1、NORME INTERNATIONALE ISO 15153 Premire dition 2003-04-15 Numro de rfrence ISO 15153:2003(F) ISO 2003 Tabac Dtermination de la teneur en substances rductrices Mthode par analyse en flux continu Tobacco Determination of the content of reducing substances Continuous-flow analysis methodISO 15153:2003(F
2、) ii ISO 2003 Tous droits rservs PDF Exonration de responsabilit Le prsent fichier PDF peut contenir des polices de caractres intgres. Conformment aux conditions de licence dAdobe, ce fichier peut tre imprim ou visualis, mais ne doit pas tre modifi moins que lordinateur employ cet effet ne bnficie d
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6、cette publication ne peut tre reproduite ni utilise sous quelque forme que ce soit et par aucun procd, lectronique ou mcanique, y compris la photocopie et les microfilms, sans laccord crit de lISO ladresse ci-aprs ou du comit membre de lISO dans le pays du demandeur. ISO copyright office Case postal
7、e 56 CH-1211 Geneva 20 Tel. + 41 22 749 01 11 Fax + 41 22 749 09 47 E-mail copyrightiso.org Web www.iso.org Publi en SuisseISO 15153:2003(F) ISO 2003 Tous droits rservs iii Sommaire Page 1 Domaine dapplication . 1 2 Principe . 1 3R actifs . 1 4 Appareillage . 2 5 Mode opratoire . 2 6 Calculs 3 7R pt
8、abilit et reproductibilit . 3 8 Rapport dessai 4 Annexe A (informative) Exemple danalyseur flux continu 5 Bibliographie 6ISO 15153:2003(F) iv ISO 2003 Tous droits rservs Avant-propos LISO (Organisation internationale de normalisation) est une fdration mondiale dorganismes nationaux de normalisation
9、(comits membres de lISO). Llaboration des Normes internationales est en gnral confie aux comits techniques de lISO. Chaque comit membre intress par une tude a le droit de faire partie du comit technique cr cet effet. Les organisations internationales, gouvernementales et non gouvernementales, en lia
10、ison avec lISO participent galement aux travaux. LISO collabore troitement avec la Commission lectrotechnique internationale (CEI) en ce qui concerne la normalisation lectrotechnique. Les Normes internationales sont rdiges conformment aux rgles donnes dans les Directives ISO/CEI, Partie 2. La tche p
11、rincipale des comits techniques est dlaborer les Normes internationales. Les projets de Normes internationales adopts par les comits techniques sont soumis aux comits membres pour vote. Leur publication comme Normes internationales requiert lapprobation de 75 % au moins des comits membres votants. L
12、attention est appele sur le fait que certains des lments du prsent document peuvent faire lobjet de droits de proprit intellectuelle ou de droits analogues. LISO ne saurait tre tenue pour responsable de ne pas avoir identifi de tels droits de proprit et averti de leur existence. LISO 15153 a t labor
13、e par le comit technique ISO/TC 126, Tabac et produits du tabac, sous-comit SC 2, Tabacs en feuilles.ISO 15153:2003(F) ISO 2003 Tous droits rservs v Introduction Un groupe de travail du CORESTA 1)a tudi les diffrents modes opratoires utiliss pour la dtermination des sucres rducteurs dans le tabac af
14、in den retenir un qui deviendra la mthode recommande par le CORESTA. Deux modes opratoires ont t adopts: lISO 15154 et la prsente Norme internationale. Des tudes menes par le groupe de travail du CORESTA entre 1989 et 1993 ont montr que ces deux mthodes peuvent ne pas donner les mmes rsultats. Pour
15、certains tabacs, les rsultats obtenus avec la mthode donne dans la prsente Norme internationale sont plus levs que ceux obtenus avec la mthode donne dans lISO 15154 car la mthode de la prsente Norme internationale est sensible aux interfrences dues aux substances rductrices, autres que les sucres, e
