1、1考点 33 观察类实验和鉴定提取类实验直击考纲 1.能独立完成“生物知识内容表”所列的生物实验，包括理解实验目的、原理、方法和操作步骤，掌握相关的操作技能，并能将这些实验涉及的方法和技能等进行综合运用。2.具备验证简单生物学事实的能力，能对实验现象和结果进行分析、解释，并能对收集到的数据进行处理。3.具有对一些生物学问题进行初步探究的能力，包括运用观察、实验与调查、假说演绎、建立模型与系统分析等科学研究方法。1观察类实验操作流程模板2鉴定类实验的操作流程模板21观察类实验实验名称 细胞的状态 观察对象 染色剂生物材料(及特殊要求)观察细胞的减数分裂死细胞 无(为固定装片) 蝗虫精母细胞观察细
2、胞的有丝分裂死细胞染色体龙胆紫溶液(或醋酸洋红液)洋葱根尖分生区细胞染色前需漂洗干净用显微镜观察多种多样的细胞活或死细胞 细胞酵母菌细胞、水绵细胞、叶的保卫细胞、鱼的红细胞等观察植物细胞的质壁分离与复原活细胞紫色中央液泡的大小和原生质层的位置无(无需染色)紫色洋葱鳞片叶外表皮细胞2.鉴定提取类实验实验名称 试剂 颜色 生物材料 备注淀粉的鉴定 碘液 蓝色 脱色的叶片等若材料有颜色，需先脱色还原糖的鉴定 斐林试剂 砖红色沉淀 苹果或梨匀浆等现配现用、水浴加热脂肪的鉴定苏丹(或)染液橘黄(或红)色花生种子切片(或匀浆)需用高倍镜观察(匀浆不需用高倍镜观察)蛋白质的鉴定 双缩脲试剂 紫色 豆浆、稀蛋
3、清等先加 A 液，后加B 液，摇匀使用绿叶中色素的 提取液：无水 胡萝卜素：橙 新鲜的绿叶(如 加入二氧化硅是3提取和分离 乙醇；分离液：层析液黄色；叶黄素：黄色；叶绿素 a：蓝绿色；叶绿素 b：黄绿色菠菜叶) 为了研磨得更充分；碳酸钙可防止在研磨中色素被破坏DNA 的粗提取和鉴定二苯胺试剂 蓝色 鸡血细胞等沸水浴加热 5 min3关注洋葱在实验中的“一材多用”取材部位 实验名称 取材原因植物细胞的质壁分离和复原 外表皮细胞含紫色大液泡鳞片叶 使用高倍显微镜观察细胞的多样性细胞较大，外表皮细胞有大液泡，内表皮细胞有明显的细胞核叶管状叶 叶绿体中色素的提取和分离根观察根尖分生组织细胞的有丝分裂材
4、料易得，且分生区细胞分裂能力强，染色体数目少，易于观察4.辨析有关颜色反应类实验的五种颜色颜色 原理红还原糖斐林试剂 砖红色沉淀 水 浴 加 热 脂肪苏丹染液红色染色体(质)醋酸洋红液红色黄脂肪苏丹染液橘黄色叶绿体中色素分离的滤纸条中：胡萝卜素橙黄色，叶黄素黄色绿 酒精橙色的重铬酸钾溶液 灰绿色 在 酸 性 条 件 下叶绿体中色素分离的滤纸条中：叶绿素 b黄绿色，叶绿素 a蓝绿色蓝淀粉碘液蓝色DNA二苯胺试剂 蓝色 水 浴 加 热 紫染色体(质)龙胆紫溶液紫色蛋白质双缩脲试剂紫色45.常用试剂的种类及作用试剂 体积分数或质量浓度 作用原理 相关实验50% 洗去浮色(溶剂) 脂肪的鉴定70% 消
