1、ICS 67250C 53 a目中华人民共和国国家标准GBT 2329672009食品接触材料塑料中表氯醇含量的测定高效液相色谱法Food contact materials-Determination of epichlorohydrin in plastics-High performance liquid chromatography2009-03-3 1发布 20090901实施宰瞀髁鬻瓣警糌赞星发布中国国家标准化管理委员会仪1”前 言GBT 2329672009本标准参照欧盟技术规范CENTS 13130-20：2005(食品接触材料及其制品 塑料中受限物质第20部分：塑料中表氯醇的
2、测定(英文版)制定。本标准的附录A为规范性附录，附录B为资料性附录。本标准由国家认证认可监督管理委员会提出。本标准由全国进出口食品安全检测标准化技术委员会(SACTC 445)归口。本标准起草单位：中华人民共和国湖北出入境检验检疫局、中国检验检疫科学研究院、中华人民共和国广西出入境检验检疫局、中华人民共和国宁夏出入境检验检疫局。本标准主要起草人：崔海容、叶诚、凌约涛、陈志锋、马昕、孙普兵、吕春秋、林雁飞、赵晓亚、郭坚、杨顺风、胡德聪、徐新生。食品接触材料塑料中表氯醇含量的测定高效液相色谱法GBT 23296720091范围本标准规定了与食品接触的塑料或涂层中残留表氯醇含量的高效液相色谱测定方法
3、。本标准适用于与食品接触的塑料或涂层中表氯醇含量的测定。本标准塑料中表氯醇的测定低限为1 mgkg，涂层中表氯醇的测定低限为1 pgdm2。2规范性引用文件下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。GBT 6682分析实验室用水规格和试验方法(GBT 6682-2008，ISO 3696：1987，MOD)GBT 232961食品接触材料塑料中受限物质塑料中物质向食品及食品模拟物特定迁
4、移试验和含量测定方法以及食品模拟物暴露条件选择的指南3原理试样中表氯醇经1，4-二氧六环提取后，提取液用微蒸馏装置进行蒸馏，馏出液中的表氯醇经衍生后，其衍生物通过液相色谱分离，用荧光检测器测定表氯醇衍生物的含量，换算得出试样中表氯醇的含量。采用外标法定量。4试剂和材料除另有规定外，水为GBT 6682规定的一级水，试剂均为分析纯。41表氯醇标准品：纯度大于99。42乙腈：色谱纯。43 9，10一二甲氧基蒽一2一磺酸钠(cAs号：67580 396)，即DAsNa。44 1，4一二氧六环：纯度大于99，含水量应小于001。45正己烷。46异丙醇。47甲醇：色谱纯。48强酸型阳离子交换树脂。49
5、80(体积分数)甲醇溶液：量取400 mL甲醇(47)于500 mL容量瓶中，用水定容。410 9，10一二甲氧基蒽一2一磺酸(DAS)试剂：用200 mL甲醇溶液(49)活化约50 g已预先处理好的强酸型阳离子交换树脂(48)，然后用树脂填充内径为1 cm的玻璃柱，直至树脂高度约20 cm，备用。称取100mg的DAS-Na(43)于预先盛有20mL甲醇溶液(49)的烧杯中，加热溶解，将溶液全部过强酸型阳离子交换树脂。用甲醇溶液(49)洗脱，收集pH为12时的洗脱液，直至pH开始上升。将所得洗脱液用氮气吹干仪(53)吹干，制得DAS试剂。应避光保存，有效期为一年。411 DAS的乙腈溶液(5
6、 mgmL)：称取20 mg(精确至01 mg)DAS试剂(410)溶解于40 mL乙腈1GBT 2329672009中。应现配现用，避光保存。412表氯醇标准储备液(1 mgmL)：称取100 mg(精确至01 mg)表氯醇(41)于100 mL的容量瓶中，用1，4一二氧六环(44)定容。溶液于-2020避光密封储存，有效期为3个月。413表氯醇标准使用液(40 1agmL)：准确移取20 mL的表氯醇标准储备液(412)至50 mL容量瓶中，用1，4一二氧六环定容。414表氯醇的标准中间溶液：分别移取00 mL、06 mL、10 mL、20 mL、30 mL、40 mL、50 mL的标准使
