1、DB1309州市地方标准凡、JrlL.J4.司州B，勺月口DB 1309/T49-2003狐狸人工采精授精技术(改良北极狐)2003-08-01发布2003-09-01实施沧州市质量技术监督局发布DB1309/T49-2003前侣纷二.本标准由肃宁县质量技术监督局提出。本标准由肃宁质量技术监督局、肃宁县畜牧局、沧州金思养狐公司、当肃宁县扶贫办特种动物养殖基地联合起草本标准主要起草人:张宏杰、刘桂艳、马之建、孙恒昌本标准于2003年8月1日首次发布。DB1309/T49-2003狐狸人工采精授精技术(改良北极孤)范围本标准规定了种狐的选择、采精前的准备、狐的发情鉴定、采精的方法、精液的品质检测、
2、精液的稀释和输精等。本标准适用于改良北极狐的人工采精、授精过程。2种狐的选择2. 1选种指标幼狐出生早(5月20日前生)，生长发育快，体型大的个体。a)体重要求:4月龄幼狐4. Okg-4. 5kg;成年公狐6. Okg，成年母狐5. 5kg以上;b)体长要求:4月龄幼狐55cm以上;成年公狐75cm，成年母狐70cm以上。2. 2年龄种用公狐不超过6年，种用母狐不超过5年.凡年龄大，繁殖力下降，营养不良及有恶癖者均要淘汰。2. 3其他条件成年公狐，要求配种能力强.精液品质好，择偶性不强;成年母狐，要求胎平均产仔8头以上:母性强，泌乳力强，无吃仔恶癖。对环境不良刺激(声音、气候、颜色、气味等)
3、过于敏感的，不宜留作种用。3采精前的准备1采精室保温和隔音性能好，室内清洁，空气新鲜。3. 2采精用设备3. 2. 1采精保定器:要求规格大小合适，固定要牢靠，表面要干挣。采精保定器距地面90cm左右为宜。3. 2. 2控温设备:采精室温度要维持在25左右。室内配备:电暖气、恒温箱、水浴锅、干烤箱等。3.2.3消毒设备:室内应设有喷酒消毒和紫外线灭菌设备以及高压灭菌器、酒精灯和洗涤用容器。DB1309/T49-20033. 2. 4采精设备:数量充足的集精杯、电采精器和假阴道等。3. 2. 5精液检查设备:保温箱和显微镜、载玻片、盖片、凹玻片、红细胞吸管、.血细胞计算板等。3. 3采精用器具的
4、消毒3. 3. 1玻璃器材:漏斗、注射器、集精杯、玻璃棒等.在使用前后必须先用296-3%的碳酸钠溶液或肥皂水洗涤23遍，然后用蒸馏水冲洗2次，再在高压灭菌器中消毒。3. 3. 2金属器材:镊子、剪刀先用2%-3%的碳酸钠溶液洗刷.用毛巾包好放在防尘柜内。使用前用酒精灯火焰消毒1分钟或用75%的酒精棉球消毒。输精器用75%的酒精消毒，然后用0. 9%的氯化钠溶液至少洗刷5次。3. 3. 3胶质器材:假阴道、内胎等橡胶制品先用296-39b碳酸钠溶液刷洗，用开水冲洗2-3次，再用蒸馏水冲洗2次，放在防尘处晾干。用时再用75%酒精棉球擦拭。为防.止因酒精挥发不净影响精子活力，可用蒸馏水冲洗2-3次
5、后再用。3. 3. 4各种采精、输精和精液处理的器材在清洗消毒后晾干。使用前应放在恒温箱内预热，恒温箱保持在37左右。4狐的发情鉴定4. 1公狐发情鉴定。皋丸下垂增大、有弹性、尿频，颜色呈深黄或黄绿色，尿中的“狐香”味加浓，时常会发出傲嗽的高亢叫声，情绪不安，食欲减退。4. 2母狐发情鉴定a)发情前期:母狐阴门开始肿胀、阴毛分开，阴门露出，流出特殊气味分泌物，狐表现不安、活跃。一般维持2-3天。此阶段过后，母狐阴门高度肿胀，触摸时硬而无弹性。随后阴道分泌物颜色浅淡，此时进行放对，出现相互追逐。公狐交配时，母狐不举尾，并拒绝交配，此期持续1一2天。b)发情期:阴门触摸柔软有弹性，阴道流出浓稠的白
6、色分泌物、食欲下降。此时公母狐放对时，母狐则表现安静，当公狐接近母狐时，母狐主动将尾举向一侧，并接受交配，此期持续3-5天.c)发情后期:母狐外阴部逐渐萎缩，颜色变白，拒绝与公狐交配，此时应停止放对。d)静止期:母狐阴门为阴毛覆盖，如不扒开则看不到。DB1309/T49-20034. 3对种公母狐进行登记并做好公母狐发情记录(填入附录A、表A且、A2. A3 ) o5采精的方法5. 1手指按摩法5.1.1保定:将采精公狐置保定架上保定，颈部用捕狐钳固定，捕狐钳的杆状长柄横向卡在保定架的凹槽内。公狐的尾巴用细绳拴住后吊起，露出生殖器。5. 1. 2清洗:首先用温开水或对皮肤无刺激性、无异味、杀菌
