1、ICS 65.020.20 B 05 DB14 山 西 省 地 方 标 准 DB 14/ T 16082018 高粱种质资源低温库保存技术规程 2018 - 01 - 10发布 2018 - 03 - 10实施 山西省质量技术监督局 发 布 DB14/ T 16082018 I 目 次 前言 . II 1 范围 . 1 2 规范性引用文件 . 1 3 术语和定义 . 1 4 入库前处理 . 2 5 入库保存 . 5 6 监测与更新 . 5 7 信息管理 . 6 附录A 入库保存种质资源的标准（资料性附录） . 8 附录B 种子含水量测定方法（规范性附录） . 9 DB14/ T 1608201
2、8 II 前 言 本标准按照GB/T 1.1-2009给出的规则起草。 本标准由山西省农业科学院提出并归口。 本标准起草单位：山西省农业科学院农作物品种资源研究所。 本标准主要起草人：秦慧彬、穆志新、李萌、王燕利。 DB14/ T 16082018 1 高粱种质资源低温库保存技术规程 1 范围 本标准规定了高粱种质资源低温库保存的入库前处理、入库保存、监测与更新及信息管理。 本标准适用于高粱种质资源的长期、中期保存和监测。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。 凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本
3、文件。 GB/T 3543.3 农作物种子检验规程 净度分析 GB/T 3543.4 农作物种子检验规程 发芽实验 GB/T 3543.6 农作物种子检验规程 水分测定 3 术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。 3.1 生活力 种子在适当条件下能发育成植株的一种能力，一般用发芽率和发芽势计量。 3.2 干燥 采用不损害种子活力的脱水技术，把种子含水量降到适于贮藏水平的过程。 3.3 监测 在种质库种子保存过程中，定期取出种子样品进行发芽率测定，检查种子生活力状况，同时测查贮 存种子的数量，以确定种子是否应进行繁殖更新。 4 入库前处理 4.1 接纳登记 DB14/ T 16082018 2
4、 对入库保存的种子进行接纳登记，即对其进行纯度、净度、健康状况和数量等指标的初步检查和基 本信息的登记。具体参见附录A。 4.2 查重、去重 检查接收的同一批种子之间是否有重复（也称自身查重），并将接收种子“全国统一编号”、“原 保存编号”和“种质名称”等数据项输入计算机，与库存种子管理数据库核对是否有重复。对已保存的 种子，不再重新入库。 4.3 种子清选 剔除破碎种子、空粒、瘪粒、霉粒、受病虫侵害粒及其他混杂种子，以及灰尘等其他物质。 4.4 生活力检测 4.4.1 发芽试验条件 高粱种子初始发芽力的检测按照GB/T 3543.4执行。高粱种子发芽条件为20 30 ，最适宜发 芽温度为25
5、 。 4.4.2 破除休眠 怀疑高粱种子休眠时，发芽试验前可采用冷冻方法进行处理。具体做法为：发芽试验前见所有发芽 试验种子放在湿润的发芽床上，置于5 10 预冷处理3 d，然后在25 下发芽。 4.4.3 准备试验条件与种子 从所需发芽测试的高粱种子中随机取数量相等的3份种子并分装于3个纸袋中，每个纸袋内需附上流 水号标签。每份种子数量为100粒。调节发芽箱的光照、温度、湿度；备好各种器具、试剂与药品，发 芽床要进行洗涤和消毒。 4.4.4 发芽试验 用医用酒精对每个发芽皿进行消毒，然后将发芽床基质滤纸或吸水纸置于发芽皿中，并加入高压灭 菌的蒸馏水至淹没高粱种子一半。将每袋种子倒入每个发芽皿