16、t prsentes dans le tabac. Des tudes interlaboratoires ont montr que lextraction leau distille saccompagne dune hydrolyse du saccharose, dans le cas de certains tabacs. 1) CORESTA: Centre de coopration pour les recherches scientifiques relatives au tabac vi NORME INTERNATIONALE ISO 15153:2003(F) ISO
17、2003 Tous droits rservs 1 Tabac Dtermination de la teneur en substances rductrices Mthode par analyse en flux continu 1 Domaine dapplication La prsente Norme internationale spcifie une mthode pour la dtermination de la teneur en substances rductrices dans le tabac, par analyse en flux continu. La pr
18、sente mthode est applicable aux tabacs bruts et aux tabacs manufacturs. 2P r i n c i p e Un extrait de tabac en solution dans lacide actique est prpar et la teneur en substances rductrices de lextrait est dtermine par rduction des ions de ferricyanure(lll) de potassium jaune en ferrocyanure(II) de p
19、otassium incolore. La dcoloration est mesure . 3R actifs Tous les ractifs doivent tre utiliss selon les bonnes pratiques de laboratoire et les rglementations nationales en vigueur. Utiliser de leau distille ou de puret au moins quivalente. 3.1 ther laurique de polyoxythylne (solution de Brij 35). Aj
20、outer 1 litre deau de solution de Brij 35. Chauffer et agiter jusqu dissolution. 3.2 Solution de chlorure de sodium (NaCl). Dissoudre de chlorure de sodium dans de leau, ajouter de solution de Brij 35 (3.1) et complter 1l it r e . 3.3 Solution dhydroxyde de sodium, . Prparer 1litre de solution dhydr
21、oxyde de sodium partir dampoules ou dissoudre dhydroxyde de sodium dans deau. Mlanger et laisser refroidir. Complter cette solution 1l i t r e a v e c de leau. 3.4 Solution alcaline de ferricyanure(III) de potassium (ferricyanure de potassium) K 3 Fe(CN) 6 . Dissoudre de ferricyanure(lll) de potassi
22、um dans de solution dhydroxyde de sodium (3.3). Ajouterde solution de Brij 35 (3.1) et complter 1 litre avec une solution dhydroxyde de sodium (3.3). 3.5 Solution dacide actique (CH 3 COOH), en fraction volumique. Prparer une solution dacide actique (fraction volumique) partir dacide actique cristal
23、lisable. (Ceci est utilis dans la prparation dtalons, dchantillons et de la solution de rinage de lanalyseur flux continu.) 3.6 D-Glucose (C 6 H 12 O 6 ). Conserver dans un dessiccateur. 5% 420 nm 250 g 9,0 g 1 ml c(NaOH)= 1 mol/l 1 mol/l 40,0 g 800 ml 0,15 g 800 ml 1ml 5% 5%ISO 15153:2003(F) 2 ISO
24、2003 Tous droits rservs 3.7 Solutions talons de glucose. 3.7.1 Solution mre. Peser, prs, environ de glucose (3.6). Dissoudre dans dacide actique (3.5) dans une fiole jauge de 1 litre et complter au volume avec de lacide actique (3.5). Cette solution contient environ de glucose. Conserver au rfrigrat
25、eur. Prparer une solution frache tous les mois. 3.7.2 Solutions dtalonnage. partir de la solution mre (3.7.1), prparer par dilution avec la solution dacide actique (3.5), une srie dau moins cinq solutions dtalonnage dont les concentrations en glucose couvrent la gamme de concentrations prsumes des c
26、hantillons analyser (par exemple de ). Calculer la concentration exacte pour chaque talon. Conserver au rfrigrateur. Prparer des solutions fraches toutes les deux semaines. 4 Appareillage Matriel courant de laboratoire et, en particulier, ce qui suit. 4.1 Analyseur flux continu, comprenant un chanti
27、llonneur, une pompe volumtrique, un dialyseur, un bain-marie, des bobines de raction, un colorimtre (ou lquivalent) avec filtre(s) de , et un enregistreur. Voir un exemple lAnnexe A. 5 Mode opratoire 5.1 Prparation des chantillons analyser Broyer les chantillons de tabac analyser (il convient que la
28、 totalit de lchantillon passe travers un tamis de douverture de maille) et en dterminer le taux dhumidit. Si le tabac est trop humide pour tre broy, il peut tre sch une temprature nexcdant pas . 5.2 Prise dessai Peser, prs, environ de tabac dans une fiole conique sche de . Ajouter dacide actique (3.
