1、ICS 13.100 c52 GBZ 中华人民共和国国家职业卫生标准GBZ厅210.5-2008职业卫生标准制定指南第5部分:生物材料中化学物质测定方法Guide for establishing occupational health standards一Part 5: Determnation methods of chemicals in biological materials 2008-07-08发布2008-12-30实施/二;好吟、运平平川中华人民共和国卫生部发布P如V前言根据中华人民共和国职业病防治法制定本部分。GBZjT 210一2008(职业卫生标准制定指南分为五个部分:第
2、1部分:工作场所化学物质职业接触限值;一一第2部分:工作场所粉尘职业接触限值;一第3部分:工作场所物理因素职业接触限值;一一第4部分:工作场所空气中化学物质测定方法;一一第5部分:生物材料中化学物质测定方法。GBZ/T 210. 5一2008本部分为GBZjT210-2008的第5部分，是在WSjT68一1996(研制生物样品监测检验方法指南基础上修订而成的。自本部分实施之日起，WSjT68一1996同时废止。本部分与WSjT68-1996相比主要修改如下:二一明确了适用范围;一一增加了制定原则;一一增加了制定依据;一一修改了研制标准测定方法需要具备的基本要求;一增加了使用新分析仪器研制标准测
3、定方法的要求和方法;一增加了资料整理和分析的详细要求;一-增加了标准测定方法的提出要求;一一增加了对编制说明的要求:一一增加了啻示要求。本部分由卫生部职业卫生标准专业委员会提出。本部分由中华人民共和国卫生部批准。本部分主要起草单位:中国疾病预防控制中心职业卫生与中毒控制所、天津市疾病预防控制中心、首都儿科研究所、深圳市疾病预防控制中心、山东省疾病预防控制中心。本部分主要起草人:徐伯洪、李涛、张敏、闰慧芳、刘黛莉、庄志雄、宫月秋、黄雪祥、张国、杜壁棒、邱兵。GBZ/T 210. 5-2008 职业卫生标准制定指南第5部分:生物材料中化学物质测定方法1 范围本部分规定了职业接触者生物材料中检测指标
4、(化学物质及其代谢物和生物效应)的标准测定方法的制定原则、依据、研制方法及要求等。本部分适用于职业接触者生物材料中检测指标标准测定方法的制定。2 规范性引用文件下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。GBZ 2.1 工作场所有害因素职业接触限值第1部分:化学有害因素GBZ/T 173 职业卫生生物监测质量保证规范GB/T 8170 数值修约规则GB/T 20001. 4标准编写规则第
5、4部分:化学分析方法WS/T 97 尿中肌配的分光光度测定方法WS/T 98 尿中肌配的反相液相色谱测定方法3 制定原则在遵循GB/T20001. 4和国家职业卫生标准制定原则基础上，生物材料中检测指标测定方法的制定，还应遵循以下原则。3. 1 研制的测定方法应采用科学、先进的方法，应尽可能引进国际或国外的标准测定方法或公认的测定方法，同时也应适合我国国情，使制定的测定方法既先进又便于推广应用。3.2 以下情况应制定测定方法:a)已列人职业接触生物限值制订计划的;b)毒理学实验、现有资料表明该化学物质有可能对人造成危害的;。在生产过程中应用该化学物质井有一定的职业接触人群和职业危害的;d)国外
6、已经制定职业接触生物限值的。3.3 在方法研制的过程中，鼓励研究和采用新技术、新方法和新材料。4 制定侬据4. 1 根据化学物质的理化性质、在体内的代谢和毒代动力学特征，选择能反映接触化学物质程度的生物材料、生物监测指标和测定方法。4.2 参考国内外的标准测定方法和文献中的方法，制定适合我国的测定方法。4.3 根据待测物的正常参考值、职业接触生物限值及生物效应等制定测定方法。5 研制方法5. 1 资料收集通过文献检索，获得该化学物质的理化性质、机体内代谢产物或反应产物及其生物效应、生物监测1 GBZ/210.5一2008指标、职业接触生物限值、正常参考值、测定方法(特别是生物材料的测定方法)等
