1、ICS 65.080 G 21 DB41 河南省地方标准 DB41/T 14142017 含聚谷氨酸尿素 2017 - 07 - 07发布 2017 - 10 - 07实施 河南省质量技术监督局 发布DB41/T 14142017 I 前 言 本标准按照 GB/T 1.12009给出的规则起草。 本标准由河南省石油和化学工业协会提出。 本标准起草单位：河南心连心化肥有限公司、河南省石油和化学工业协会。 本标准主要起草人：刘伟、岳艳军、崔增涛、郭景丽、朱迎红、宋仁委、杨星波 本标准参加起草人： 赵保军 、马雪丽、罗彦莉、庞伟玲、马雪、李梦台、吴培 DB41/T 14142017 1 含聚谷氨酸尿
2、素 1 范围 本标准规定了含聚谷氨酸尿素的技术 要求、 试验方法、检验规则、标识、包装、运输与贮存。 本标准适用于在尿素生产过程中添加一定量的聚谷氨酸，通过 尿素造粒工艺制成的含聚谷氨酸尿素。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T 2440 尿素 GB/T 2441.1 尿素的测定方法 第1 部分：总氮含量 GB/T 2441.2 尿素的测定方法 第2 部分：缩二脲 含量 分光光度法 GB/T 2441.3 尿素的测定方法 第3 部分：水分 卡尔
3、 费休法 GB/T 2441.7 尿素的测定方法 第7 部分：粒度 筛分法 GB/T 2441.9 尿素的测定方法 第9 部分：亚甲基二脲含量 分光光度法 GB 18382 肥料标识 内容和要求 NY/T 1115 水溶肥料水不溶物含量的测定 HG/T 2843 化肥产品 化学分析中常用标准滴定溶液、标准溶液、试剂溶液和指示剂溶液 3 技术要求 3.1 外观 颗粒状，无可见 机械杂质。 3.2 技术指标 含聚谷氨酸尿素应符合表 1的规定。 表1 含聚谷氨酸尿素的技术指标 项 目 指 标 总氮 （ N） (以干基计)/% 46.0 聚谷氨酸/% 0.01 缩二脲/ % 1.0 水分/ % 1.0
4、 水不溶物/% 0.5 亚甲基二脲a0.6 （以 HCHO计） /% DB41/T 14142017 2 表1 含聚谷氨酸尿素的技术要求（续） 项 目 指 标 粒度bd 0.85 mm2.80 mm /% 90 d 1.18 mm3.35 mm d 2.00 mm4.75 mm d 4.00 mm8.00 mm a若尿素生产工艺中不加甲醛，可不做亚甲基二脲含量的测定。 b指标中的粒度项只需符合四档中的任一档即可，包装标识中应注明。 4 试验方法 4.1 外观 目测。 4.2 总氮的测定 按GB/T 2441.1 的规定进行。 4.3 聚谷氨酸的测定 按附录 A进行 。 4.4 缩二脲的测定 按
5、GB/T 2441.2 的规定进行。 4.5 水分的测定 按GB/T 2441.3 的规定 进行。 4.6 水不溶物的测定 按NY/T 1115的规定进行。 4.7 亚甲基二脲的测定 按GB/T 2441.9 的规定进行。 4.8 粒度的测定 按GB/T 2441.7 的规定进行。 5 检验规则 按GB/T 2440的规定进行。 6 标识 DB41/T 14142017 3 产品包装袋上应标明总氮含量、聚谷氨酸含量、本标准号和 GB/T 2440，其 他按GB 18382和GB/T 2440中标识的规定。 7 包装、运输和贮存 按GB/T 2440的规定进行。 DB41/T 14142017
6、4 A A 附 录 A （规范性附录） 聚谷氨酸含量的测定 A.1 原理 聚谷氨酸随着流动相依分子量由高到低依次流出高效液相色谱凝胶柱，用紫 外检测器检测其信号，外标法定量。 A.2 试剂和材料 A.2.1 试剂、溶液和水 本方法中所用试剂、溶液和水，在未注明规格和配置方法时，均应符合 HG/T 2843的规定。 A.2.2 流动相：硫酸钠溶液（0.3 mol/L） 称取无水硫酸钠 42.6 g（精确至 0.0001 g），溶解并定容至 1 L，用乙酸调pH 值至4.0 ，用孔径 0.22 m微孔滤膜过滤，超声波脱气 15 min。 A.2.3 聚谷氨酸标准贮备液（1.0 mg/mL） 称取聚
