1、NORME INTERNATIONALE ISO 11266 Premire dition 1994-09-l 5 Qualit du sol - Lignes directrices relatives aux essais en laboratoire pour la biodgradation de produits chimiques organiques dans le sol sous conditions arobies Soi1 quality - Guidance on laboratory testing for biodegradation of organic chem
2、icals in soi/ under aerobic conditions Numro de rfrence ISO 11266: 1994(F) ISO 11266:1994(F) Avant-propos LISO (Organisation internationale de normalisation) est une fdration mondiale dorganismes nationaux de normalisation (comits membres de IISO). Llaboration des Normes internationales est en gnral
3、 confie aux comits techniques de IISO. Chaque comit membre intress par une tude a le droit de faire partie du comit technique cr cet effet. Les organisations internationales, gouvernementales et non gouvernementales, en liaison avec IISO participent galement aux travaux. LISO collabore troitement av
4、ec la Commission lectrotechnique internationale (CEI) en ce qui concerne la normalisation lectrotechnique. Les projets de Normes internationales adopts par les comits techniques sont soumis aux comits membres pour vote. Leur publication comme Normes internationales requiert lapprobation de 75 % au m
5、oins des comits membres votants. La Norme internationale ISO Il 266 a t labore par le comit technique ISORC 190, Qualit du sol, sous-comit SC 4, Mthodes biologiques. Lannexe A de la prsente Norme internationale est donne uniquement titre dinformation. 0 ISO 1994 Droits de reproduction rservs. Sauf p
6、rescription diffrente, aucune partie de cette publi- cation ne peut tre reproduite ni utilise sous quelque forme que ce soit et par aucun pro- cd, lectronique ou mcanique, y compris la photocopie et les microfilms, sans laccord crit de lditeur. Organisation internationale de normalisation Case posta
7、le 56 l CH-121 1 Genve 20 l Suisse Internet central isocs.iso.ch x.400 c=ch; a=400net; p=iso; o=isocs; s=central Version franaise tire en 1996 Imprim en Suisse ii 0 ISO ISO 11266:1994(F) Introduction Les produits chimiques organiques peuvent tre introduits dans le sol intentionnellement ou accidente
8、llement, aprs quoi ils peuvent, ou non, se dgrader biologiquement. Pour des produits chimiques qui se dgradent, la vitesse de dgradation peut varier considrablement, en fonction non seulement de la structure molculaire du produit chimique, mais galement des proprits du sol telles que la temprature,
9、leau et la disponibilit en oxygne qui influencent lactivit microbienne. Lactivit des microorganismes joue souvent un rle majeur dans les processus de dgradation. II est ncessaire de disposer dessais en laboratoire pour valuer la vitesse et ltendue de la biodgradation et donc la persistance de produi
10、ts chimiques organiques dans le sol. De nombreuses mthodes de laboratoire sont disponibles pour lestimation de la biodgradation arobie, mais elles diffrent considrablement selon les circonstances spcifiques, par exemple le type de sol, la temprature et les dures dincubation. La prsente Norme interna
11、tionale fournit des lignes directrices gnrales pour le choix et de dterminer la biodgradation de produits chimiques organiques dans des sols arobies. la conduite dessais afin Au moment de la rdaction, un accord sur la mthodologie pour anarobies est insuffisant pour prparer des lignes directrices sur
12、 ce les essais de biodgradabilit dans les sols sujet. Page blanche NORME INTERNATIONALE ISO ISO 11266: 1994(F) Qualit du sol - Lignes directrices relatives aux essais en laboratoire pour la biodgradation de produits chimiques organiques dans le sol sous conditions arobies 1 Domaine dapplication La p
13、rsente Norme internationale fournit des lignes directrices sur le choix et la conduite de mthodes dessai appropries pour la dtermination de la biodgradation de produits chimiques organiques dans des sols arobies. Elle ne dcrit aucune mthode dessai spcifique. 2 Rfrences normatives Les normes suivante
14、s contiennent des dispositions qui, par suite de la rfrence qui en est faite, constituent des dispositions valables pour la prsente Norme internationale. Au moment de la publication, les ditions indiques taient en vigueur. Toute norme est sujette rvision et les parties prenantes des accords fonds su
15、r la prsente Norme internationale sont invites rechercher la possibilit dappliquer les ditions les plus rcentes des normes indiques ci-aprs. Les membres de la CEI et de IlSO possdent le registre des Normes internationales en vigueur un moment donn. ISO 9408:1991, Qualit de leau - valuation, en milie
16、u aqueux, de la biodgradabilit arobie ultime des composs organiques - Mthode par dtermination de la demande en oxygne dans un respiromtre ferm. ISO 10381-6: 1993, Qualit du sol - chantillonnage - Partie 6: Lignes directrices pour la collecte, la manipulation * et la consetvation de sols destins une