7、资料。5.2 梓晶的采集、运输和保存的原则5.2.1 使用安全方便的取样容器和取样工具，其材质不路响测定。5.2.2 在样品的采集、运输和保存过程中，应注意冷战密封，并尽快送达实验室，以防止样品污染，保证待测物稳定，不变质、不损失。5.2.3 确定采样时机(班前、班中、班末、班后或其他时间)时，应根据待测物在体内的代谢规律，也可参考国内外标准测定方法和职业接触生物限值中规定的采样时机或相关的研究文献。5.2.4取样体积应根据测定方法的最低检出浓度、职业接触生物限值和正常参考值来确定。通常尿样50mL，静脉血注2mL，呼出气注100mL。5.2.5 样品的运输和保存条件以及保存时间(样品的稳定性
8、)可通过实验或参考有关资料确定。5.2.6 加人样品的防腐剂或抗凝剂等不应路响测定。5.3 样品预处理的原则5.3. 1 样品预处理方法应尽量简单有效，少用试剂或策复拉(:11.以便减少污染。5.3.2 预处理方法的选择a)测定元机物时，优先选用基体改进剂法、微波泊解法或高消解法;b)剖定有机物时，先将结合态的化合物水解，然后用有机济剂萃取分离，也可采用化学衍生法、同相萃取法或国相微萃取法，挥发性的待削物可使用顶空法。5.3.3 在样品顶处理，过程中，应确保待洲物闲挥发、分解、两相分配等造成的损失为最小;测定全程的回收率应注75%。5.3.4 尿样读度的校正可采用下列方法之一:a)相对密度校正
9、法:在采集后，不加任何试剂前，尽快闪址尿的相对密度。尿的标准相对密度为1. 020，小于1.010或大于1.030的尿样不能用于诩定。b)肌m:校正法:在采集后，尽快测定尿中肌肝浓皮。尿rt肌Ht度小于0.3g/L或大于3g/L的尿样不能用于测定。肌哥的测定方法采用WS/T97或WS/T98或其他公认的方法。5.4 测定方法的选择5.4. 1 测定j法应满足职业接触生物限值对，检闪的要求。a)最低检出浓度应0.1倍职业接触生物限值，拉好能;用定正常参考值;b)标准曲线的测定范围后好能在盖0.1倍3倍职业接触生物限值。5.4.2 金属及其化合物优先选择原子光谱法;有机化合物优先选择气相色谱法或高
10、效液相色谱法;非金属元机化合物优先选择原子荧光法、离子色谱法或气*ft色谱法等。5.5 NlU:方法的最佳副定条件试验研制新的测定方法时，首先要进行最佳训定条件的试验，主要包括以下内容。5.5.1 分光光度法显色剂的选择、试剂的用量、反应介质及其自主战度、显色反应的温度和时间、颜色的稳定时间等最佳测定条件的选择，以及标准曲线和扰消除等。5.5.2 原子光谱法2 a)火焰原子吸收光谱法:火焰种类、燃气和助燃气流盐、燃烧头高度、试液提升虫、测量波长和干扰消除等;b)电热原子吸收光谱法:干燥、灰化和原子化的时问和温度、载气流盐、测量波长和干扰消除等;c)原子荧光光谱法:氢化物发生条件、原子化条件、测
11、量波长和干扰消除等;d)原子发射光谱法:样品豆豆化条件、原子化条件、测量波长和干扰消除等。GEZ/1f 210. 5剖085.5.3 色语法a)气相色谱法:色讲柱、柱温、气化宣战检测室的温度、载气流量、检部j器及操作条件l0j主择等;b)液相(肖子)色谱法:色谐-柱、柱温、流动相及其流址、检凶器及操作条件的选择等。5.5.4 其他方法根据测定方法的操作特点和要求，进行试验。5.6 测定方法性能指栋的试验5.6.1 1际准曲线(或工作曲线)5.6. 1. 1 梅准曲线(或工作曲线)的选择a)在样品却阳之干扰测定的情况下，采用标准曲线法，即用标准悔?夜直接配制标准系列，进行测定;b)在样品在体对测
12、定有干扰的情况F，采用工作曲线法或标准加入法。工作曲线法是在标准系列中加入样品某体后直接测定，或加人样品基体并同样品处理后测定。标准加入法是将样品分成TF体积的数份，一份加人溶剂，另外儿份分别加入不同体积(或量)的标准溶液，制成标准系列，测定后，标准曲线的延长线与浓度坐标的交点为样品值。5.6.1.2 标准曲线(或工作曲线)的问定范国在规定的采样体识和训定条件下，满足O.1倍3倍职业接触限值的问定。5.6.1.3 标准曲线(或工作曲线)的浓度点(包括试剂宅(1):光度法(包括分光光度法租原子光谱法等)至少为5个，色谱法和电化学法至少为4个。5.6. 1.4 标准曲线(或工作曲线)的绘制:每个浓
13、反至少闪3次，以3次训定位的均值与相应的浓度绘制标准曲线(或工作曲线)，计算回归方程和相关系纹。a)捕关系数的虫:求:石墨炉原子吸收法1f.二三0.99，只他方法山二三0.999;b)线性汪国:以标准曲线(或工作曲线)的上下弯曲点之问的直线部分为线性范罔。5.6.2 最低栓出浓度试验最低检tU浓度是指在一起的宜信水平-r，在采集定体积生物样品时，已，定方法能够检出样品中待剖物的最低浓度。通常以生物材料中待测物的浓度在示，并注明分析时的，洋AAPK积或址。口I采用下列试验方法之一。单低战出浓度应运二O.1倍职业接触生物限值。5.6.2. 1 标准差法将闪12仪器调节至主主佳测定状态，按研制的闪定
