GB T 12393-1990 食物中磷的测定方法.pdf

1、GB 123931990 中华人民共和国国家标准 食物中磷的测定方法 Methods for determination of phosphorus in foods GB/T 123931990 本标准参照采用国际标准 ISO 39461982淀粉和淀粉制品中总磷的测定分光光度法和 ISO 29621 984乳和乳制品中总磷的测定分子吸收光谱法 。 1 主题内容与适用范围 本标准规定了用分光光度法测定食物中的磷含量。 本标准适用于各类食物中总磷的测定。 第一篇 2 原理 食物中的有机物经酸氧化： 使磷在 酸性条件下与钼酸铵结合生成磷钼酸铵。此化合物经过苯二酚、亚硫酸钠还原成蓝色化合物钼蓝。用

2、分光光度计在波长 660nm 处测定钼蓝的吸光值，以定量分析磷含量。本方法最低检出限为 2g。 3 试剂 本实验用水均需用蒸馏水或去离子水。试剂纯度均为分析纯。 31 硫酸：比重 1.84。 32 高氯酸-硝酸消化液：1+4 混合液。 3 3 15%硫酸溶液 （V/V） ： 取 15mL 硫酸徐徐加入到 80mL 水中混匀。 冷却后用水稀释至 100mL。 34 钼酸铵溶液：称取 5g 钼 酸铵（ NH4）6Mo7O244H2O用 15%硫酸稀释至100mL。 3 5 对苯二酚溶液： 称 取 0.5g 对苯二酚于 100mL 水中， 使 其溶解， 并 加入一滴浓硫酸（减缓氧化作用） 。 36

3、亚硫酸钠溶液：称取 20g 亚硫酸钠 于 100mL 水中，使其溶解。此溶液最好于实验前临时配制，否则可使钼蓝溶液发生混浊。 3 7 磷标准储备液 （100g/mL） ： 精确称取在 105下干燥的磷酸二氧钾 （优级纯）0.439 4g，置于 1 000mL 容量瓶中，加水溶解并稀释至刻度。此溶液每毫升含 100g 磷。 3 8 磷标准使用液 （10 g/mL） ： 准确吸取 10mL 磷标准储备液， 置于 100mL 容量瓶中，加水稀释至刻度，混匀。此溶液每毫升含磷 10g。 4 仪器与设备 41 实验室常用设备。 中华人民共和国卫生部 19900319 批准 199 01201 实施 中华

4、人民共和国卫生部GB 123931990 42 分光光度计。 5 测定步骤 51 样品消化 511 称取各类食物的均匀干样 0.10.5g 或温样 25g 于 100mL 凯氏烧瓶中，加入 3mL 硫酸，3mL 高氯酸-硝酸消化液，置于消化炉上，瓶中液体初为棕黑色。待溶液变成无色或微带黄色清亮液体时，即消化完全。将溶液放冷，加20mL，冷却后转移至 100mL 容量瓶中，用水多次洗涤凯氏烧瓶，洗液合并倒入容量瓶内，加水至刻度，混匀。此溶液为样品测定液。 512 取与消化样品同量的硫酸 、高氯酸-硝酸消化液，按同一方法做空白溶液。 52 磷标准曲线 准确吸取磷标准使用液 0、0.5、1.0、2.

5、0、3.0、4.0、5.0mL（相当于含磷量 0、5、10、20、30、40、50 g） ，分别置于 20mL 具塞试管中，依次加入 2mL钼酸溶液摇匀，静置几秒钟。加入 1mL 亚硫酸钠溶液，1mL 对苯二酚溶液摇匀。加水至刻度，混匀。静置 0.5h 以后，在分光 光度计 660nm 波长处测定吸光度。以测出的吸光度对磷含量绘制标准曲线。 磷标准曲线 53 样品测定 准确吸取样品测定液 2mL 及同量的空白溶液（5.1.2） ，分别置于 20mL 具塞试管中，其余操作步骤同标准曲线（5.2），以测出的吸光度在标准曲线上查得未知液中的磷含量。 54 计算 10021=VVmcX （1） 式中：

6、X样品中磷含量，mg/100g； c由标准曲线查得或由回归方程算得样品测定液中磷含量，mg； V1样品消化液定容总体积，mL； V2测定用样品消化液的体积，mL； m样品质量，g。 6 结果的重复性 中华人民共和国卫生部 19900319 批准 199 01201 实施 GB 123931990 同一实验室平行测定或重复测定结果相对偏差绝对值5%。 第二篇 7 原理 食品中的有机物经酸破坏以后，磷在酸性条件 下与钼酸铵结合生成磷钼酸铵。用氯化亚锡、硫酸肼还原磷钼酸铵生成蓝色化合物钼蓝。蓝色强度与磷含量成正比，可进行比色定量。 8 试剂 本法所用试剂除注明外。均为 分析纯。所有实验用水均为去离子

