1、 ISO 2014 Qualit du sol Effets des polluants vis-vis des vers de terre Partie 3: Lignes directrices relatives la dtermination des effets sur site Soil quality Effects of pollutants on earthworms Part 3: Guidance on the determination of effects in field situations NORME INTERNATIONALE ISO 11268-3 Deu
2、xime dition 2014-10-15 Numro de rfrence ISO 11268-3:2014(F) ISO 11268-3:2014(F)ii ISO 2014 Tous droits rservs DOCUMENT PROTG PAR COPYRIGHT ISO 2014 Droits de reproduction rservs. Sauf indication contraire, aucune partie de cette publication ne peut tre reproduite ni utilise sous quelque forme que ce
3、 soit et par aucun procd, lectronique ou mcanique, y compris la photocopie, laffichage sur linternet ou sur un Intranet, sans autorisation crite pralable. Les demandes dautorisation peuvent tre adresses lISO ladresse ci-aprs ou au comit membre de lISO dans le pays du demandeur. ISO copyright office
4、Case postale 56 CH-1211 Geneva 20 Tel. + 41 22 749 01 11 Fax + 41 22 749 09 47 E-mail copyrightiso.org Web www.iso.org Publi en Suisse ISO 11268-3:2014(F)Sommaire Page Avant-propos iv Introduction v 1 Domaine dapplication . 1 2 Rfrences normatives . 1 3 Units 1 4 Principe 1 5 Ractifs et matriel 2 6
5、Appareillage 2 7 Mode opratoire 3 7.1 chantillonnage des populations de vers de terre . 3 7.2 Conservation . 3 7.3 Dtermination de la biomasse . 3 8 Prparation de lessai 3 8.1 Site dessai . 3 8.1.1 Slection et description . 3 8.1.2 Conception exprimentale 4 8.1.3 Entretien des terrains dessai . 6 9
6、Mode opratoire 6 9.1 Application de la substance dessai . 6 9.2 Dates dchantillonnage 7 9.3 Substance de rfrence 7 10 valuation des donnes . 8 10.1 Effets 8 10.2 Identification des espces de vers de terre 8 10.3 Dtermination de la biomasse avec le contenu du tube digestif 9 11 Calcul et expression d
7、es rsultats 9 12 Validit de lessai 9 13 Rapport dessai . 9 Annexe A (informative) Exigences supplmentaires pour les essais de pesticides .11 Annexe B (informative) Informations concernant les espces ou communauts spcifiques de vers de terre dans diffrentes rgions climatiques ou gographiques 12 Bibli
8、ographie .13 ISO 2014 Tous droits rservs iii ISO 11268-3:2014(F) Avant-propos LISO (Organisation internationale de normalisation) est une fdration mondiale dorganismes nationaux de normalisation (comits membres de lISO). Llaboration des Normes internationales est en gnral confie aux comits technique
9、s de lISO. Chaque comit membre intress par une tude a le droit de faire partie du comit technique cr cet effet. Les organisations internationales, gouvernementales et non gouvernementales, en liaison avec lISO participent galement aux travaux. L ISO collabore troitement avec la Commission lectrotech
10、nique internationale (IEC) en ce qui concerne la normalisation lectrotechnique. Les procdures utilises pour laborer le prsent document et celles destines sa mise jour sont dcrites dans les Directives ISO/IEC, Partie 1. Il convient en particulier de prendre note des diffrents critres dapprobation req
11、uis pour les diffrents types de documents ISO. Le prsent document a t rdig conformment aux rgles de rdaction donnes dans les Directives ISO/IEC, Partie 2 (voir www. iso.org/directives). Lattention est appele sur le fait que certains des lments du prsent document peuvent faire lobjet de droits de pro
12、prit intellectuelle ou de droits analogues. LISO ne saurait tre tenue pour responsable de ne pas avoir identifi de tels droits de proprit et averti de leur existence. Les dtails concernant les rfrences aux droits de proprit intellectuelle ou autres droits analogues identifis lors de llaboration du d
13、ocument sont indiqus dans lIntroduction et/ou dans la liste des dclarations de brevets reues par lISO (voir www.iso.org/brevets). Les appellations commerciales ventuellement mentionnes dans le prsent document sont donnes pour information, par souci de commodit, lintention des utilisateurs et ne saur
14、aient constituer un engagement. Pour une explication de la signification des termes et expressions spcifiques de lISO lis lvaluation de la conformit, ou pour toute information au sujet de ladhsion de lISO aux principes de lOMC concernant les obstacles techniques au commerce (OTC), voir le lien suiva
15、nt: Avant-propos - Informations supplmentaires. Le comit charg de llaboration du prsent document est lISO/TC 190, Qualit du sol, souscomit SC 4, Mthodes biologiques. Cette deuxime dition annule et remplace la premire dition (ISO 11268-3:1999), qui a fait lobjet dune rvision technique. LISO 11268 com
16、prend les parties suivantes, prsentes sous le titre gnral Qualit du sol Effets des polluants vis-vis des vers de terre: Partie 1: Dtermination de la toxicit aigu vis-vis de Eisenia fetida/Eisenia andrei Partie 2: Dtermination des effets sur la reproduction de Eisenia fetida/Eisenia andrei Partie 3:
