宗维勇、刘惠民。本标准所代替标准的历次版本发布情况为:GB/T 1:)596 19920 1
4、范围烟草及烟草制品有机氯农药残留量的测定气相色谱法本标准规走了烟草及烟草制品中有机氯农药残留量的气相色谱测定方法。GB/T 13596-2004 本标准适用于表1中有机氯农药残留量的测定。应在表l中列出的检测限以内测定各农药的残留量。注1:对于不同类型的烟叶，本方法不会因非有机氯农药物质产生的干扰色谱峰而对测定结果造成误差。但这并不是说本方法适用于所有种类、形态的烟草及烟草制品。因此，对未知原因造成的明显偏高的测定结果要加以仔细研究。有分析人员建议在这种情况下使用质谱检测器确证色谱图中物质的化学结构。注2:ISO 1750中有表1列出的有机氯农药的俗名相对应的化学名和结构式。表1适合于本标准检
5、测的杀虫剂及其检测限物质名称(英文)通用名称GB4839一1998)检测限!陪他)Aldrin 立氏剂0.02 Trans-chlordane 反式氯丹0.02 户，户-DDE户，户滴滴伊0.02 。，户-DDT。，户滴滴涕0.04 p，户-DDT，户滴滴涕0.06 Dieldrin 狄氏剂0.02 -Endosulfan -硫丹0.03 HCB 六氯苯0.02 -HCH或-BHC甲体-六六六0.02 -HCH或-BHC乙体六六六0.02 y-HCH或y-BHC丙体-六六六0.01 在HCH或-BHC丁体六六六0.02 Heptachlor 七氯0.02 Heptachlor epoxide
6、环氧七氯0.02 。，户-TDEor o,p-DDD 。，户滴滴滴0.03 户，户-TDEor户，-DDD户，户滴滴滴0.02 。，p-DDE。，户一滴滴伊0.03 2 规范性引用文件下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。GB/T 5606.1卷烟第1部分:抽样GB/T 19616 烟草成批原料取样的一般原则(GB/T19616Z004，ISO 4874:Z000 , MOD) G
7、B/T 13596-2004 ISO 648 实验室用玻璃器皿一一单标线吸量管ISO 1042实验室用玻璃器皿单标线容量瓶ISO 3696 分析实验室用水一一规格及检验方法3 原理粉碎后的干燥样品与弗罗里硅土泪合，于索氏提取器中用正己皖萃取农药残留。无需进一步的净化处理，直接使用配有电子捕获检测器的气相色谱仪测定农药残留含量。4 试剂与材料水应为蒸锢水或同等纯度的水，方法测定硫4.4 内标储备液:莉度。使用灭蚁灵作农药标准品浓度约为5g/mL4. 6. 3 混合储备液B移取棍合储备液A(4.6. 2)1 mL于浓度约为O.5g/mL的?昆合储备液B。4. 6. 4 工作标准液。所有试剂应适用于
8、农药残留量。度，得到灭蚁(4. 1)稀释定容，得到各农药标准品各移取棍合储备液A(4.6. 2)和内标工作液(4.5)lmL于100mL容量瓶中，用正己皖(4.1)稀释定容，得到各农药标准品及内标版度约为O.05g/mL的工作标准液。4. 7 弗罗里硅土，150m250m(60目80目)。4.7. 1 弗罗里硅土的质量是实现本方法的关键因素之一。弗罗里硅土应有充分的活性以保留萃取液中的杂质，同时能够使农药残留洗脱。弗罗里硅土应首先按4.7.2预处理。只有通过4.7.3验证的弗罗里硅土才可使用。4. 7.2 将供验证的弗罗里硅土置于石英增塌内，在马弗炉中5500C灼烧至少5h，在无干燥剂的干燥器
9、2 GB/T 13596-2004 中冷却后，转入圆底烧瓶，每100g加5mL水，在旋转烧瓶中充分混合约1h。进行4.7.3的验证之前，应将弗罗里硅土置于密闭玻璃容器中平衡至少48h。4.7.3 通过萃取狄氏剂的正己炕溶液检查弗罗里硅土的活性。该溶液中狄氏剂浓度与含1g/g狄氏剂的烟草或烟草制品的萃取液浓度相当。若狄氏剂的回收率在95%以上，说明预处理后弗罗里硅土的活性是合适的。每次制备弗罗里硅土均应进行活性检查。5 仪器移液管应达到ISO1042和ISO648中常用实验仪皿及下述各项:5. 1 旋转蒸发仪。5.2 粉碎机，配2mm(lO 5.3 烘箱，鼓风式。5.4 马弗炉。5.5 电热套。