14、方法连续问定10次空白溶液或接近宅(1浓度的溶液，由测定值计凭浓度平均值和标准差;空白;在;但测得的最低检出浓度等于3倍标准差。接近空白浓度的溶液测得的故低枪出浓度。按式(1)计算:C优=355式中:Ci.l 一段低枪出浓度，单位为微克每学升Cf.tg/mL); 5一一标准差。lf.位为做克每宅升(g/mU;C一-平均值，单位为微克每运升(g/mU;C一浓度值，申-位为微克每主运升(g/mU。5.6.2.2 噪声法(1) 将削仪器调节至最佳测定状态，测址基线的睐卢，最低检出浓度，等于3倍噪声所对bL的得剖物浓度。5.6.3 告密度的试验包括样品处理和测定全过程。选择标准曲线测定范围内的高、中、
15、低3个浓度，在3天5天内进行6次重复测定，计算只相对标准偏差(RSD)。要求RSD二10%。5.6.4 准确度的试验可采用下列试验方法之一。3 GBZ/T 210. 5-2008 5.6.4.1 样晶加标回收法取几份接触者新鲜样品，制成均匀的混合样品。然后分成4组，每组6个样品，一组为空白，其余三组分别加人3个浓度的标准溶液，加人量一般为O.5倍、1倍、2倍职业接触生物限值，混合均匀，各测定3次，取平均值，减去空白后，按式(2)计算每个浓度的加标回收率。然后计算平均加标回收率。平均加标回收率应在75%105%之间。R=Z1 (2) 式中:R二-一加标回收率，%;m一测得的待测物茧，单位为微克(
16、g);M 加人样品的待测物茧，单位为微克(g)。试验时应注意加标后的待测物浓度不应超过标准曲线的线性范围。5.6.4.2 标准物质法用研制的测定方法测定高低水平的、与样品基体相同或相似的标准物质各一组。测定值应在标准物质的标定值范围内。5.6.4.3 比对法用研制的测定方法与巳颁布的标准测定方法或公认的经典方法进行对比测定，同时对测定范围内的高、中、低3个浓度各进行6次测定。将测定结果做等效性检验。5.6.5 样晶的萃取或消解效率的试验试验方法同5.6.4.1，按式(2)计算各个浓度的萃取或消解效率，并计算平均萃取或消解效率。各个浓度的萃取或消解效率应注75%。5.6.6 干扰试验选择干扰物应
17、考虑工作场所空气中的共存物和生物样品的基体及其他成分，根据研制方法的原理和消除干扰的措施，选择可能干扰测定的物质作为试验对象。取测定方法测定范围的中间浓度3个5个标准溶液，一个不加干扰物，其余的分别加人不同茧的干扰物，测得结果后进行比较。有多个干扰物共存时，可以分别试验，也可联合试验。干扰物对测定结果所造成的偏差土10%时，表示有干扰。有干扰时，应说明干扰的程度，并尽可能提出消除方法。5.6.7 样品稳定性试验取几份接触者新鲜样品，制备成一个均匀的混合样品，待测物浓度为测定范围的中等浓度。分成4组，每组6个样品。保存在一定条件下，于当天、第3天、第7天、第14天各测定1组。保存温度分4个档次:
18、室温、冷藏(4.C)、冷冻(-8.C)、低温(-20.C以下)。按式(3)分别计算下降率，下降率:(;10%的天数为稳定时间。式中:R一一下降率，%;R=旦二旦旦X100%mj mj当天的测定均值，单位为微克(g);m2一保存天的测定均值，单位为微克(g)。5. 7 验证试验5.7.1 研制的新测定方法(3) a)应经3家有相应资质的实验宝验证，研制者提供检测方法和必需的条件，验证者经实验室验证后，向研制者提出验证报告;4 GBZ/210.5-2008 b)验证内容包括标准曲线的测定范围、最低检出浓度、精密度、准确度、干扰试验和样品的稳定性。验证方法应采用本部分的方法，性能要求应满足本部分的要
19、求。5.7.2 引进国际或国外的标准测定方法a)当等问采用或元重要修改采用公认的国际或国外标准测定方法时，经采用者按5.7.1的验证内容进行验证后，不再需其他实验室验证;b)当有重要改动时，按本部分的要求由引进的实验室进行验证，还需有2家有相应资质的实验室对修改后的测定方法按5.7.1验证内容进行验证。5.8 现场应用5.8. 1 用研制的测定方法对接触不同待测物浓度的职业接触人群和对照人群的样品进行测定，接触组和对照组各组样本茧至少10例，观察测定方法的适用性。5.8.2 在测定生物材料的同时，测定工作场所空气中待测物的浓度，计算两组测定结果，并观察两组的相关关系。5.9 资料的整理与分析a