7、谷氨酸标准品 1.0 g（精确至 0.0001 g），溶解并定容至100 mL，标准品的标定按附录 B进行。 A.3 仪器 A.3.1 高效液相色谱仪：配有可见 紫外检测器。 A.3.2 色谱柱：凝胶渗透色谱柱。 A.4 测试条件 A.4.1 检测温度： 35 。 A.4.2 检测波长： 210 nm。 A.4.3 流速： 0.5 mL/min。 A.4.4 进样量：10 L 。 A.5 分析步骤 A.5.1 聚谷氨酸标准工作溶液的配制 分别移取0.00 mL 、1.00 mL、2.00 mL 、5.00 mL 、10.00 mL 、20.00 mL 聚谷氨酸参考标准贮备溶液至50 mL容量瓶
8、中并用流动相定容，摇匀。其浓度分别为 0.00 mg/mL、 0.02 mg/mL、 0.04 mg/mL、 0.1 mg/mL、0.2 mg/mL、0.4 mg/mL。 DB41/T 14142017 5 A.5.2 标准曲线的绘制 在仪器稳定的条件下依次将聚谷酸标准工作溶液注入色谱柱中，记录峰面积，以标准工作溶液中聚谷氨酸的浓度为横坐标，峰面积为纵坐标绘制标准曲线或求得线性回归方程。 A.5.3 试样制备 准确称取2.5 g（精确至 0.0001 g）含聚谷氨酸尿素样品，用流动相溶解定容至50 mL, 超声脱气15 min。配好的试样溶液经0.22 m微孔滤膜过滤。 A.5.4 试样测定
9、进行高效液相色谱检测，记录峰面积 A0，并根据标准曲线计算得到试样中聚谷氨酸的浓度C 0A.5.5 结果的表述和计算 。 以质量百分数表示的聚谷氨酸含量 X 按下式计算： 1001000500=mCW 式中： W试样中聚谷氨酸的质量分数，； C0m试样的质量 ,g 标准曲线上查出样品溶液中聚谷氨酸的浓度 ,mg/mL； DB41/T 14142017 6 B B 附 录 B （规范性附录） 聚谷氨酸标准品的标定 B.1 方法提要 固体聚谷氨酸残留有少量的菌体，以及原培养基中的部分组分，经过水溶解离心、砂芯坩埚过滤可除去菌体，再用1KD 超滤膜超滤 , 收集未经过滤膜的液体，加无水乙醇使聚谷氨酸
10、沉淀后，离心收集沉淀，真空干燥至恒重，称取一定量的聚谷氨酸配成标准溶液，水解后用氨基酸自动测定仪测定其谷氨酸含量，计算参考标准品聚谷氨酸含量。 B.2 仪器和试剂 B.2.1 本方法中所用试剂、溶液和水，在未注明规格和配置方法时，均应符合 HG/T 2843的规定。 B.2.2 氨基酸自动分析仪（配套的衍生试剂应保证能检测谷氨酸）。 B.2.3 电子分析天平。 B.2.4 消解罐，体积为 50 mL。 B.2.5 恒温真空干燥箱。 B.2.6 超滤装置（带1 KD超滤膜）。 B.2.7 砂芯坩埚。 B.2.8 盐酸， 6 mol/L。 B.2.9 谷氨酸标准品。 B.3 标准品的提纯 B.3.
11、1 将固体聚谷氨酸配制成1.5% 左右的水溶液，以8000 r/min的转速离心 10 min，收集上清液，将上清液用G6砂芯坩埚过滤，收集滤液，将滤液转移至1KD的超滤 膜的超滤装置中，进行超滤以除去小分子杂质，待超滤至体积为原体积的1/2 左右时，收集未通过超滤膜的液体，加入 4倍体积的无水乙醇，使聚谷氨酸沉淀，将其以 4000 r/min 离心5 min 后，收集聚谷氨酸沉淀，至真空干燥箱中在60 干燥至恒重（标准品含量 99%。若颜色深可再重复一次上述操作）。 B.3.2 标准溶液的配制 准确称取干燥至恒重的参考标准品0.1 g （精确至0.0001 g ）聚谷氨酸，定容到 100 m
12、L容量瓶中。 B.3.3 标准溶液含量的测定 B.3.3.1 准确移取聚谷氨酸标准溶液1.00 mL 于消解罐中，加入 10 mL 6 mol/L的盐酸，密封后置于恒温干燥箱中在 120 2 下水解12 h 后取出冷却到室温，将其蒸发至近干（赶尽剩余盐酸），用水稀释定容至25 ml 。 B.3.3.2 准确称取干燥至恒重的谷氨酸标准品 0.1 g（精确至0.0001g），采用相同的前处理方法制备谷氨酸对照品溶液。 DB41/T 14142017 7 B.3.3.3 在仪器稳定的条件下,依次将水解后的聚谷氨酸参考标准品溶液及谷氨酸对照品溶液依次注入仪器 ,分别记录其峰面积 B.4 结果的计算与表示 B.4.1 结果的计算 聚谷氨酸参考标准溶液含量 C，以 mg/L表示，按下式计算： 10011221=kmAmAW式中： W聚谷氨参考标准品的含量 , ； A1A聚谷氨酸参考标准品的峰面积； 2m谷氨酸标准品的峰面积； 1m聚谷氨酸参考标准品的称样量 ,g； 2K聚谷氨酸完全水解为谷氨酸时的质量变化系数， 1.14。 谷氨酸标准品的称样量,g ； B.4.2 结果的表示 以两次结果的平均值为参考值，计算结果保留 3位有效数字。 _
