1、Numro de rfrence ISO 18609:2000(F) ISO 2000 NORME INTERNATIONALE ISO 18609 Premire dition 2000-08-15 Corps gras dorigines animale et vgtale Dtermination de la teneur en matires insaponifiables Mthode par extraction lhexane Animal and vegetable fats and oils Determination of unsaponifiable matter Met
2、hod using hexane extractionISO 18609:2000(F) PDF Exonration de responsabilit Le prsent fichier PDF peut contenir des polices de caractres intgres. Conformment aux conditions de licence dAdobe, ce fichier peut tre imprim ou visualis, mais ne doit pas tre modifimoins que lordinateur employcet effet ne
3、 bnficie dune licence autorisant lutilisation de ces polices et que celles-ci y soient installes. Lors du tlchargement de ce fichier, les parties concernes acceptent de fait la responsabilit de ne pas enfreindre les conditions de licence dAdobe. Le Secrtariat central de lISO dcline toute responsabil
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5、esures ont t prises pour garantir lexploitation de ce fichier par les comits membres de lISO. Dans le cas peu probable o surviendrait un problme dutilisation, veuillez en informer le Secrtariat central ladresse donne ci-dessous. ISO 2000 Droits de reproduction rservs. Sauf prescription diffrente, au
6、cune partie de cette publication ne peut tre reproduite ni utilise sous quelque forme que ce soit et par aucun procd, lectronique ou mcanique, y compris la photocopie et les microfilms, sans laccord crit de lISO ladresse ci-aprso ud uco m i t membre de lISO dans le pays du demandeur. ISO copyright o
7、ffice Case postale 56 CH-1211 Geneva 20 Tel. + 41 22 749 01 11 Fax. + 41 22 749 09 47 E-mail copyrightiso.ch Web www.iso.ch Imprim en Suisse ii ISO 2000 Tous droits rservsISO 18609:2000(F) ISO 2000 Tous droits rservs iii Avant-propos LISO (Organisation internationale de normalisation) est une fdrati
8、on mondiale dorganismes nationaux de normalisation (comits membres de lISO). Llaboration des Normes internationales est en gnral confiea u x comits techniques de lISO. Chaque comit membre intress par une t u d eal ed r o i td ef a i r ep a r t i ed uc o m i t technique cr cet effet. Les organisation
9、s internationales, gouvernementales et non gouvernementales, en liaison avec lISO participent galement aux travaux. LISO collabore troitement avec la Commission lectrotechnique internationale (CEI) en ce qui concerne la normalisation lectrotechnique. Les Normes internationales sont rdiges conformmen
10、t aux rgles donnes dans les Directives ISO/CEI, Partie 3. Les projets de Normes internationales adopts par les comits techniques sont soumis aux comits membres pour vote. Leur publication comme Normes internationales requiert lapprobation de 75 % au moins des comits membres votants. Lattention est a
11、ppele sur le fait que certains des lm e n t sd el ap r sente Norme internationale peuvent faire lobjet de droits de proprit intellectuelle ou de droits analogues. LISO ne saurait tre tenue pour responsable de ne pas avoir identifi de tels droits de proprit et averti de leur existence. La Norme inter
12、nationale ISO 18609 a t laborep a rl ec o m i t technique ISO/TC 34, Produits agricoles alimentaires, sous-comit SC 11, Corps gras dorigines animale et vgtale. Cette premire dition de lISO 18609 annule et remplace lISO 3596-2:1988 ainsi que son Amendement 1:1999, qui ont t runis dans un seul documen
13、t en tant que rvision mineure. Lannexe A de la prsente Norme internationale est donne uniquement titre dinformation.NORME INTERNATIONALE ISO 18609:2000(F) ISO 2000 Tous droits rservs 1 Corps gras dorigines animale et vgtale Dtermination de la teneur en matires insaponifiables Mthode par extraction l
14、hexane 1 Domaine dapplication La prsente Norme internationale spcifie une mthode trois extractions lhexane pour la dt e r m i n a t i o nd el a teneur en matires insaponifiables des corps gras dorigines animale et vgtale. Cette mthode est applicable tous les corps gras mais pas aux cires. ATTENTION
15、Par rapport la mthode donne dans lISO 3596, la prsente mthode donne des rsultats systmatiquement faibles. 2R frence normative Le document normatif suivant contient des dispositions qui, par suite de la rfrence qui y est faite, constituent des dispositions valables pour la prsente Norme international
16、e. Pour les rfrences dates, les amendements ultrieurs ou les rvisions de ces publications ne sappliquent pas. Toutefois, les parties prenantes aux accords fonds sur la prsente Norme internationale sont invites rechercher la possibilit dappliquer ldition la plus rcente du document normatif indiqu ci-
17、aprs. Pour les rfrences non dates, la dernire dition du document normatif en rfrence sapplique. Les membres de lISO et de la CEI possdent le registre des Normes internationales en vigueur. ISO 661,C o rp sg ra sd origines animale et vgtale Prp a rati ondel chantillon pour essai. 3 Terme et dfinition
18、 Pour les besoins de la prsente Norme internationale, le terme et la dfinition suivants sappliquent. 3.1 matires insaponifiables toutes les substances prsentes dans le produit qui, aprs saponification de celui-ci par lhydroxyde de potassium et extraction par lhexane, ne sont pas volatiles dans les c
19、onditions opratoires spcifies NOTE Les matires insaponifiables comprennent des constituants naturels des matires grasses tels que les strols, les hydrocarbures et alcools suprieurs, aliphatiques et terpniques, ainsi que les substances organiques trangres extraites par le solvant et non volatiles 103
20、 C (par exemple huiles minrales) quelles peuvent ventuellement contenir. 4P r i n c i p e Saponification du corps gras par traitement lbullition reflux avec une solution thanolique dhydroxyde de potassium. Extraction de linsaponifiable de la solution de savon par lhexane ou, dfaut, lther de ptrole.
