1、ICS 67250C 53 圆雪中华人民共和国国家标准GBT 232962 12009食品接触材料 tj同 分子材料食品模拟物中顺丁烯二酸及顺丁烯二酸酐的测定 高效液相色谱法Food contact materialsPolymerDetermination of maleic acid and maleic anhydride in food simulants-High performance liquid chromatography2009-03-3 1发布 2009090 1实施宰瞀鳃鬻瓣訾糌赞星发布中国国家标准化管理委员会仅19刖 吾GBT 232962I一2009本标准参照欧盟技
2、术规范CENTS 1313024：200599。42 2-甲基顺丁烯二酸(c；H。O。，CAS号：498237)：纯度99。43乙腈：色谱纯。44冰乙酸。45无水乙醇。46精制橄榄油。47十六烷基三甲基溴化铵：色谱纯。48碳酸氢钠。49磷酸氢二钾。410磷酸二氢钾。411 85(体积分数)磷酸：取85 mL磷酸和16 mL水，混匀。412氢氧化钠溶液(2 toolL)：称取8 g(精确至01 g)氢氧化钠溶解至100 mL水中。413 3(质量浓度)乙酸溶液：称取30 g(精确到01 g)冰乙酸(44)于1 L容量瓶中，用水定容。1GBT 23296212009414 10(体积分数)乙醇溶液
3、：量取100 mL无水乙醇(45)于1 L容量瓶中，用水定容。415 1(质量浓度)碳酸氢钠溶液：称取10 g(精确到01 g)碳酸氢钠溶于100 mL水中。416磷酸缓冲溶液：称取11412 g磷酸氢二钾(49)和6805 g磷酸二氢钾(410)，加入400 mL水溶解并转移到500 mL容量瓶中，用磷酸(411)或氢氧化钠溶液(412)调节溶液pH=70，加水定容。417十六烷基三甲基溴化铵磷酸缓冲溶液：称取180 g十六烷基三甲基溴化铵(47)于200 mL烧杯中，加入100 mL水溶解，转移至1 L容量瓶中，加入200 mL磷酸缓冲溶液(416)，再加水接近刻度线，可加入适量磷酸(41
4、1)调节溶液pH至66，加水定容。418顺丁烯二酸储备液(7 500 rag1,)：称取顺丁烯二酸075 g(精确到0001 g)，使用乙醇溶解并转移至100 mL容量瓶中，加入乙腈定容。一20下保存，有效期为2个月。419 2-甲基顺丁烯二酸储备液(7 500 mgL)：称取2一甲基顺丁烯二酸075 g(精确到0001 g)，使用乙醇溶解并转移至100 mL容量瓶中，加入乙醇定容。-20下保存，有效期为2个月。420顺丁烯二酸标准溶液：吸取0 mL、05 mL、10 mL、20 mL、50 mL、100 mL顺丁烯二酸储备液(4t8)于6个50mL容量瓶中，加入50mLfi-甲基顺丁烯二酸储
5、备液(419)，用乙醇定容，顺丁烯二酸浓度分别为000 mgL、750 mgL、150 mgL、300 mgL,750 mgL、1 500 mgL，内标2一甲基顺丁烯二酸浓度为750 mgL。4下保存，有效期为1个月。5仪器和设备51高效液相色谱仪：配置紫外检测器。52振荡器。53分析天平：感量0000 1 g、001 g。54 pH计。55固相萃取小柱：C邛，500 mg。6试液的制备61标准工作溶液的制备611水基食品模拟物标准工作溶液吸取10 mL顺丁烯二酸标准溶液(420)于30 mL烧瓶中，加入25 mL食品模拟物水，混匀，使得食品模拟物水中顺丁烯二酸浓度分别为000 mgL、30
6、mgL、60 mgL、120 mgL、300 mgL、600 mgL，内标2一甲基顺丁烯二酸浓度为300 mgL。采用同样方式，分别用3(质量浓度)乙酸溶液(413)和10(体积分数)乙醇溶液(414)配制同样浓度系列的顺丁烯二酸标准工作溶液。612橄榄油标准工作溶液称取25 g橄榄油(精确到01 g)于6个分液漏斗中，加入10 mL顺丁烯二酸标准溶液(420)，混匀，使得橄榄油中顺丁烯二酸浓度分别为000 mgkg、300 mgkg、600mgkg、120 mgkg、300 mgkg、600 mgkg，内标2一甲基顺丁烯二酸浓度为300 mgkg，加入25 mL碳酸氢钠溶液(415)，振荡5
