1、NORME INTERNATIONALE ISO 142404 Premire dition 1997-01-I 5 Qualit du sol - Dtermination de la biomasse microbienne du sol Partie 1: Mthode par respiration induite par le substrat Soi1 quality - Determination of soi1 microbial biomass - Part 1: Substra te-induced respiration method Numro de rfrence I
2、SO 14240-1:1997(F) ISO 14240=1:1997(F) Avant-propos LIS0 (Organisation internationale de normalisation) est une fdration mondiale dorganismes nationaux de normalisation (comits membres de IISO). Llaboration des Normes internationales est en gnral confie aux comits techniques de IISO. Chaque comit me
3、mbre intress par une tude a le droit de faire partie du comit technique cr cet effet. Les organisations internationales, gouvernementales et non gouvernementales, en liaison avec IISO participent galement aux travaux. LISO collabore troitement avec la Commission lectrotechnique internationale (CEI)
4、en ce qui concerne la normalisation lectrotechnique. Les projets de Normes internationales adopts par les comits techniques sont soumis aux comits membres pour vote. Leur publication comme Normes internationales requiert lapprobation de 75 % au moins des comits membres votants. La Norme internationa
5、le ISO 14240-I a t labore par le comit technique ISOTTC 190, Qualit du sol, sous- comit SC 4, Mthodes biologiques. LISO 14240 comprend les parties suivantes, prsentes sous le titre gnral Qualit du sol- Dtermination de /a biomasse microbienne du sol: Partie 1: Mthode par respiration induite par le su
6、bstrat Partie 2: Mthode par fumigation-extraction Lannexe A de la prsente partie de IISO 14240 est donne uniquement titre dinformation. 0 ISO 1997 Droits de reproduction rservs. Sauf prescription diffrente, aucune partie de cette publi- cation ne peut tre reproduite ni utilise sous quelque forme que
7、 ce soit et par aucun pro- cd, lectronique ou mcanique, y compris la photocopie et les microfilms, sans laccord crit de lditeur. Organisation internationale de normalisation Case postale 56 l CH-121 1 Genve 20 l Suisse Internet central iso.ch x.400 c=ch; a=400net; p=iso; o=isocs; s=central Imprim en
8、 Suisse ISO 14240-l : 1997(F) Introduction Le sol se compose dlments vivants et non vivants qui existent dans un milieu complexe et htrogne. La microflore du sol est responsable de la dgradation de la matire organique, de la stabilit des agrgats et de la plupart des cycles nutritifs qui se produisen
9、t dans les sols. La dtermination de la biomasse microbienne des sols a pour but de permettre dvaluer le maintien permanent de la fertilit des sols, la capacit potentielle dgrader les matires organiques, et les effets des matriaux ajouts sur la population microbienne naturelle. Page blanche NORME INT
10、ERNATIONALE o Iso ISO 14240-l : 1997(F) Qualit du sol - Dtermination de la biomasse microbienne du sol Partie 1: Mthode par respiration induite par le substrat 1 Domaine dapplication La prsente partie de IISO 14240 prescrit une mthode pour lestimation de la biomasse microbienne arobie htrotrophe act
11、ive dans les sols agricoles et minraux ars. La dtermination des effets des produits chimiques sur la biomasse nentre pas dans le domaine dapplication de la prsente partie de IISO 14240. 2 Rfrences normatives Les normes suivantes contiennent des dispositions qui, par suite de la rfrence qui en est fa
12、ite, constituent des dispositions valables pour la prsente partie de IISO 14240. Au moment de la publication, les ditions indiques taient en vigueur. Toute norme est sujette rvision et les parties prenantes des accords fonds sur la prsente partie de IISO 14240 sont invites rechercher la possibilit d
13、appliquer les ditions les plus rcentes des normes indiques ci-aprs. Les membres de la CEI et de IISO possdent le registre des Normes internationales en vigueur un moment donn. ISO 10381-6: 1993, Qualif du sol - chantill/onnage - Partie 6: Lignes directrices pour la collecte, la manipulation et la co
14、nservation de sols destins a une tude en laboratoire des processus microbiens arobies. ISO 10390:1994, Qualit du sol - Dtermination du pH. ISO 11277:- l) Qualit du sol - , Dtermination de la rpartition granulomtrique de la matire minrale des sols - Mthode par tamisage et sdimentation aprs limination
15、 des sels solubles, de la matire organique et des carbonates. OS0 114651993, Qualit du sol - Dtermination de la teneur pondrale en matire sche et en eau - Mthode gravimtrique. 3 Dfinitions Pour les besoins de la prsente partie de IISO 14240, les dfinitions suivantes sappliquent. 3.1 biomasse microbi
16、enne du sol masse de cellules microbiennes intactes dans un sol donn NOTE - Ce paramtre peut tre estim partir du mesurage de la teneur en carbone ou en azote de ces cellules ou par le mesurage de leur aptitude minraliser une source de carbone ajoute. Les cellules mortes et les fragments cellulaires
17、peuvent tre dcels en effectuant des analyses du carbone ou de lazote, mais seules les cellules intactes seront dtectes lors du mesurage de la respiration. 1) publier. ISO 14240-l : 1997(F) 0 ISO 3.2 vitesse de respiration du sol volume de dioxyde de carbone libr par unit de masse de sol et par unit
18、de temps 4 Principe Le sol est amend par une srie de concentrations croissantes de glucose jusqu atteindre une vitesse de respiration maximale (gnralement au cours de la premire heure de lexprience). II sagit de la vitesse de respiration maximale initiale. La biomasse active peut tre estime partir d