21、vaporation du solvant et pesedur sidu aprss chage.ISO 18609:2000(F) 2 ISO 2000 Tous droits rservs 5R actifs Sauf indication diffrente, utiliser uniquement des ractifs de qualit analytique reconnue et de leau distilleo u dminralise, ou de lea udepu re t au moins quivalente. 5.1 n-Hexane, ou dfaut, th
22、er de ptrole, dintervalle de distillation compris entre 40 Ce t6 0C, dindice de brome infrieur 1. Ces deux solvants doivent tre exempt de rsidus. 5.2 thanol, solution 10 % (en volume). 5.3 Phnolphtaline, solution 10 g/l dans lthanol 95 % (en volume). 5.4 Hydroxyde de potassium, solution thanolique,
23、c(KOH) 1mol/l. Dissoudre 60 g dhydroxyde de potassium dans 50 ml deau et diluer 1 000 ml avec de lthanol 95 % (en volume). La solution doit tre incolore ou jaune paille. 6 Appareillage Matriel courant de laboratoire et, en particulier, ce qui suit. 6.1 Ballons, fond rond, de 250 ml de capacit, col r
24、od. 6.2 Rfrigrant reflux, avec joint rod adaptable aux ballons (6.1). 6.3 Ampoules dcanter, de 250 ml de capacit, avec robinets et bouchons en polyttrafluorthylne. 6.4 Bain deau bouillante. 6.5 tuve, rglable 103 C 2 C, ou appareil de schage sous pression rduite, par exemple vaporateur rotatif ou app
25、areil quivalent. 7 chantillonnage Lchantillonnage ne fait pas partie de la mthode spcified a n sl ap r sente Norme internationale. Une mthode dchantillonnage recommande est donne dans lISO 5555 2. Il est important que le laboratoire reoive un chantillon rellement reprsentatif, non endommag ou modifi
26、 lors du transport et de lentreposage. 8P r paration de lchantillon pour essai Prparer lchantillon pour essai conformment lISO 661. 9 Mode opratoire 9.1 Prise dessai Peser, 0,01 g prs, dans un ballon de 250 ml (6.1) environ 5 g de lchantillon pour essai (article 8).ISO 18609:2000(F) ISO 2000 Tous dr
27、oits rservs 3 9.2 Saponification Ajouter 50 ml de la solution dhydroxyde de potassium (5.4) et quelques rgularisateurs dbullition. Adapter le rfrigrant reflux (6.2) au ballon et chauffer le contenu pendant 1 h lgre bullition. Arrter le chauffage. Ajouter 50 ml deau par le haut du rfrigrant et agiter
28、 en tournant. 9.3 Extraction des matires insaponifiables Aprs refroidissement, transvaser la solution dans une ampoule dcanter de 250 ml (6.3). Rincer le ballon et les rgularisateurs dbullition plusieurs fois avec de lhexane (5.1), en utilisant au total 50 ml dhexane, et verser les liquides de rinag
29、e dans lampoule dcanter. Boucher et agiter nergiquement pendant 1 min, en quilibrant priodiquement la pression par retournement de lampoule dcanter et ouverture du robinet. Laisser reposer jusqu sparation complte des deux phases, puis soutirer la phase infrieure le plus compltement possible en la re
30、cueillant dans une seconde ampoule dcanter. Sil se forme une mulsion, la dtruire par addition de petites quantitsd thanol ou de solution concentre dhydroxyde de potassium ou de chlorure de sodium. Procder deux nouvelles extractions de la phase savonneuse, en utilisant chaque fois de la mme faon 50 m
31、l dhexane. Rassembler les trois extraits hexaniques dans une ampoule dcanter. 9.4 Lavage des extraits hexaniques Laver lensemble des extraits hexaniques trois fois avec des fractions de 25 ml de solution dthanol (5.2), en agitant nergiquement et en liminant aprs chaque lavage la solution hydroalcool
32、ique. Soutirer chaque solution de lavage jusqu ce quil en reste 2 ml, puis faire tourner lampoule dcanter autour de son axe. Attendre quelques minutes pour permettre au reste de la phase hydroalcoolique de se rassembler et lliminer; fermer le robinet quand la phase hexanique atteint lorifice du robi
33、net. Poursuivre le lavage avec la solution dthanol jusqu ce que le lavage ne donne plus une coloration rose aprs ajout dune goutte de solution de phnolphtaline (5.3). 9.5 vaporation du solvant Par le haut de lampoule dcanter, transvaser quantitativement, en plusieurs fois si ncessaire, la solution h
34、exanique dans un ballon de 250 ml (6.1) pralablement sch103 Cd a n sl tuve (6.5), puis refroidi et tar 0,1 mg prs. vaporer le solvant sur bain deau bouillante (6.4). 9.6 Schage du rsidu et dtermination 9.6.1 Scher le rsidu pendant 15 min ltuve (6.5), rgle 103 C, en plaant le ballon en position presq