10、5.6 l一一试料与弗罗里硅土的混合物;2一一弗罗里硅土;3-1号玻璃滤片。密封油脂，否则会给溶剂引人杂质。容量瓶和24号磨口圄1烟草萃取装置3 GB/T 13596-2004 5. 7 回流冷凝管。5.8 干燥器。5.9 石英增塌。5. 10 气相色谱仪按照制造商操作手册运行气相色谱仪。进样口、柱箱和检测器应分别配有独立的加热单元。以下条件适合于某一型号的仪器，供参考。采用其他条件应预先验证其适合性。a) 温度进样口温度应为1800C210oC ，检测器温度应为2900C340oC。采用其他任何条件应保证所有检测组分能很好的分离，且色谱图与示例(参见图A.1)相似。合适的条件如下:一一初始温
11、度:40oC;初始时间:2min; 程序升温1:以20oC/min速率由400C升至150oC;一一一程序升温2.以30C/min速率由1500C升至270oC;一一顶温时间:在2700C保持15min; 一一一总运行时间:62.5min。b) 气流速率根据仪器操作手册及分析人员的经验设定气流速率，合适的气流速率如下:一一一载气:氮气，4mL/min; 一一尾吹气:氮气，30mL/min; 隔垫吹扫:5mL/min; 一一一分流流量:30mL/mino c) 进样模式进样量2L，不分流进样，进样后分流阀关闭1min。5. 10. 1 进样方式自动进样器或其他合适的进样装置。对于于动进样，推荐使
12、用进样体积在1L5L之间的微量注射器。进样前，用正己烧洗针至少10次，用待测掖洗针五次，进样后，用正己皖洗针五次。5.10.2 色谱柱推荐使用熔融石英毛细管柱，长30m，内径0.32mm，固定相DB-5(5 %甲基苯基硅氧皖)，膜厚0.25m。色谱柱应能使所有被测组分达到很好的分离度，如示例色谱图所示(参见图A.1)。5. 10.3 检测器使用电子捕获检测器，灵敏度应达到能够检出进样量2L，浓度0.0015g/mL的户，户-DDT(峰高两倍于基线噪音)。6 采样及试样制备6. 1 采样烟叶抽样依据GB/T19616，卷烟抽样依据GB/T5606. 1。注意确保抽取的样品应能代表被检产品。6.2
13、 试样制备烟叶(或烟丝)放入烘箱，50oC下保持2h，烘后水分应为5%左右。研磨样品，过2mm筛网(5.2)，注意研磨温度不应超过500C。若接收的样品己研磨，应确保其水分含量不超过10%。试样应在密闭容器中避光保存，如果测试前需存放一个月以上，应放入冰箱内于一80C以下保存。4 7 操作步骤7. 1 试料GB/T 13596-2004 称取5g试料于50mL烧杯中，精确至0.01g，加入5g处理后的弗罗里硅土(4.7) ，充分泪合。然后按7.2和7.3所述步骤操作。7.2 萃取向索氏提取器中加入5g处理后的弗罗里硅土(4.7)，转移按7.1准备好的试料到弗罗里硅土上，注意不要混合，以形成彼此
14、独立的两层。对于回收率验证试验，在此步骤用移液管移取适量的农药标准榕液，加在试料层顶部。移取60mL正己皖(4.1)和1mL内标工作液(4.5)到合适的圆底烧瓶(容积150mL250 mL)。安装索氏提取器，确保每一连接处密封良好，打开电热套(5.5)加热。调节加热温度和索氏提取器上的旋塞使回流速度至少达到200mL/ho调节旋塞使正己烧液面恒定保持在试料以上，并保持圆底烧瓶中榕剂不被蒸干，萃取时间4.5h。萃取结束后，冷却至少30mino用萃取液进行气相色谱分析，无需定容。7.3 检测器线性度的检查分别移取10mL、5mL、1mL t昆合储备液A(4.6. 2)于三个100mL容量瓶中，每个
15、容量瓶移入1 mL内标工作液(4.5)，用正己烧定容(4.1)。取100mL和200mL容量瓶各一只，分别移入1mL混合储备液B(4.6. 3) , 100 mL容量瓶加入1mL内标工作液(4.5)，200mL容量瓶加入2mL内标工作液(4.日，用正己烧定容。各榕液农药浓度分别约为O.5g/mL、O.25g/mL、O.05g/mL、0.005 flg/mL、0.0025g/mL。这一系列溶液用于检查电子捕获检测器的响应是否呈线性。检查只需在初次使用检测器或检测器及其相关电路维护之后进行。7.4 标准曲线如果检测器的响应呈线性，可以采用单一水平标准曲线。单一水平标准曲线应使用工作标准液(4.6.
