1、ICS 65.020.20 B 31 备案号 : DB11 北京市地方 标准 DB11/T 905 2012 草莓种苗 Strawberry seedling 2012 - 09 - 27发布 2013 - 01 - 01实施 北京市质量技术监督局 发布DB11/T 9052012 I 前 言 本标准按照 GB/T 1.12009 给出的规则起草。 本标准由北京市农业局提出。 本标准由北京市农业标准化技术委员会归口。 本标准由北京市农业局组织实施。 本标准起草单位：北京市种子管理站、北京市农林科学院林业果树研究所。 本标准主要起草人：贾希海、张运涛、董清华、徐全明、律宝春、吴明生、宋歌、云晓敏
2、、郭慧杰。 DB11/T 9052012 1 草莓种苗 1 范围 本标准规定了草莓种苗的相关定义、质量要求、检验和质量判定规则。 本标准适用 于生 产和 销售 的草莓种苗。 2 规范性引用文件 下列文件对于 本文件 的应 用是必不可少 的。 凡是注日期的 引用 文件，仅 所 注日期的 版本适用 于 本 文 件。凡是不注日期 的引 用文件，其最新版 本（包括 所有的 修改 单） 适用 于本 文件。 GB/T 3543.5 农作物 种子检验规 程 真 实性 和品 种纯度鉴 定 NY/T 406 脱毒 草莓种苗病毒检 测技术规 程 3 术语和定义 下列术 语和定义适用 于本 文件。 3.1 茎尖培养
3、苗 shoot tip culture seedling（F0 ） 从经过热处 理脱毒及病毒 检测后 的草莓 植株取茎尖分 生组织 ，进行茎尖培养后获得 的、 经检 测后确 认不携带 本标准规定的检 测病毒 的试 管苗。 3.2 原原种苗 pre-basic seedling（ F1） 茎尖培养 苗在网室中经过一年繁殖培养后获得并不携带本标准规定的检 测病毒 的 植株 。 3.3 原种苗 basic seedling（ F2） 原原种苗 经过一年繁殖培养后获得并经 检测后达到 规定质量要求的 植株 。 3.4 生产用种苗 certified seedling（F 3） 原种苗 经过一年繁殖培养
4、后获得并经 检测后达到 规定质量要求的 植株 。 3.5 成活种苗 survival seedling DB11/T 9052012 2 种苗定 植一 定时间后 生长 出新根 、芽 、叶 的植株 。 3.6 无毒种苗 virus-free seedling 不携带 草莓 斑驳病毒（ Strawberry mottle virus， SMoV）、草莓 轻型黄边病毒（ Strawberry mild yellow edge virus， SMYEV） 、草莓 镶脉病毒（Strawberry vein banding virus ， SVBV） 以及 草莓 皱 缩病毒（ Strawberry cri
5、nkle virus， SCV）中 任一 种病毒 的植株 。 4 质量 要求 草莓种苗质量要求 见表 1。 表 1 草莓种苗质量要求 单位为 % 作物名称 种苗类别 纯度 无毒率 病株率 成活率 单株要求 草莓 原原种苗 100.0 100.0 0 90.0 四个叶柄并一 个芯；芯茎粗 不小于 0.6cm； 须 根不少于 6 条，根长不小 于 6cm。 原 种苗 99.0 100.0 0 生 产 用种苗 96.0 95.0 炭疽病1.0； 叶斑病3.0 5 检验 5.1 抽样 5.1.1 原原种苗 每 株应 检测 。 5.1.2 原种苗 在整个 组培 扩繁过程 的前 、中和 后期， 采用 随机
6、 取样法抽 取1% 2%的组 培苗。 5.1.3 生产用种苗 5.1.3.1 采用随机 取样方法抽 取样 品，抽样数 量见表 2。 表 2 生产用种苗抽样数量 种苗总数量（株） 抽样百分率（% ） 抽样最低数量（株） 10000 6 10 100 10000 3 5 注：不足抽样最低数量的全部作为混合样品 5.1.3.2 将初次抽 取的 样品 组成混合样品，从 混合样 品中 随机抽 取 10%的样 品作 为检 测样品 。 DB11/T 9052012 3 5.2 纯度鉴定 5.2.1 检测方法 按 GB/T 3543.5执行 。 5.2.2 结果计算和表示 按GB/T 3543.5 执行 。