7、能力强的消毒液(如某些季胺类消毒药物)对公狐外生殖器开口处和阴部被毛、皮肤进行清洗，然后用灭菌纱布擦干。5. 1. 3准备:在进行手指按摩前，先用手轻轻地抚摸狐狸阴囊，或用手指向后轻轻地弹辜丸15s-30s束d激狐性欲。然后再进行手指按摩。5. 1. 4采精操作者左手握集精杯，右手食指和拇指握狐阳茎最敏感的部位一球状腺体。有节奏地(慢一快一快一慢)进行按摩。按摩方向为自然配种时公狐趴在母狐背上时，阴茎所呈的方向，当球状体明显膨大时，招下包皮，露出阴茎，右手食指和拇指握球状腺，将阴茎通过狐的两后腿间拉向后方继续按摩至射精。射精时操作者以右手拇指和食指有节奏地继续轻压勃起的阴茎龟头尖端部分，以左手
8、握住集精杯接取精液。5. 2电刺激法5. 2. 1采精器:可用吉林农业大学生产的87-5型电刺激采精器。采精器要求:可调时间3s-12s,直肠探棒长20cm，直径0. 8cm.用前应在已经消毒直肠探棒表面涂满液体石蜡。5. 2. 2公狐保定和采精前处理:采用药物麻醉保定法.用安定5mg在狐后肢股内侧肌肉注射。麻醉后使其侧卧于桌面上，腹部朝处，剪掉尿道口周围的毛，用0. 1%新洁尔灭消毒，用清水洗净，用干净的毛巾擦干。5.3.3采精:将直肠探棒插入公狐直肠内10cm 12cm，打开电刺激开关，频率调到20Hz，间歇时间调到7s处，电压由2V开始，回零二次后，再升高至2V，逐步递增到20V时，公狐
9、阴茎勃起，开始充血:至30V左右时，公狐开始排精，用集精杯收集精液后，将电压调回零，关闭电源，拿出直肠探棒。6精液的品质检测6. 1精液的密度检测6.1.1器具和溶液4DB1309/T49-2003a)血细胞计数板b)红细胞稀释管c)盖玻片d)显微镜e) 396Nac 1溶液6. 1. 2操作步骤a)用红细胞稀释管准确吸取精液到刻度0. 5,擦去管端附着精液:b)再吸取396Nac 1溶液到刻度101处，充分混合均匀，并弃去管内最初几滴;c)将盖玻片放在计数板正中，把稀释管中1小滴精液滴在盖片的边缘，使稀释的精液渗入计数室内d)将计数板置于显微镜下，在400倍下找到计数室中内大方格。e)统计大
10、方格四周的4个中方格和中央1个中方格的精子总数。f)按公式计算密度:lml精子数(密度)=5个中方格精子总数X10“个/mlo6. 2精液的活力检测6. 2. 1器具a)长吸管b)载玻片c)显微镜d) 40瓦台灯6. 2. 2操作步骤a)在温度18-25条件下，用长吸管吸取1滴精液加在载玻片上;b)盖上盖玻片(18 X 18 );c)选择适当的视野，将物镜调至200-400倍;d)挑选5个视野计数，以10级评分标准评定，以0. 1到1表示，如一个视野直线前进精子占总视野8096，则精子活力为0. 8 0e)用作人工授精的精子活力要求0. 7以上.活力指数越高，品质越好。7精液的稀释7. 1配方
11、1胺基乙酸2. 1g,卵黄30m1,蒸馏水70m1，青霉素40万单位。7. 2配方2葡萄糖6. 8g，甘油2. 5m1,卵黄0. 5m1,蒸馏水97m1o7. 3配方3三轻甲烷2. 4g，果糖1g,蒸馏水80m1osDB1309/T49-20037. 4操作步骤:将配好的稀释液缓缓加入到盛有精液的集精杯中先作1倍稀释。在确定原精液的精子密度后，再加入适量的稀释液，使稀释后的精子密度为0. 4亿一0. 6亿个/mlo8输精8. 1精子量要求:有效精子在0. 40. 6亿个之间为宜。8. 2器具:扩张器、输精针、保定器。8. 3步骤a)将待输精母狐放入保定器中固定:b)将已消毒的扩张管缓慢插入母狐
12、阴道内，将阴道扩开:c)操作员一手握住己消毒的输精针，一手把握住子宫颈，将输精针轻轻放入子宫颈2cm -3cm再用注射器将精液注入子宫颈口内d)将母狐放回。8. 4做好配种记录(填入附录A表A4)DB1309/T49-2003附录A表A，种公狐登记卡兽号:体重:色型:同窝仔兽:出生:评定:优、良、中谱系母父外祖母外祖父祖母祖父(背面)繁殖性能年度受配母兽号配种次数配种日期初配一结束产裔评定胎产优表A2种母狐登记卡兽号:体重:色型:同窝仔兽:出生:评定:优、良、中谱系母父外祖母外祖父祖母祖父(背面)年度公兽号配种日期初配一结束产仔断乳成活率产裔评定优良中日期活仔死胎DB1309/T49-2003表A3公母狐发情记录表狐号二月三月四月1231a3123表lea配种记录母狐号12次3次时间时间时间公号公号公号时间时间时间公号公号公号