20、)资料调研、采样时机及方法、样品处理方法、测定方法和方法的性能指标等试验都要有完整的原始记录，并可回湖;b)数据处理过程中，数据的取舍及修约应符合GB/T8170的要求，结果的整理分析应符合统计学要求;c)正确使用法定计量单位。5. 10 栋准测定方法的提出5. 10. 1 根据国内外文献的调研，经过实验室研制和验证，证明测定方法的性能指标符合本部分的要求，可建议作为标准测定方法。5.10.2 标准测定方法的内容应包括范围、原理、仪器、试剂、样品的采集运输和保存、分析步骤、计算和说明等。在说明中，应说明该方法的主要性能指标，包括最低检出浓度、8!1定范围、精密度、准确度、干扰及消除方法等，还应
21、说明采样和测定中的注意事项。6 基本要求6. 1 测定方法应满足职业接触生物限值的要求:a)最低检出浓度应能检测o.1倍该化学物质的职业接触生物限值，最好能检测正常参考值;b)应满足职业接触生物限值对采样和检测的要求。6.2 测定方法应包括采样、样品预处理和测定三部分，三部分应紧密衔接。方法的操作尽可能简便、安全、省时。6.3 测定方法具有一定的特异性，常见的工作场所共存物和生物材料的基体不干扰测定或可被消除，尽可能排除非职业接触因素的影响。6.4 质量保证应符合GBZjT173的要求。6.5 栋准副定方法的制定6.5. 1 新的标准测定方法的制定a)国内外没有标准测定方法简要制定新的标准测定
22、方法;b)有新技术、新方法可替代原有测定方法时，应及时更新，制定新标准方法;c)制定新的标准测定方法时，按照本部分的要求进行。6.5.2 引进国际或国外的标准副定方法a)优先引进国际上公认的标准测定方法:b)引进国际或国外标准测定方法时，要按本部分要求进行验证;c)引进国际或国外标准测定方法时，应提供标准测定方法的原文复制件和译文文本。5 GBZ/T 210. 5一20086.5.3 修订标准测定方法在标准测定方法的使用过程中，要追踪其适用性，-旦有证据表明该标准测定方法有理由需要进行修订时，应及时按本部分的要求进行修订。6.6 编制说明的要求编制说明的主要内容除依照卫生标准管理办法编写外，还
23、应有ta)本方法的研制过程，包括研制的目的和任务;b)采用本方法的理由，包括待测物的理化性质、国内外已有测定方法的比较、本法的科学性、先进性、适用性和可行性及优缺点;c)按本部分进行试验的结果，包括测定方法各项性能指标试验的主要数据和结论;d)引进国际或国外的标准测定方法，应说明该标准测定方法在我国的适用性和可行性;若引进时有修改，则还应说明修改的内容和理由及修改后的可行性;e)修订的标准测定方法应说明修订的理由和修订后的优缺点及适用性和可行性。6. 7 曹示6.7.1 对于健康和环境有危险或有危害的试验方法，要根据试样、试剂或操作三种情况，分别给予适当的啻示。6.7.2 对于试样有危险的，应
24、在试验方法一开始就提出曹示。6.7.3 对于试剂或仪器有危险的，应在试剂或仪器材料一开始就提出啻示。对于有环境危害作用的试剂应按规定回收和处理。6.7.4 对于操作有危险的，应在操作步骤一开始就提出啻示。6. 7.5 示内容一般;后注明注意事项，相应的防护措施，以及发生事故后应采取的急救措施。6 OONim-OFN问KN阁。华人民共和国家职业卫生标准职业卫生标准制定指南第5部分:生物材料中化学物质测定方法GBZjT 210. 5-2008 国中印张:0.75 2009年4月第1版第1次印刷等出版发行:人民卫生出版社(中继线010-67616688)地址:北京市丰台区方庄芳群园3区3号楼邮编:100078 网址:http:/ E -m剑1:pmph pmph. com 购书热线:010-67605754 010-65264830 印刷:北京新丰印刷厂经销:新华书店开本:880X 1230 字敏:22千字版次:2009年4月第1版书号:14117.230 定价:8.00元版权所有，侵权必究，打击盗版举报电话:010-87613394 (凡属印装质结问题请与本社销售部联系退换)1/16 . . . EE- . UHHHH刷刷刷刷刷nom闹闹闹闹呻闹闹。刷刷刷却旧川川一刚刚刚阳刚刚5HHMMMMMMO HHHMMMMMMHHd HW忡忡忡川川川UM吨，州唰州却刷刷刷刷剧mmRMM川川川G