5、毒 微生物的培养95% 解离 观察细胞的有丝分裂酒精100% 溶解、提取色素叶绿体色素的提取和分离5% 营造酸性环境探究 pH 对酶活性的影响盐酸15% 解离 观察细胞的有丝分裂0.1 g/mL斐林试剂、双缩脲试剂的成分检测还原糖、蛋白质NaOH5% 营造碱性环境探究 pH 对酶活性的影响0.05 g/mL 斐林试剂的成分 检测还原糖CuSO40.01 g/mL 双缩脲试剂的成分 检测蛋白质6.常见疑难辨析(1)在观察类实验中低倍镜和高倍镜的使用情况如何？除观察类实验外，还有什么实验中也用到了显微镜呢？提示 观察类实验中除了“观察植物细胞的质壁分离和复原”使用低倍镜即可外，其余均需要使用高倍显
6、微镜；还有“脂肪的切片法鉴定” “探究培养液中酵母菌种群数量的动态变化”也用到了显微镜。(2)在“观察细胞的有丝分裂”实验中为什么应注意观察呈正方形的根尖分生区细胞？提示 呈正方形的根尖分生区细胞分裂旺盛，而呈长方形的细胞可能是伸长区或成熟区的细胞，没有分裂能力。(3)在观察减数分裂实验中为什么不宜选择动物的卵巢或植物的雌蕊？提示 因为雄配子的产生数量远远多于雌配子，更易观察到减数分裂。(4)为什么应选取成熟的植物细胞观察质壁分离与复原实验？提示 因其含有中央大液泡，易于发生质壁分离与复原的实验现象。(5)斐林试剂能否用于蛋白质的鉴定？为什么？提示 不能，因为用于蛋白质鉴定的双缩脲试剂 B 液
7、是 0.01 g/mL 的 CuSO4溶液，两种试剂的本质不同。斐林试剂的本质是新制的 Cu(OH)2，故应将甲液和乙液等量混匀后使用，5而双缩脲试剂的本质是碱性条件下的 Cu2 ，故应先加 A 液 1 mL 造成碱性环境，再加 B 液4 滴摇匀使用。(6)脂肪的鉴定是否一定要借助显微镜？提示 不一定，因为脂肪的鉴定有两个方案，可磨碎后在试管内鉴定，肉眼观察即可，也可做切片借助显微镜观察。(7)绿叶中色素的提取和分离有何区别？提示 前者用无水乙醇提取法，原理是色素能够溶于有机溶剂无水乙醇中；而后者用纸层析法，原理是色素在层析液中的溶解度不同，溶解度高的色素随层析液在滤纸条上扩散得快，反之扩散得
8、慢。题组一 观察类实验1(2018南京联考)在“观察植物细胞的质壁分离和复原”实验中，对紫色洋葱鳞片叶外表皮临时装片进行了三次观察和两次处理。下列有关叙述正确的是( )A第一次观察为低倍镜观察，后两次为高倍镜观察B第一次处理滴加的液体为清水，第二次滴加的液体为质量浓度为 0.3 g/mL 的蔗糖溶液C若将紫色洋葱鳞片叶的外表皮换成内表皮，则不会发生质壁分离D紫色洋葱鳞片叶外表皮细胞中不属于原生质层的有细胞壁、细胞核和细胞液答案 D解析 “观察植物细胞的质壁分离和复原”实验中，一般需要进行三次观察，第一次是正常细胞的观察，第二次是质壁分离细胞的观察，第三次是质壁分离复原细胞的观察，三次观察均为低
9、倍镜观察，A 错误；第一次处理滴加的液体为质量浓度为 0.3 g/mL 的蔗糖溶液，观察质壁分离现象，第二次滴加的液体为清水，观察质壁分离复原现象，B 错误；紫色洋葱鳞片叶的内表皮细胞也会发生质壁分离，但不含色素，现象不便于观察，C 错误。2如图表示洋葱根尖细胞有丝分裂装片的制作与观察，下列相关叙述不正确的是( )AA 过程所用的解离液是以质量分数 15%的盐酸和体积分数为 95%的酒精配制而成的BB 过程的主要目的是洗去解离液，防止解离过度C在显微镜下可以看到一个细胞连续分裂的过程D在低倍镜下找到物像后，可以换用高倍镜继续观察答案 C6解析 解离液是以质量分数为 15%的盐酸和体积分数为 9