7、水或蒸馏水。 81 硝酸。 82 硫酸：比重 1.84。 83 高氯酸。 84 15%硫酸溶液：取 15mL 硫酸，加入到 80mL 水中，混匀。放冷以后用水稀释至 100mL。 85 5%硫酸溶液：取 5mL 硫酸， 加入到 90mL 水中，混匀。放冷以后用水稀释至 100mL。 86 3%硫酸溶液：取 3mL 硫酸， 加入到 90mL 水中，混匀。放冷以后用水稀释至 100mL。 87 钼酸铵溶液：同 3.4。 88 氯化亚锡-硫酸肼混合液：称取 0.1g 氯化亚锡（SnCl22H2O） ，0.2g 硫酸肼（NH2NH2H2SO4） ，加 3%硫酸溶液并用其稀释至 100mL。此溶液置棕色

8、瓶中，贮冰箱至少可保存一个月。 8 9 磷标准储备液： 精确称取在 105干燥至恒重的磷酸二氢钾 （优级纯） 0.439 4g，用水溶解于 100mL 容量瓶中，并加水至刻度，混匀。此溶液每毫升含 1mg磷。置聚乙烯瓶贮于冰箱中保存。 810 磷标准使用液：准确吸取磷标准储备液 1.0 0mL 于 100mL 容量瓶中，用水稀释至刻度，混匀。此溶液每毫升含 10g 磷。 9 仪器 91 分光光度计。 10 操作方法 101 样品处理 称取各类食品的均匀干样 0.10.5g，湿样 5g 左右于 100mL 三角瓶中，加硝酸 15mL，高氯酸 2mL，硫酸 2mL，混匀。于电热板或电炉上小火加热消

9、化，瓶中液体开始变棕黑色时，不断沿瓶壁补加硝酸至有机质分解完全，加大火力，至消化液发生浓密的白烟，溶液澄明或微带黄色。消化液 放冷，加水 20mL。放冷以后转移至 100mL 容量瓶中，用水多次洗涤三角瓶，合并洗液于容量瓶中，加水至刻度，混匀。作为样品测定溶液。 取与消化样品同量的硝酸、高氯酸、硫酸，按同一方法做试剂空白溶液。 102 标准曲线绘制 中华人民共和国卫生部 19900319 批准 199 01201 实施 GB 123931990 取磷标准使用液 0、0.2、0.4、0.5、0.8、1.0m L（相当于磷 0、2、4、6、8、10g） ，分别置于 25mL 比色管中，各加水约 1

10、5mL、5%硫酸溶液 2.5mL，钼酸铵溶液 2mL，氯化亚锡-硫酸肼混合液 0.5mL，各管均补加水至 25mL，混匀。在室温放置 20min 以后，用 2cm 比色杯 ，在 660nm 波长处，以零管作参比，在分光光度计上分别测定其吸光管，以吸光度对磷含量绘制标准曲线。 103 样品测定 准确吸取样品测定溶液 12mL 及同量的试剂空白液，分别置于 25mL 比色管中，各加水约 15mL，5%硫酸溶液 2.5mL， 钼酸铵溶液 2mL，氯化亚锡-磷酸肼混合液 0.5mL。各管均补加水至 25mL，混匀。在室温放置 20min 以后，用 2cm比色杯，在 660nm 波长处，用 水作参比，在

11、分光光度计分别测定其吸光度。以测出的吸光度在标准曲线上查得未知液的磷含量。 104 计算 1000100)(210=mVVccX （2） 式中：X样品中磷含量，mg/100g； c由标准曲线上查得样品测定溶液中磷含量，g； c0空白溶液中磷含量，g； m样品质量，g； V1样品消化液的总体积，mL； V2测定用样品消化液的体积，mL。 附加说明： 本标准由中华人民共和国卫生部卫生监督司提 出，食品卫生标准分委员会审查通过。 本标准由中国预防医学科学院营养与食品卫生 研究所、北京市卫生防疫站起草。 本标准主要起草人王光亚、曲宁、涂小明。 本标准由卫生部委托技术归口单位卫生部食品卫生监督检验所负责解释。 中华人民共和国卫生部 19900319 批准 199 01201 实施