19、e cette vitesse de respiration maximale initiale. 5 Environnement de lessai La dtermination de la biomasse doit tre effectue une temprature constante de (22 + 1) “C et une teneur en eau constante. La teneur en eau du sol doit tre la mme que celle du milieu sur lequel lchantillon de sol a t prlev. NO
20、TE - Le facteur utilis pour convertir la vitesse de respiration en chiffre de biomasse (voir larticle 9) a t calcul une temprature de (22 + 1) OC. 6 Ractifs et matriaux 6.1 Sol, pour lequel les caractristiques suivantes doivent tre dtermines: a) Proprits physiques: 1) rpartition granulomtrique, conf
21、ormment NS0 11277; 2) teneur en eau au cours de la priode dincubation, conformment IISO 11465. b) Proprits chimiques: 1) pH du sol, conformment IISO 10390 ou pH dtermin dans une solution de KCI ou de CaCI,; 2) teneur en matire organique, conformment IISO 10694. Les recommandations relatives la colle
22、cte, la manipulation et la conservation du sol (voir NS0 10381-6) doivent tre respectes dans la mesure du possible. 6.2 D-glucose rduit en poudre fine 6.3 Sable de quartz fin, ayant une granulomtrie de 0,l mm 0,5 mm, ou poudre de talc, pour mlanger avec le glucose (6.2). 7 Appareillage Le matriel co
23、urant de laboratoire ainsi que les lments suivants sont ncessaires. 7.1 Mortiers en cramique, pour pulvriser le glucose (6.2) avec le sable ou la poudre de talc (6.3). 7.2 Batteur lectrique. 7.3 Dispositif de mesurage du taux de dioxyde de carbone (CO*) libr par les chantillons de sol intervalles rg
24、uliers. Ceci peut tre ralis par une analyse automatique des gaz aux infrarouges, par chromatographie en phase gazeuse ou toute autre mthode approprie. 0 ISO ISO14240-1:1997( F) 8 Mode opratoire 8.1 Dtermination de la concentration optimale en glucose Ajouter un excs de glucose (6.2) au sol (6.1) pou
25、r dterminer la concentration en glucose laquelle une production de CO, est observe. Sassurer que la quantit de glucose ajoute na pas deffets inhibiteurs, par exemple en dveloppant des conditions osmotiques dfavorables. Prparer un nombre suffisant dchantillons (au moins cinq) afin dexprimenter une ga
26、mme de concentrations de glucose. NOTE 1 Par exemple, la gamme de concentrations de glucose utilises pour les sol arables se situerait entre 500 mg/kg et 6 000 mglkg. Pulvriser soigneusement le glucose dans le mortier (7.1) avec le sable de quartz ou la poudre de talc (6.2) dans un rapport de 15, pu
27、is mlanger au sol. NOTE 2 La taille de lchantillon de sol dpend de la quantit de sol disponible, de lactivit microbienne du sol et de la mthode utilise pour la dtermination du CO,. Dterminer la vitesse de production de CO, libr par chaque chantillon de sol en utilisant le dispositif choisi (7.3) tou
28、tes les heures et pendant 6 h au moins. Des rptitions ne sont pas ncessaires ce stade. Dterminer la concentration de glucose pour laquelle la vitesse maximale de production du CO, est observe. 8.2 Dtermination de la biomasse microbienne Appliquer la mthode dcrite en 8.1 en effectuant des rptitions (
29、au moins trois rptitions) et en utilisant la concentration de glucose pour laquelle la vitesse maximale de production de CO, sest produite. NOTE - II est galement possible de dterminer la biomasse en utilisant le mode opratoire dcrit en 8.1 si des rptitions suffisantes sont utilises. 9 Calculs des r
30、sultats Calculer la biomasse, en utilisant la vitesse de production de CO, la plus faible obtenue aprs le dbut des mesurages, laide de lquation ci-dessous: X= 40R + 0,37 O X est la concentration du carbone microbien du sol, en milligrammes par kilogramme; R est la vitesse de production de CO, en mil
31、lilitres par kilogramme par heure. NOTE - Le facteur 40 de lquation ci-dessus est obtenu partir de la corrlation entre la vitesse de respiration et la quantit de biomasse microbienne du sol mesure par la mthode de fumigation et dincubation mentionne lannexe A de la rfrence 5. 10 Rapport dessai Le ra
32、pport dessai doit contenir les informations suivantes: a) les caractristiques du soll utilis (voir 6.1); ISO 14240-l : 1997(F) 1 0 ISO b) les informations relatives au mode opratoire dessai, cest-dire la mthodologie utilise, le matriel et lappareillage utiliss (voir larticle 8); c) les donnes brutes
33、, chiffres et/ou tableaux des rsultats des analyses. 0 ISO ISO 14240-l : 1997(F) Annexe A (informative) Bibliographie l ISO 10694:1995, Qualit du sol- Dosage du carbone organique et du carbone total aprs combustion sche (analyse lmentaire). 2 ISO 11260:1994, Qualit du sol - Dtermination de la capaci
34、t dchange cationique effective et du taux de saturation en bases changeables laide dune solution de chlorure de baryum. 3 ISO 11266:1994, Qualit du sol - Lignes directrices relatives aux essais en laboratoire pour la biodgradation de produits chimiques organiques dans le sol sous conditions arobies.
35、 4) ANDERSON, J.P.E. et DOMSCH, K.H A physiological method for the quantitative measurement of microbial biomass in soil. Soi/ Biol. Biochem., 10, 1978, pp. 215-221. 5 JENKINSON, D.S et POWLSON, D.S. The effects of biocidal treatments on metabolism in soil. V. A method for measuring soil biomass. Soi/ Biol. Biochem., 8, 1976, pp. 209-213. 5 Page blanche Page blanche ISO 14240-l : 1997(F) 0 ISO ICS 13.080 Descripteurs: Sd, quaht, essai, essai du soi, essai biologique, &termination, biomasse.