17、tude en laboratoire des processus microbiens arobies. ISO 10390:1994, Qualit du sol - Dtermination du pH. ISO 10694), Qualit du sol - Dosage du carbone organique et du carbone total aprs combustion sche (analyse lmentaire). ISO 11260:1994, Qualit du sol - Dtermination de la capacit dchange ca tioniq
18、ue effective et du taux de saturation en bases changeables laide dune solution de chlorure de baryum. ISO 11261:-l), Qualit du sol - Dosage de lazote total - Mthode de Keldahl modifie. ISO 11274:-l), Qualit du sol - Dtermination de la caractristique de la rtention deau - Mthodes de laboratoire. ISO
19、11277:-“, Qualit du soi - Dtermination de la rpartition granulomtrique de la matire minrale des sols - Mthode par tamisage et sdimentation aprs limination des sels solubles, de la matire organique et des carbonates. ISO 11461:-), Qualit du sol - Dtermination de la teneur volumique en eau du sol - Mt
20、hode gravimtrique. ) publier. ISO 11266: 1994(F) 0 ISO 3 Dfinitions Pour les besoins de la prsente Norme internationale, les dfinitions suivantes sappliquent. 3.1 biodgradation: Dgradation molculaire dune substance organique rsultant des actions complexes dorganismes vivants. 3.2 biodgradation prima
21、ire: Dgradation dune substance un point suffisant pour lui retirer des proprits caractristiques de la molcule parent. En pratique, cela est dtermin par analyse, comme perte du compos parent ou de quelque fonction spcifique du compos parent. 3.3 biodgradation ultime: Dissociation dun compos organique
22、 en dioxyde de carbone, eau, oxydes ou sels minraux de tout autre lment prsent, et produits associs aux processus mtaboliques normaux des microorganismes. 3.4 persistance: Dure de sjour dune espce chimique dans une zone spcifiquement dfinie de lenvironnement. 3.5 dure de disparition DT-50: Temps nce
23、ssaire la concentration dun compos donn pour tre rduite de 50 % de sa valeur dorigine. 3.6 dure de disparition DT-90: Temps ncessaire la concentration dun compos donn pour tre rduite de 90 % de sa valeur dorigine. 3.7 rsidus lis ; rsidus non extractibles: Espces chimiques dans les vgtaux et les sols
24、 provenant par exemple de molcules organiques qui ne sont pas extraites par des mthodes qui ne changent pas de faon significative la nature chimique de ces rsidus. Ces rsidus non extractibles sont considrs pour exclure des fragments recycls par des cheminements mtaboliques menant aux produits natur
25、els. (Pour des exemples et des informations supplmentaires, voir 3 en annexe A). 3.8 minralisation: Dgradation complte dune substance organique en produits inorganiques. 4 Principe Aprs ajout du compos dessai un sol choisi (5.1), la biodgradation est mesure dans des conditions arobies (voir ISO 9408
26、). Lutilisation dun compos radiomarqu permet de dterminer la vitesse de disparition du compos dessai et la formation de mtabolites, de dioxyde de carbone et dautres rsidus volatils et non extractibles. II convient didentifier les mtabolites par des mthodes danalyse appropries. La disparition du comp
27、os dessai peut galement tre suivie par une analyse spcifique. 5 Matriaux 5.1 Sol Si possible, il convient que les sols choisis pour lessai proviennent directement du site o le produit chimique est susceptible dtre appliqu. Cependant, sil nest pas possible dobtenir des chantillons propres en raison d
28、un sol pralablement contamin, il convient que le sol choisi ait des proprits comparables. II convient de prendre en compte Ihistorique du sol utilis et de noter des changements rcents, tels que des pratiques de culture et des applications de pesticides. II convient de fournir des donnes prcises sur
29、le site de prlvement, son emplacement, la prsence de vgtaux ou de rcoltes prcdentes, la date de prlvement de lchantillon et la profondeur de lchantillonnage. 0 ISO ISO 11266: 1994(F) 5.1 .d Caractristiques du soll Une connaissance des caractristiques du sol est essentielle pour une interprtation com
30、plte des rsultats ltude. II est recommand, en consquence, quau moins les essais suivants soient effectus sur le sol choisi. de Proprits physiques: 1) analyse granulomtrique conformment IISO 11277; 2) teneur en eau conformment IISO 11461; 3) capacit de rtention deau et/ou caractristique de rtention d
31、eau conformment IISO 11274. b) Proprits chimiques: 1) pH du sol conformment IISO 10390 ou pH dans une solution de KCI ou de CaCI,; 2) teneur en matire organique conformment lIS0 10694; 3) capacit dchange cationique (CEC) conformment IISO 11260; 4) teneur en azote conformment IISO 11261. C) Proprits
32、biologiques: II convient de dterminer lactivit microbienne soit en utilisant un compos de rfrence biodgradable appropri, soit en dterminant la biomasse active selon une Norme internationale qui sera publie ultrieurement. NOTE 1 Il peut tre utile de dterminer lactivit microbienne avant de mener un es