35、ue horizontale. Laisser refroidir au dessiccateur et peser 0,1 mg prs. On peut galement relier le ballon lappareil de schage sous pression rduite (6.5) et scher sur le bain deau bouillante sous la pression rd u i t em a x i m a l ed el at r o m p e eau pendant environ 15 min. Laisser refroidir tempr
36、ature ambiante sous la pression rduite maximale de la trompe eau, nettoyer soigneusement le ballon et le peser 0,1 mg prs. Scher nouveau pendant des priodes de 15 min, jusqu ce que la perte de masse entre deux peses successives soit infrieure 1,5 mg. Si la masse constante nest pas obtenue aprst r o
37、i sp riodes de schage, il est probable que les matires insaponifiables contiennent des substances trangres et la dtermination doit tre rpte. 9.6.2 Si lon estime quune correction des acides gras libres est ncessaire, aprs pesed ur sidu, le dissoudre dans 4 ml dhexane (5.1) et ajouter ensuite 20 ml dt
38、hanol pralablement neutralis jusqu obtention dune couleur rose ple en prs e n c ed el as o l u t i o nd ep h nolphtaline (5.3) comme indicateur. Titrer avec une solution titred hydroxyde de potassium, c(KOH) = 0,1 mol/l, jusqu o b t e n t i o nd el am me couleur. Calculer la masse des acides gras li
39、bres, en acide olique, et corriger la masse du rsidu en consquence (voir article 10).ISO 18609:2000(F) 4 ISO 2000 Tous droits rservs 9.7 Nombre de dterminations Effectuer deux dterminations sur le mme chantillon pour essai. 9.8 Essai blanc Effectuer un essai blanc en suivant le mme mode opratoire et
40、 en utilisant les mmes quantits de tous les ractifs, lexclusion de la prise dessai. Si le rsidu est suprieur 1,5 mg, reconsidrer la technique et les ractifs. 10 Expression des rsultats La teneur en matires insaponifiables, en pourcentage en masse de lchantillon, est gale 100 123 0 mmm m bg % o m 0 e
41、st la masse, en grammes, de la prise dessai; m 1 e stl ama sse ,e ng ra mme s,d ur sidu; m 2 e stl ama sse ,e ng ra mme s,d ur sidu obtenu avec le blanc; m 3 est la masse, en grammes, des acides gras libres ventuellement prsents et est gale 0,28 Vc o V est le volume, en millilitres, de la solution t
42、hanolique titre dhydroxyde de potassium utilise pour le titrage (9.6.2); c est la concentration exacte, en moles par litre, de la solution thanolique titre dhydroxyde de potassium. Prendre comme rsultat la moyenne arithmtique des deux dterminations. 11 Fidlit Les dtails dessais interlaboratoires rel
43、atifs la fidlit de la mthode sont rsums dans lannexe A. Les valeurs drives de ces essais peuvent ne pas sappliquer aux plages de concentrations ou matrices autres que celles donnes. 12 Rapport dessai Le rapport dessai doit indiquer: tous les renseignements ncessaires lidentification complte de lchan
44、tillon; la mthode dchantillonnage utilise, si elle est connue; la mthode dessai utilise, avec rfrence la prsente Norme internationale; tous les dtails opratoires non prvus dans la prsente Norme internationale, ou considrsc o m m e facultatifs, ainsi que les dtails sur tout incident susceptible davoi
45、r influ sur le(s) rsultat(s) dessai; le(s) rsultat(s) dessai obtenu(s), ou, si la rptabilit a t vrifie, le rsultat final obtenu.ISO 18609:2000(F) ISO 2000 Tous droits rservs 5 Annexe A (informative) Rsultats de lessai interlaboratoires A.1 Participation Quatorze laboratoires appartenant six pays dif
46、frents (Allemagne, France, Hongrie, Malaisie, Pays-Bas, Royaume-Uni) ont participune tude interlaboratoires organise par lInstitut des corps gras, Centre technique industriel. A.2 chantillons Trois chantillons ont t fournis: chantillon A: huile de tournesol brute; chantillon B: huile de palme brute;
47、 chantillon C: suif brut. A.3 Rsultats Les Tableaux A.1, A.2 et A.3 donnent les rsultats obtenus par les laboratoires avec les trois chantillons A, B et C. Le Tableau A.4 donne les rsultats statistiques, chantillon par chantillon. En ce qui concerne lchantillon A, deux laboratoires ont t limins sur la base des tests statistiques de Cochran (laboratoire 6) et Dixon (laborat