7、用液(413)于7个25 mL的容量瓶中，用1，4-二氧六环定容。标准中间溶液的浓度分别为00 1agmL、08 1agmL、16 1agmL、32 1agmL、48 1agmL、64,ugmL、80 1agmL。415氮气：纯度大于或等于999。416冰块。5仪器和设备51微蒸馏装置(如图A1所示)。52高效液相色谱仪：配有20 pL定量环和荧光检测器。53氮气吹干仪。54样品瓶：20 mL，配备铝盖和丁基橡胶隔垫或硅树脂橡胶隔垫，隔垫接触样品一面应涂有聚四氟乙烯。55移液器：50 pL、100 1aL。56分析天平：感量01 mg。57微孔滤膜：02,am。6试液的制备61试样制备试样应按
8、GBT 232951的要求制备。测试与食品接触的塑料样品时，将样品裁剪成若干个面积为2 dm2的小塑料片，任取其中两片作平行试样。将2 dm2的小塑料片切割成大小约为1 cril2的碎片，备用。62试祥溶液的制备621 塑料试样提取溶液的制备将备用待测的塑料试样(61)称量(精确至01 mg)后，浸入500mLl，4一二氧六环中，在室温下提取6 h。移取100 mL提取液于样品瓶(54)中，加入磁力搅拌棒，用隔垫和铝盖密封，并将样品瓶标记为瓶A，。平行制样两份。622涂层提取溶液的制备提取小型罐状容器涂层中表氯醇时，向容器内部装入500 mL 1，4一二氧六环浸提，用不含环氧化物的盖子密封后在
9、室温下滚动提取6 h。移取100 mL提取液于样品瓶(54)中，加入磁力搅拌棒，用隔垫和铝盖密封，并将样品瓶标记为瓶A。平行制样两份。对于提取容积较大的罐状容器涂层中表氯醇时，应根据罐状容器内壁的实际表面积来确定提取液1，4一二氧六环的用量。表面积与提取液体积的比例以25 dm250 mL为宜。注：如果塑料包装试样或容器涂层较厚，应该提高温度或者延长提取时间。整个提取过程应在密闭环境中进行以防止表氧醇逸出。63空白溶液的制备移取100 mL未与塑料试样或涂层接触的1，4-Z氧六环转入样品瓶(54)中，加入磁力搅拌棒，用隔垫和铝盖密封，并将样品瓶标记为瓶A。按65和66所述方法处理。2GBT 2
10、32967200964标准工作溶液的制备分别移取100mLl，4一二氧六环于7个样品瓶(54)中，再分别准确加入100 pL表氯醇标准中间溶液(414)，加入磁力搅拌棒，用隔垫和铝盖密封。并将样品瓶标记为瓶As。表氯醇标准工作溶液的浓度分别为：0 bcgL、8 bgL、16LgL、32 bgL、48 pgL、64 FgL、80 pgL。按65及66所述方法处理。65 1，4-氧六环提取液的蒸馏应用图A1所示微蒸馏装置，将1，4一二氧六环提取液中的表氯醇进行蒸馏，收集部分馏出液。图A1中瓶A为621、622、63和64中的样品瓶，其中分别含有10 mL的塑料试样提取溶液、涂层提取溶液、空白溶液和
11、标准工作溶液。另取20 mL样品瓶，于体积为3 mL处进行标记后用隔垫和铝盖密封。将密封后的样品瓶称量(精确至01 mg)，并标记为瓶B。如图A1所示，瓶A和瓶B通过外层套有聚四氟乙烯的不锈钢管连接，钢管刺人瓶A中的深度为1 cm2 cm，刺入瓶B中的深度为3 cm4 cm。为避免管口堵塞，应在样品瓶的瓶塞上预先刺一个小孔，使钢管可迅速刺人瓶中。同时，在瓶B的盖子上插入注射器针头以避免瓶中压力过大。将瓶A置于加热板上，将瓶B置于含有冰(416)水混合物的烧杯中。加热瓶A，使其中1，4-二氧六环提取液沸腾，继续缓慢加热使瓶A中的1，4-二氧六环提取液蒸馏至瓶B中，直至瓶B中馏出液面达到3 mL标
12、记处。将瓶A从加热板上移开，移去瓶B中的注射器针头和不锈钢管。用滤纸仔细擦干瓶B。将瓶B重新称量(精确至01 mg)，根据两次称量的差值和1，4一二氧六环的密度，计算馏出液的体积(精确至001 mL)。为便于计算馏出液的体积，假定馏出液的密度为1 gmL(馏出液的主要成分是1，4二氧六环，1，4-二氧六环的实际密度为103 gmL)。馏出液可密闭冷藏2周3周。66表氯醇的衍生打开含有馏出液的瓶B铝盖，加入50 pL新配制的DAS的乙腈溶液(411)，用隔垫和铝盖密封。将样品瓶置于75烘箱中17 h1 h。然后将衍生溶液冷却至室温，并用微孔滤膜(57)过滤，滤液待测。表氯醇的DAS衍生物对光十分