10、5%的酒精配制而成的，A 正确；B过程为漂洗，其主要目的是洗去解离液，防止解离过度，B 正确；在显微镜下看到的每一个细胞都已被杀死，C 错误；在低倍镜下找到物像后，可以换用高倍镜进行更大放大倍数的观察，D 正确。3.下面是用显微镜观察时的几个操作步骤，要把显微镜视野下的标本从下图中的 A 转为B，其正确的操作步骤是( )向右上方移动载玻片 调节反光镜使视野明亮 转动转换器 调节细准焦螺旋 调节粗准焦螺旋 向左下方移动载玻片A B C D答案 C解析 从题图中可以看出，A 图中的细胞比 B 图中的多而小，说明 A 图是低倍镜下的图像，B 图是 A 图左下方的细胞在高倍镜下的图像。所以应向左下方移
11、动装片，然后转动转换器换成高倍镜，由于高倍镜下视野较暗，可调节反光镜使视野明亮，在高倍镜下调节细准焦螺旋使物像清楚，所以顺序是。题组二 鉴定提取类实验4(2018广东模拟)下列有关组织细胞中化合物鉴定实验的叙述，不正确的是(多选)( )A蛋白酶和蛋白质的混合溶液中加入双缩脲试剂后，会产生紫色反应B将斐林试剂加入果糖溶液中后，溶液呈现无色，水浴加热后有砖红色沉淀生成C脂肪的检测中使用体积分数为 50%的酒精是为了溶解组织中的脂肪D酵母菌进行有氧呼吸和无氧呼吸的产物都能用酸性重铬酸钾溶液来鉴定答案 BCD解析 蛋白酶本身就是蛋白质，因此用双缩脲试剂鉴定会产生紫色反应，A 正确；斐林试剂本身具有蓝色
12、，因此将斐林试剂加入果糖溶液中后，溶液呈现蓝色，B 错误；脂肪的检测中滴加 50%的酒精溶液是为了洗去浮色，C 错误；酸性重铬酸钾溶液只能用于鉴定酒精，酵母菌有氧呼吸不产生酒精，D 错误。5(2018扬州模拟)以下关于实验步骤的叙述(试剂、药品的浓度和用量符合要求)，正确的是( )A鉴定蛋白质：豆浆CuSO 4溶液NaOH 溶液观察颜色变化B鉴定还原糖：苹果匀浆CuSO 4溶液NaOH 溶液水浴加热观察颜色变化C提取绿叶中的色素：剪碎绿叶SiO 2CaCO 3无水乙醇研磨过滤7D观察植物细胞有丝分裂：制片解离漂洗染色显微镜观察答案 C解析 蛋白质的鉴定应先加 NaOH 溶液，再加 CuSO4溶
13、液，A 错误；用斐林试剂鉴定还原糖时，应将 NaOH 溶液和 CuSO4溶液等量混合使用，B 错误；提取绿叶中的色素的流程为剪碎绿叶SiO 2CaCO 3无水乙醇研磨过滤，C 正确；观察植物细胞有丝分裂：解离漂洗染色制片显微镜观察，D 错误。6(2018淮安期末)现提供可配制斐林试剂的溶液：甲液(0.1 gmL1 的 NaOH 溶液)、乙液(0.05 gmL 1 的 CuSO4溶液)以及蒸馏水，如果充分利用上述试剂及必需的实验用具，可灵活性地鉴别出下列哪些物质( )葡萄糖 蔗糖 胃蛋白酶 RNAA只有 B和C和 D、和答案 C解析 葡萄糖是还原糖，可以用斐林试剂鉴定，所以用上述试剂可以检测，正确；蔗糖是非还原糖，不能用斐林试剂鉴定，错误；胃蛋白酶是蛋白质，可以用双缩脲试剂鉴定，可以用上述试剂鉴定，但使用时需要将斐林试剂的乙液稀释为质量分数为 0.01 gmL1 ，正确；以上试剂只能鉴定还原糖和蛋白质，而不能鉴定 RNA，错误。