17、Lignes directrices relatives la dtermination des effets sur siteiv ISO 2014 Tous droits rservs ISO 11268-3:2014(F) Introduction Lessai sur le terrain relatif aux vers de terre est fond sur une mthode dveloppe pour les essais de pesticides 6par le Centre fdral allemand de recherches biologiques dans
18、les domaines agricole et forestier. Il a ensuite t normalis lchelle internationale par lOrganisation Internationale de Normalisation (ISO) en tenant compte des rsultats et des recommandations dun atelier international sur l cotoxicologie des vers de terre , qui sest tenu Sheffield (Royaume-Uni) en 1
19、991, 7afin de servir doutil pour la caractrisation de la qualit du sol. Lexprience acquise a dmontr que la performance pratique de lessai peut tre amliore. Lors de deux runions organises par le Centre fdral de recherches biologiques dans les domaines agricole et forestier (Braunschweig, 2002) et par
20、 lAgence fdrale allemande de protection des consommateurs et de salubrit des aliments (Lille, 2005), un groupe de travail ad hoc constitu dexperts provenant de diffrents pays et institutions a prsent des recommandations prendre en compte si la rvision est approuve par vote lors de la revue priodique
21、. Un compte-rendu des discussions, des commentaires et des recommandations a t publi 8 . Lorsque des vers de terre et dautres organismes sont utiliss comme bio-indicateurs pour valuer la qualit du sol dun site en tant quhabitat pour les organismes du sol, des lignes directrices concernant les modes
22、opratoires dextraction et des conseils pour planifier une tude sont donns dans les normes ISO 23611-1 ISO 23611-6. ISO 2014 Tous droits rservs v Qualit du sol Effets des polluants vis-vis des vers de terre Partie 3: Lignes directrices relatives la dtermination des effets sur site 1 Domaine dapplicat
23、ion La prsente partie de lISO 11268 dcrit des techniques utilises pour tudier les effets de substances sur les vers de terre sur le terrain et constitue une base pour la dtermination des effets des produits chimiques appliqus ou incorpors au sol, y compris des injections dans le sol ou lenfouissemen
24、t de granuls par semoirs. 2 Rfrences normatives Les documents ci-aprs, dans leur intgralit ou non, sont des rfrences normatives indispensables lapplication du prsent document. Pour les rfrences dates, seule ldition cite sapplique. Pour les rfrences non dates, la dernire dition du document de rfrence
25、 sapplique (y compris les ventuels amendements). ISO 10390, Qualit du sol Dtermination du pH ISO 10694, Qualit du sol Dosage du carbone organique et du carbone total aprs combustion sche (analyse lmentaire) ISO 11274, Qualit du sol Dtermination des caractristiques de la rtention en eau Mthodes de la
26、boratoire ISO 11277, Qualit du sol Dtermination de la rpartition granulomtrique de la matire minrale des sols Mthode par tamisage et sdimentation ISO 23611-1, Qualit du sol Prlvement des invertbrs du sol Partie 1: Tri manuel et extraction au formol des vers de terre 3 Units Les taux dapplication des
27、 substances dessai sont exprims en kilogrammes par hectare (kg/ha) ou en litres par hectare (l/ha) de substance applique. Lorsquil sagit dun matriau compos, le taux dapplication est exprim en fonction de la quantit de matire active applique. Les concentrations de substances dessai incorpores dans le
28、 sol sont donnes en mg de matire active (m.a.)/kg de masse sche du sol, d m . Les mmes units sont utilises pour comparer les rsultats du prsent essai sur le terrain avec ceux obtenus lors dtudes en laboratoire. 4 Principe Les espces, le nombre et la biomasse de vers de terre recueillis par parcelles
29、 dchantillonnage traites avec la substance dessai sont compars ceux recueillis dans les parcelles tmoins et dans les parcelles traites de rfrence. Lchantillonnage est effectu comme spcifi dans lISO 23611-1. La dure de NORME INTERNATIONALE ISO 11268-3:2014(F) ISO 2014 Tous droits rservs 1 ISO 11268-3
30、:2014(F) ltude dpend des caractristiques de la substance dessai, mais elle est gnralement fixe 1 anne. Les dates dchantillonnage sont choisies pour concider avec les priodes dactivit des vers de terre. Lessai est ralis avec un plan dexprience complet randomis quatre rplicats par traitement. Lanalyse
31、 statistique de la population de chaque espce prleve chaque chantillonnage permet de dterminer les effets des traitements en comparant labondance, la biomasse et la diversit entre les parcelles tmoins et traites. NOTE Lessai comporte galement des chantillons de vers de terre prlevs dans des parcelle
32、s traites pour une analyse des rsidus, si celle-ci est approprie. 5 Ractifs et matriel 5.1 Formol solution de formaldhyde, 4 % (fraction volumique). 5.2 Formol solution de formaldhyde, 37 % (fraction volumique). 5.3 thanol, 70 % (fraction volumique). 5.4 Carbendazime, applique par exemple sous forme