16、4)。7.5 气相色谱测定打开气相色谱仪(5.10)，平衡系统。用工作标准液(4.6.4)进样三次检查结果的重复性，单个结果的偏差不应超过平均值的士5%。每个样品进样两次，由标准曲线得出单个测定值，计算平均值。工作标准液和样品萃取液的示例色谱图参见图A.1和图A.2所示。8 结果的表述内标法计算农药含量。每个农药的相应响应系数Ep由式(1)计算:式中:f;主pst.全Lp Ap刑CislA阳工作标准液(4.6.4)农药的峰面积或峰高;Aist 工作标准液内标(灭蚁灵)的峰面积或峰高;C川一-工作标准液农药的浓度，单位为微克每毫升Cr.tg/mU;Cist 工作标准液内标的浓度，单位为微克每毫升
17、(g/mL)。以干基计的农药残留量风，以微克每克表示，由式(2)计算:R = A p E p Q川.100 P A;. m (1 00 - w) ( 1 ) ( 2 ) 5 GB/T 13596-2004 式中:Ap -样品萃取液(7.2)农药的峰面积或峰高;A 样品萃取液内标的峰面积或峰高;Qist 萃取剂内标的质量，单位为微克(g)(约5g); m一一试料质量，单位为克(g); w一一样品的水分百分含量，%(质量分数)。9 重复性、再现性和回收率10 测试报告测试报告应包含采用的告还应包含本方法未规定报告应包含样品的6 GB/T 13596-2004 附录(资料性附录)色谱圈示例A 40
18、t / min 140 000 120 000 100 000 80 000 60 000 40 000 20 000 gc200dNE7 图A.1甲的一.町的白白的.N。性的.咀时GB/T 13596-2004 140 000 60 000 40 000 120 000 100 000 80 000 20 000 SE刀OUduE40 t / min 30 20 无农药残留烟草样晶的色i曹圈10 固A.28 GB/T 13596-2004 附录B(资料性附录)实验室间试验研究结果一项由12个实验室参加，用四个农药添加水平样品(Fj，F2、F3、F4)进行的共同试验研究得出了表B.l所列出的平
19、均回收率(Rec.)、重复性标准偏差(5，)和重现性标准偏差(5R)。表B.l共同试验研究结果F , F, F、1F4 时/Recr卜一-检测限/农药名称添加量/I Rec. / 添加量/I Rec. / 添加量/I Rec. / (g/g) S,ISR Sk S, ISR S, ISR (g/g) I (%) (g/g) I (% (g/g) 1 (%) ( lg/ g) 1 (%) 甲体-六六六0.0995 79 12 27 0.4975 102 14 18 O. 9950 105 8 13 4.9750 95 11 18 0.02 乙体-六六六0.1000 89 17 25 0.5000
20、 99 10 15 1.0000 100 6 111 5.0000 86 5 14 0.02 丙体-六六六O. 1005 100 26 34 0.5025 101 15 16 1. 0050 109 9 119 5.0250 100 7 29 0.01 丁体六六六O. 1020 62 13 27 0.5100 88 7 118 1.0200 96 9 115 5. 1000 90 12 22 0.02 六氯苯O. 1000 109 9 119 0.5000 105 16 18 1. 0000 105 8 113 5.0000 88 8 16 0.02 七氯0.1020 100 13 19 0.