7、5.3 无毒率检测 5.3.1 检测病毒种类 草莓斑驳病毒 、草莓 轻型黄边病毒 、草莓 镶脉 病毒 和草莓 皱缩 病毒 。 5.3.2 检测方法 5.3.2.1 分子生物学聚合酶链式反应检测法（ PCR/RT-PCR） 草莓斑驳病毒（ SMoV） ： 取草莓种苗的 叶片 ， 提 取总 RNA， 反转录为 cDNA后进行 PCR检测。 利用 引物 （ 上游引物 5 TAAGCGACCACGACTGTGACAAAG3 和 下游引物5 TCTTGGGCTTGGATCGTCACCTG3 ） 扩增得到 219 bp的片段 。 草莓轻型黄边病毒（ SMYEV）：取 草莓种苗的 叶片， 提取总RNA， 反
8、转录为 cDNA后进行PCR检 测。 利 用引物（ 上游引物 5 GTGTGCTCAATCCAGCCAG 3和下游引物 5 CATGGCACTCATTGGAGCTGGG3 ） 扩增得到 271 bp的片段 。 草莓镶 脉病毒（ SVBV） ： 取草莓种苗的 叶片 ， 提 取基因组 DNA，进行 PCR检测 。 利用 引物（ 上游 引物 5GAATGGGACAATGAAATGAG3 和下游 引物5 GTGAGGAGAACTTAGGACA3 ）扩增得到 574 bp的 片 段。 草莓皱缩 病毒（ SCV）： 取 草莓种苗的叶 片， 提取总 RNA，反转录为 cDNA后进行 PCR 检 测。利 用引
9、 物（ 上游 引物 5 CATTGGTGGCAGACCCATCA 3和下 游 引物 5 TTCAGGACCTATTTGATGACA 3） 扩增 得到345bp 的片段 。 5.3.2.2 指示植物小叶嫁接法 具体检 测方法 应按 NY/T 406执 行。 5.3.2.3 结果计算和表示 计算见公式 （1 ）， 结果 保留 一 位小数 。 100 % = 供检种苗数 的种苗数 不携带本标准规定病毒 ） 无毒率（ . (1) 5.4 病株率检测 5.4.1 检测方法 目 测 法检 测。 5.4.2 结果计算和表示 DB11/T 9052012 4 计算见公式 （2 ）， 结果 保留 一 位小数 。
10、 100 % = 供检种苗数 的种苗数 感染本标准所规定病害 ） 病株率 （ . (2) 5.5 成活率鉴定 5.5.1 检测方法 以 100株为 一次重复 ，计4 次重复 。 在温室中进行， 温度 保持 在20 25；选择沙壤土做苗 床并 消毒 ；使 用 防 虫 网 隔离 ， 防 止感染外 界 病毒 ；使 用 遮阳 网进行 遮阴，日 盖夜揭； 定植后及时灌水 ， 满 足植株 生长对 水 分的 需求 ； 20天后，进 行 种苗 成活率 鉴定。 5.5.2 结果计算和表示 计算见公式 （3 ）， 结果 保留 一 位小数 。 100 % = 供检种苗数 成活种苗数 ） 成活率 （ . (3) 5.
11、6 单株要求检测 5.6.1 检测方法 芯 茎 粗和 根长 用精 确度达 0.1mm的 长度 计量 器具 进行测 定。 5.6.2 结果计算和表示 单株要求 试验 结果 以样 品单 株 数据平均 数表 示， 结果 保留 一位 小数 。 每个重复 取 单株试 验数 据 的 平 均数，最后 结果按 两次重复 平均 数计算 。 6 质量判定规 则 6.1 纯度、 无毒 率、 病株 率、 成活率 、单 株要求 其中一 项未达到 质量要求的 ，判 为劣质种苗。 6.2 纯度、 无毒 率、 病株 率、 成活率 、单 株 要求 其中一 项达不到 标签 上相 应标 注值 的 ， 判 为劣质种苗。 6.3 带有国家 规定检 疫性有 害生 物 的， 判为 劣质种苗。 _