13、敏感，衍生应在昏暗条件下操作，衍生液可在室温下避光保存2 d。7测定71色谱条件a)色谱柱：C8，250 mm46 ram(内径)，粒径5 bcm，或相当者。b)流动相：乙腈(42)和水，流动相梯度淋洗条件见表1。表1梯度淋洗条件时间rain 乙腈 水0 55 455 55 4515 70 3018 70 3021 55 4531 55 45c)流速：2 mLmin。d)柱温：室温。GBT 2329672009e)荧光检测器：激发波长262 nm，发射波长490 nm。72标准曲线的绘制按照71所列测定条件，将标准工作溶液(64)经过65和66处理后得到的衍生物溶液依次进样，测量表氯醇的DAS
14、衍生物的峰面积(在色谱图上，如果表氯醇的DAS衍生物的两个同分异构体出现两个峰，则将两个同分异构体的峰面积相加)。表氯醇的DAS衍生物的峰面积与标准工作溶液中表氯醇浓度成正比。以标准工作溶液中表氯醇浓度为横坐标，单位为“LgL”，以对应的表氯醇的DAS衍生物的峰面积为纵坐标，绘制标准曲线。标准溶液中表氯醇衍生物的液相色谱图参见附录B。按式(1)计算回归参数：T，y；V7b一口z+b (1)y。式中：y表氯醇的DAS衍生物峰面积；v。瓶B接收的馏出液体积，单位为毫升(mL)；v。用于蒸馏的1，4-二氧六环提取液体积，为固定值10，单位为毫升(mL)；n回归曲线的斜率；z标准工作溶液中表氯醇的浓度
15、，单位为微克每升(wgL)；6回归曲线的截距。标准曲线的相关系数要求不小于0996。73试液的测定对空白溶液(63)和试样(62)的衍生物溶液依次进样测量。扣除空白值。根据线性方程计算1，4一二氧六环提取液中表氯醇的浓度，单位以微克每升(pgL)表示。1，4-二氧六环提取液中表氯醇的浓度c按式(2)计算：yV瓦b一6式中：c1，4一二氧六环提取液中表氯醇的浓度，单位为微克每升(tugL)；，表氯醇的DAS衍生物峰面积；v。瓶B接收的馏出液体积，单位为毫升(mL)；u用于蒸馏的1，4一二氧六环提取液体积，为固定值10，单位为毫升(mL)6回归曲线的截距；n回归曲线的斜率。8结果计算81 与食品接
16、触的塑料中残留表氯醇的含量(mgkg)，按式(3)计算：Qcv10 3 m式中：Q一与食品接触的塑料试样中表氯醇的含量，单位为毫克每千克(mgkg)c1，4一二氧六环提取液中表氯醇的浓度，单位为微克每升(pgL)；y用于提取试样的1，4一二氧六环溶液总体积，单位为毫升(mL)；m试样质量，单位为克(g)。82涂层中残留表氯醇的含量(ragdin2)，按式(4)计算：4Q一c-V106 。o式中：Q与食品接触的涂层中表氯醇的含量，单位为毫克每平方分米(ragdin2)c1，4一二氧六环提取液中表氯醇的浓度，单位为微克每升(pgL)；y用于提取涂层的1，4一二氧六环溶液总体积，单位为毫升(mL)；
17、s测试样品的表面积，单位为平方分米(dm2)。9重复性在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过10。GBT 2329(572009GBT 232967200965附录A(规范性附录)从1，4-二氧六环提取物中提取表氯醇的微蒸馏装置91不锈钢管，顶部为注射器针形，内径1 mln，长度约200 1mIT-；2注射器针头；3聚四氟乙烯管套筒；4聚四氟乙烯隔垫；5一一B瓶；6A瓶；73 mL标记；8冰水浴；9带加热功能的磁力搅拌器。图A1 微蒸馏装置(从1，4一二氧六环提取物中提取表氯醇)附录B(资料性附录)表氯醇标准物质衍生物的色谱图GBT 23296720091，2分别对应表氯醇衍生物的同分异构体。图B1 表氯醇标准物质衍生物的色谱图撕坫加。撕。