7、 rain，静置分层，移取下层水溶液，用C。固相萃取小柱过滤，取1 mL滤出液经045 pm滤膜过滤于进样瓶中，待上机测定。62食品模拟物试液的制备621 总则食品模拟物试液应按照GBT 2329612009的要求从迁移试验中获取，在4冰箱中避光保存。622水基食品模拟物准确量取迁移试验中得到的水基食品模拟物25 mL于锥形瓶中，加入l mL不含顺丁烯二酸的标准工作溶液(420)，混匀，取1 mL经045 pm滤膜过滤于进样瓶中，待上机测定。平行制样两份。2GBT 23296212009623橄榄油准确称取迁移试验中得到的橄榄油模拟物25 g(精确到01 g)于分液漏斗中，加入1 mL不含顺丁
8、烯二酸的标准工作溶液(420)，混匀，加入25 mL碳酸氢钠溶液(415)，振荡5 min，静置分层，移取下层水溶液，用c，。固相萃取小柱过滤，取1mL滤出液经045 pm滤膜过滤于进样瓶中，待上机测定。平行制样两份。63空白试液的制备按照62的操作处理未与食品接触材料接触的食品模拟物。7测定71液相色谱条件a)色谱柱：C，s柱，柱长150mm，内径46mm，粒径5 pm或性能类似的分析柱；b)流动相：乙腈一十六烷基三甲基溴化铵磷酸缓冲溶液(20+80)；c)流速：l mLmin；d)检测波长：220 121TI；e)柱温：30；f)进样量：10 pL。72绘制标准工作曲线按照71所列测定条件
9、，对标准工作溶液(61)进行检测。以食品模拟物标准工作溶液中顺丁烯二酸浓度为横坐标，以顺丁烯二酸和内标物2一甲基顺丁烯二酸峰面积比值为纵坐标，绘制标准工作曲线，得到线性方程。标准溶液色谱图参见附录A。按式(1)计算回归参数：yax+b (1)式中：y食品模拟物标准工作溶液中顺丁烯二酸和内标物2一甲基顺丁烯二酸峰面积比值；n回归曲线的斜率；z食品模拟物标准工作溶液中顺丁烯二酸浓度，单位为毫克每升或毫克每千克(mgL或mgkg)；6回归曲线的截距。73试液测定对空白试液(63)和食品模拟物试液(62)依次进样，扣除空白值，得到顺丁烯二酸和内标物2一甲基顺丁烯二酸色谱峰峰面积。8结果计算81 食品模
10、拟物试液中顺丁烯二酸浓度的计算食物模拟物试液中顺丁烯二酸的浓度c按式(2)计算。，型a式中：c食品模拟物试液中顺丁烯二酸的浓度，单位为毫克每升或毫克每千克(mgL或mgkg)；y食品模拟物试液中顺丁烯二酸和内标物2一甲基顺丁烯二酸峰面积比值；6回归曲线的截距；n回归曲线的斜率。82顺丁烯二酸和顺丁烯二酸酐特定迁移量的转化计算由81得到的食品模拟物试液中顺丁烯二酸浓度，根据迁移试验中所使用的食品模拟物的体积和3GBT 23296212009测试试样与食品模拟物接触面积，通过数学换算计算出顺丁烯二酸的特定迁移量，顺丁烯二酸酐特定迁移量以顺丁烯二酸计，单位以“mgkg或ragdin2”表示。详见GB
11、T 232961 2009的第13章。计算结果以平行测定值的算术平均值表示，保留三位有效数字。9重复性在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的10。附录A(资料性附录)食品模拟物中顺丁烯二酸标准溶液色谱图GBT 232962 120091顺丁烯二酸；2一2一甲基顺丁烯二酸(内标)。4图A1 水中顺丁烯二酸(300 mgL)标准色谱图1顺丁烯二酸；22一甲基顺丁烯二酸(内标)圉A2 3(质量浓度)乙酸溶液中顺丁烯二酸(300 mgL)标准色谱图5一m。亏莹圳川姗瑚瑚。瑚GBT 232962120096l顺丁烯二酸；22甲基顺丁烯二酸(内标)。6 8 10一十0 21顺丁烯二酸；22一甲基顺丁烯二酸(内标)。6 8 10图A4橄榄油中顺丁烯二酸(300 mgkg)标准色谱图删瑚m。气；