21、5100 105 13 15 1. 0200 107 12 16 5.1000 101 13 25 0.02 艾氏剂0.1000 83 13 24 0.5000 100 14 14 1. 0000 107 8 14 5.0000 103 7 25 0.02 环氧七氯0.1025 84 15 29 0.5125 89 16 19 1. 0250 97 16 18 5.1250 91 11 24 0.02 反式氯丹0.0995 86 8 123 O. 4975 96 6 114 O. 9950 102 4 110 4.9750 99 6 18 0.02 。，-滴滴伊O. 1010 105 12 2
22、5 0.5050 106 9111 1. 0100 110 4 7 5.0500 101 8 19 0.03 -硫丹0.1010 73 14 36 O. 5050 81 9 115 1. 0100 83 10 18 5.0500 77 10 23 0.03 狄氏剂0.1015 84 15 34 O. 5075 87 23 27 1. 0150 93 13 22 5.0750 95 14 31 0.02 户，-滴滴伊O. 1000 104 10 21 0.5000 115 6 117 1.0000 120 4 15 5.0000 112 6 21 0.02 异狄氏剂0.0995 53 12 35
23、 0.4975 59 30 31 O. 9950 58 19 41 4.9750 78 26 43 0.03 硫丹O. 1000 12 17 24 O. 5000 12 19 21 1.0000 14 15 21 5.0000 12 9 22 0.02 。，户._滴滴滴O. 1005 111 9 120 0.5025 109 6 10 1.0050 114 5 110 5.0250 100 9 12 0.03 p，户(_滴滴滴O. 1010 117 14 29 O. 5050 113 8 20 1. 0100 116 6 119 5.0500 119 13 25 0.02 。，二滴滴涕O. 1
24、015 106 11 27 O. 5075 109 10 18 1. 0150 109 7 114 5.0750 102 8 10 0.04 户，户滴滴涕O. 1005 104 13 24 O. 5025 111 8 21 1. 0050 117 5 22 5.0250 116 11 21 0.06 每个实验室对每个添加水平的样品进行了两次测定，因此在每个添加水平上每种农药共有48个测定结果。详细的统计评价报告见参考文献3J。除表B.2所列17种农药外，对异狄氏剂和卢硫丹也进行了共同试验研究，参考文献3J的结论指出这两种农药不适于采用本方法分析。9 GB/T 13596-2004 农药表B.2
25、依据IUPAC(国际理论和应用化学联合会)规则命名表依据IUPAC规则命名甲体-六六六11，3.5/2.4.6六氯环己皖乙体-六六六11，2.4.川6六氯环己烧丙体-六六六(林丹)11，2.3.4.5.时氯环己烧丁体，六六六1 1. 2 3 / 4 5 6-六氯环己皖六氯苯|六氯苯七氯11，4.5.6.7.8.8七氯川.7旦旦-4.7-亚甲翩艾氏剂环氧七氯反式氯丹。.ji-滴滴伊硫丹I 狄氏剂.7.8.8八氢6.7环氧户，户.-滴10 参考文献lJ ISO 1750: 1981 ,Pesticides and other agrochemicals-Common names 2J The Pe
26、sticide Manual,9th Edition, British Crop Protection Council 3J Document 94/3a of COREST A subgroup on pesticide res凶G/T 13596-2004 statistical evaluation of joint experiment on organochlorine陀巳pe臼s引叫ticideresidues in tobacco using method 93/14 叮CON-的户同因。华人民共和国家标准烟草及烟草制品有机氯农药残留量的测定气相色谱法CB/T 13596 .2004 国中非中国标准出版社出版发行北京复兴门外三里河北衔16号邮政编码:100045网址电话:6852394668517548 中国标准出版社秦皇岛印刷厂印刷各地新华书店经销9暗印张l字数23千字2005年3月第一次印刷开本880X1230 1/16 2005年3月第一版7c 如有印装差错由本社发行中心调换版权专有侵权必究举报电话:(010)68533533定价12.00争奇书号:155066. 1-22350 GB/T 13596-2004