33、 de Derosal 1)(formulation 360 g m.a./l) comme substance de rfrence. 6 Appareillage Utiliser du matriel courant de laboratoire ainsi que ce qui suit. 6.1 Rcipients en plastique (250 ml et 500 ml) pour conserver les vers de terre. 6.2 Gants en plastique. 6.3 Pinces. 6.4 Morceau de plastique pais (1 m
34、 2 2 m 2 ). 6.5 Bche ou pelle. 6.6 Microscope de dissection faible grossissement (10 fois 40 fois). 6.7 Balance (0,01 g 200 g). 6.8 Bidon deau (de prfrence 20 l) rempli deau (20 l par parcelle dchantillonnage). 6.9 Crayon, carnet de notes, marqueur indlbile, tiquettes. 6.10 Thermomtre, par exemple p
35、our mesurer la temprature de lair. 6.11 Armoire de schage, pour la dtermination de la teneur en eau du sol. 1) Derosal est un exemple de produit adapt disponible dans le commerce. Ces informations sont donnes titre pratique aux utilisateurs du prsent document et ne signifient nullement lapprobation
36、de ce produit par lISO.2 ISO 2014 Tous droits rservs ISO 11268-3:2014(F) 7 Mode opratoire 7.1 chantillonnage des populations de vers de terre Lchantillonnage des vers de terre est ralis en combinant deux mthodes diffrentes: le tri manuel et lextraction au formol. Sur la base de plusieurs tudes compa
37、ratives, cette combinaison est clairement recommande dans les diverses revues relatives lcologie des vers de terre (par exemple, 9 , 10 , 13 ). Pour des informations dtailles concernant les modes opratoires dextraction, voir lISO 23611-1. Il convient de procder lchantillonnage des priodes de lanne d
38、urant lesquelles les animaux ne sont pas contraints par les conditions environnementales (cest-dire faible teneur en eau du sol et/ou tempratures extrmement leves ou extrmement basses) entrer en diapause (cest-dire quils ne ragissent pas au formol). En raison de la taille individuelle des vers, une
39、grande parcelle doit tre identifie: un carr de 50 cm 50 cm suffit souvent dans la zone holarctique o la plupart des verres de terre adultes ont une longueur approximativement comprise entre 1 cm et 20 cm. Toutefois, dans les endroits o la densit en vers de terre est faible par exemple les sols faibl
40、e pH ( 4,5) ou qui sont exploits par lhomme comme les lieux de culture, de plus grandes parcelles (cest-dire de 1 m 2 ) sont recommandes. En revanche, dans les endroits o la densit en vers de terre est leve (par exemple les nombreuses prairies des rgions tempres), une parcelle plus petite de 0,125 m
41、 2suffit 12 . Les chantillons individuels sont prlevs de manire alatoire sur la parcelle dessai. NOTE Si, dans des situations particulires comme dans le Sud de lEurope, les espces anciques napparaissent pas, un chantillonnage du sol par tri manuel jusqu une profondeur de 30 cm suffit. Lorsque les co
42、nditions dchantillonnage ne sont pas optimales, par exemple lorsque la teneur en eau du sol est extrmement faible ou lorsque la couche de racines est dense, le tri manuel peut mme tre la seule mthode dextraction efficace. Lorsque, dans une mthode dchantillonnage thologique, seul le formol est utilis
43、, il convient de procder un contrle defficacit supplmentaire par tri manuel comme dcrit dans la prsente Norme internationale. Un tri manuel combin la mthode dextraction au formol donne gnralement des rsultats satisfaisants. Lorsquune combinaison de tri manuel et dune mthode extraction est utilise, a
44、ucun contrle defficacit supplmentaire nest ncessaire. 7.2 Conservation La conservation doit tre effectue conformment lISO 23611-1. 7.3 Dtermination de la biomasse La biomasse doit tre dtermine conformment lISO 23611-1. 8 Prparation de lessai 8.1 Site dessai 8.1.1 Slection et description En gnral, il
45、 convient que le site dessai soit aussi homogne que possible afin damliorer la fiabilit statistique de lessai. Il convient dviter les gradients dans les conditions environnementales (par exemple des fosss adjacents), linfluence des frondaisons comme en lisire de bois ou les ornires compactes laisses
46、 par les tracteurs sur le site. Il convient que le site soit situ sur un terrain plat et quil prsente les mmes caractristiques de vgtation et de composition du sol sur toute sa surface. Les prairies sont le site dtude prfrentiel pour valuer les effets de substances sur les vers de terre. Dans les pr
47、airies, la densit et la diversit des vers de terre sont gnralement plus leves et plus stables que dans les terres arables, ce qui facilite la dtection deffets significatifs sur les populations de vers de terre. Si les effets sur les vers de terre sont observs sur le site dune prairie, il convient que ISO 2014 Tous droits rservs 3 ISO 11268-3:2014(F) lvaluation affine des risques comprenne des scnarios spcifiques (cultures et rgions)