33、sai de biodgradation et de dterminer si des modifications de lactivit microbienne se sont produites durant lessai. 5.2 Substance dessai Idalement, il convient que les substances soumises essai soient des composs purs (puret chimique 98 %). Il est galement recommand de considrer linfluence de tous su
34、pports ou ingrdients de formulation. Les donnes suivantes concernant les composs sont importantes pour linterprtation des rsultats: - nom (IUPAC); - structure; - masse molculaire relative; - donnes sur la puret; - stabilit dans leau et dans les solvants organiques; - solubilit dans leau; - pression
35、de vapeur; - coefficient de partage octanol/eau; - constante de sorption; - constante de dissociation dacide; - pour des produits chimiques radio marqus: nature et position du marquage, activit spcifique, puret radiochimique. ISO 11266: 1994(F) 0 RSO NOTE 2 Les rsultats des tudes utilisan t des matr
36、ia ux radiomarqus dpendent de la position du donc de positionner le radiomarquage. II convie marquage de telle faon que le processus de tra nsformation puisse tre suivi aussi loin que possible. nt 6 Prlvement, manipulation et conservation du sol Il est important de suivre IISO 10381-6 afin de garant
37、ir que la viabilit des microorganismes du sol est optimale pendant le prlvement. 7 Mode opratoire 7.1 Ajout de la substance dessai La ajo concentration utiliser dans les essais dpend des #ute de plusieurs faons : objectifs exprimentaux. La substance dessai peut tre a) dans leau (selon la solubilit d
38、ans leau); b) dans des solvants organiques (selon la solubilit dans le solvant). II convient que la quantit de solvant utilise soit gale au minimum ncessaire pour lapplication du compos. II convient de prendre en compte la toxicit et la biodgradabilit ventuelles du solvant; C) directement sous forme
39、 solide, par exemple mlange du sable de quartz. II convient de veiller viter dajouter le matriau dessai des niveaux toxiques. Les composs qui sont toxiques ou ont des effets inhibiteurs vis-vis des microorganismes du sol la concentration utilise, vont interfrer avec la dtermination de la biodgradabi
40、lit. De mme, si la substance est ajoute leau, il convient de veiller viter un excs deau ou un compactage du sol. 7.2 Incubation Le sol trait est divis en aliquotes dau moins 50 g (quivalent masse sche) et plac dans des flacons dincubation. En gnral, il convient dincuber au moins deux rptitions par p
41、oint dchantillonnage. Cependant, laccroissement du nombre de rptitions augmente la fidlit de lessai. Lorsquon utilise un matriau dessai non marqu, il convient de raliser simultanment des tmoins. II convient que les tmoins contiennent du sol plus la quantit deau ou de solvant qui a t utilise pour lap
42、plication du matriau dessai dans les rptitions traites. 7.2.1 Systme dincubation Le systme dincubation utiliser dpend de la (des) mthode(s) danalyse et du mesurage. Plusieurs systmes sont disponibles et certains dentre eux sont numrs en l et 2 de lannexe A. II convient que le systme dincubation util
43、is garantisse quune quantit doxygne suffisante soit prsente afin de maintenir des conditions arobies. Sil est ncessaire de faire la distinction entre dgradation biologique et autre dgradation ou processus de dissipation, il convient alors de raliser une incubation strile. Si lvaluation du dioxyde de
44、 carbone est utilise pour suivre le processus de dgradation, il convient de faire attention losquon utilise des sols alcalins. Ces sols peuvent absorber le dioxyde de carbone, aboutissant ainsi une sous-estimation de la production de dioxyde de carbone. Si des mesurages de la minralisation sont effe
45、ctus avec un compos non radiomarqu, il convient de veiller la vitesse de minralisation du tmoin et lventuelle production de dioxyde de carbone provenant de carbonates inorganiques. NOTE 3 Un certain nombre de systmes est dcrit en l et 2 de lannexe A. 0 ISO ISO 11266: 1994(F) 7.2.2 Conditions dincuba
46、tion 7.2.2.1 clairement Lincubation est habituellement effectue lobscurit afin dviter une croissance algale sur la surface du sol. Cependant, si lapport des algues la biodgradation ncessite dtre pris en compte, il convient de choisir des conditions dclairement appropries. Dans de telles conditions,
47、la contribution la dgradation par photolyse peut tre significative et il convient den tenir compte. 7.2.2.2 Temprature II convient de choisir la temprature dincubation en fonction des objectifs spcifiques de ltude. En gnral, lactivit microbienne maximale du sol se situe entre 25 “C et 35 “C. Cependant, pour des sols provenant de zones tempres, une temprature situe entre 10 “C et 25O C est approprie et plus reprsentative des conditions naturelles. II convient de mesurer et denregistrer les tempratures m