29、5), boucher la fiole et agiter pendant . 5.3 Prparation de lextrait pour essai Filtrer lextrait travers un papier-filtre Whatman n 40 2)(ou lquivalent). Rejeter les premiers millilitres de filtrat et recueillir le reste dans un flacon de lanalyseur. 2) Whatman n 40 est un exemple de produit appropri
30、 disponible sur le march. Cette information est donne lintention des utilisateurs de la prsente Norme internationale et ne signifie nullement que lISO approuve ou recommande lemploi exclusif du produit ainsi dsign. 0,1 mg 10,0 g 800 ml 5 % 5% 10 mg/ml 5% 0,2 mg/ml 2,5 mg/ml 420 nm 1mm 40 C 0,1 mg 25
31、0 mg 50 ml 25 ml 30 minISO 15153:2003(F) ISO 2003 Tous droits rservs 3 Analyser les chantillons et les talons de faon habituelle (par exemple commencer avec six extraits de tabac, des solutions dtalonnage et des chantillons avec une solution dtalonnage intermdiaire tous les six chantillons). Si les
32、concentrations des chantillons se trouvent hors de la gamme dtalonnage, les chantillons doivent tre dilus avec la solution dacide actique (3.5) et lanalyse doit tre recommence. Lors dextractions lacide actique , la solution de rinage doit tre de lacide actique . NOTE Des solutions talons combines pe
33、uvent tre prpares si la prsente mthode est utilise simultanment avec les mthodes dcrites dans lISO 15152 ou dans lISO 15517. 6C a l c u l s 6.1 Tracer la courbe reprsentative des hauteurs de pics en fonction des concentrations quivalentes en glucose pour toutes les solutions dtalonnage. 6.2 Calculer
34、 le pourcentage de substances rductrices, (exprim en glucose), rapport la matire sche, laide de la formule o est la concentration en matires rductrices, exprime en milligrammes par millilitre, obtenue partir de la courbe dtalonnage (voir 6.1); est le volume, en millilitres, de lextrait prpar (voir 5
35、.2) (normalement ); est la masse, en milligrammes, de lchantillon (voir 5.2); est le taux dhumidit du tabac, exprim en pourcentage en masse (voir 5.1). Les rsultats dessai doivent tre exprims une dcimale. 7R ptabilit et reproductibilit Une tude interlaboratoire organise sur le plan international, co
36、nduite en 1993, avec la participation de 12 laboratoires et portant sur 3 chantillons, a permis dobtenir les valeurs suivantes pour les limites de rptabilit ( ) et de reproductibilit ( ) lors de lanalyse de grades dfinis de tabac par la prsente mthode. La diffrence entre deux rsultats individuels ob
37、tenus pour diffrentes extractions par le mme oprateur utilisant le mme appareillage dans un court intervalle de temps (le temps ncessaire pour analyser 40 flacons dchantillons) et sans rtalonner lappareillage durant toute lanalyse nexcdera la limite de rptabilit () quen moyenne une fois au plus sur
38、20, lorsque la mthode est normalement et correctement applique. Des rsultats individuels obtenus par deux laboratoires ne diffreront de la limite de reproductibilit () q u e n moyenne une fois au plus sur 20, lorsque la mthode est normalement et correctement applique. Lanalyse des donnes a permis do
39、btenir les estimations rcapitules dans le Tableau 1. Pour calculer et , un rsultat dessai a t dfini comme tant le taux obtenu en analysant un extrait donn une seule fois. 8 Rapport dessai Dans le rapport dessai, la mthode utilise doit tre spcifie. 5% 5% w w= cV 100 m 100 100M c V 25 ml m M rR r R rR
40、ISO 15153:2003(F) 4 ISO 2003 Tous droits rservs Tableau 1 Valeurs des limites de rptabilit et de reproductibilit Type de tabac Teneur moyenne en substances rductrices Limite de rptabilit Limite de reproductibilit(matire sche) T abac Burley 2,3 0,7 1,7 T abac dOrient 15,1 1,2 2,5 T abac sch lair chau
41、d 19,8 1,8 2,5 % rRISO 15153:2003(F) ISO 2003 Tous droits rservs 5 Annexe A (informative) Exemple danalyseur flux continu Lgende 1 chantillonneur (chantillonnage de , rinage de ) 2 bobine, 5 spires (170-0103-01) a 3 dialyseur, 4 bobines, 5 spires (183-0027-01) a 5 bain-marie 6 bobine, (157-B273-09)
42、a 7c o l o r i m tre avec filtre de , cellule de dbit de (199-B018-02) aet cellule de rfrence (199-B028-01) a NOTE Les temps de rinage et danalyse sont uniquement donns titre dindication. a Les numros de pices indiqus entre parenthses proviennent de Technicon. Cette information est donne lintention
43、des utilisateurs de la prsente Norme internationale et ne signifie nullement que lISO approuve ou recommande lemploi exclusif de cet appareillage. Figure A.1 Exemple de schma oprationnel dun analyseur flux continu 35 s 30 s 6 90 C 4,1 ml 420 nm 2 mm 15 mmISO 15153:2003(F) 6 ISO 2003 Tous droits rser
44、vs Bibliographie 1 ISO 15152, Tabac Dtermination de la teneur en alcalodes totaux exprims en nicotine Mthode par analyse en flux continu 2 ISO 15154, Tabac D termination de la teneur en hydrates de carbone rducteurs M thode par analyse en flux continu 3 ISO 15517, Tabac Dtermination de la teneur en nitrates Mthode par analyse en flux continu. 7 ISO 15153:2003(F) ICS 65.160 Prix bas sur 6 pages ISO 2003 Tous droits rservs