6、盒）中并均匀的摆放在湿润的发芽床上， 粒与粒之间应保持一定的距离，然后盖上盖放入已调节好的发芽箱中。 4.4.5 发芽试验持续时间 高粱种子的发芽试验初次计数天数为4 d，末次计数天数为10 d。如果在规定试验时间结束前，样 品已达最高发芽率，则试验可提前结束。如有发霉的种子应取出冲洗，严重发霉的应更换发芽床。 4.4.6 发芽鉴定及发芽数量记录 每份种子材料发育成的正常幼苗数为发芽数。在初次计数或其他中期计数时，应将正常幼苗（已达 到全部主要构造能正确鉴定的幼苗）取出去，并记录数量。对可疑或损伤、畸形或有其他缺陷的幼苗保 留到末次计数时再判别并记录数量。严重腐烂或发霉的种子应尽早从发芽床上
7、除去并记数。 4.4.7 发芽结果的计算与表示 发芽结果是用正常幼苗数占供试种子数的百分率表示。百分率按四舍五入法计算到整数位。 DB14/ T 16082018 3 4.5 保存数量和入库初始发芽率标准 高粱种子入长期库（-18 ）保存的发芽率应85%，保存量应200 g。 高粱种子入中期库（4 ）保存的发芽率应75%，保存量应150 g。 4.6 库编号编码 剔除发芽率低于最低限的高粱种子后，对符合入库标准的种子进行编号，每份种子给一个永久库编 号。可根据保存作物种类和种子特点，制定库编号编码。 4.7 种子干燥 4.7.1 干燥条件 高粱种子的干燥条件可以选择干燥箱加热干燥法和双“十五”
8、干燥间低湿干燥法。加热干燥法的条 件为温度38 ，湿度8%10%，时间2 d。双“十五”干燥间低湿干燥法的条件为温度15 2 、湿 度15%20%，时间715 d。 4.7.2 预估或测定种子的初始含水量 把要预估的高粱种子置于环境中，当种子的重量不再变化时，种子就与环境中空气的水分达到了平 衡。测出当时当地的大气相对湿度和平均温度，就可预估出种子含水量。平衡种子含水量大约需要7 10 d。可用通风湿度计测量存放种子地点的湿度。表1为高粱种子在25 ，不同相对湿度下的平衡含水 量。 表1 在25 时高粱种子的平衡含水量 种名 相对湿度 15 30 45 60 75 90 高粱 6.4 8.6
9、10.5 12.0 15.2 18.8 注：在实际测定种子初始含水量按附录A方法对高粱种子抽测12份。 4.7.3 种子预干燥 当高粱种子的初始含水量超过17%时需进行预干燥。先在低温的干燥间（20 25 ，20%30%RH） 进行干燥，最好能采用“双15（15 ，15%RH）”的干燥箱，使高粱种子水分降至13%左右，然后再加 热干燥。 预干燥时间长短可用减重量法计算。其方法如下：首先测定种子的初始含水量和初始重量，并确定 干燥后要达到的含水量，然后用下面的公式计算出达到最后含水量时的种子重量。 DB14/ T 16082018 4 4.7.4 种子干燥 逐份核查库编号和种子份数，确保不缺不乱
10、核对完后，将种子装入透气的尼龙网袋中，然后放入 干燥箱内。干燥过程中至少每隔4 h观察干燥箱和干燥间的温、湿度变化和设备的运行情况。 4.7.5 种子含水量测定 当种子干燥到预定时间时，抽测12份种子的含水量。含水量测定按附录B方法进行。若含水量达 到贮藏要求时，将种子从干燥箱中取出并进行包装，否则继续进行干燥。 4.8 种子包装称重 准备高粱种子入库所需的铝箔袋，并贴好标签。核对装有种子的尼龙袋上标签与入库铝箔袋上标签 一致，把种子倒入相应的袋中。尼龙袋内的原始标签也一同装入铝箔袋中，即时封口。包装间温度一般 为20 25 ，相对湿度30%40%。包装速度要快，以防干燥的种子吸收空气中的水
11、分。包装好的种 子用电子称称重，以克为单位。 5 入库保存 5.1 种子储藏条件 温湿度条件：长期库温度-18 ，相对湿度小于50；中期库温度-4 4 ，相对湿度小于65。 储藏含水量：长期库57；中期库59。 5.2 结果回执 种子入库保存后，管理人员应对每一供种者提供的每一批种质做一份入库结果报告，主要内容包括 合格种子清单和不合格种子清单。对合格的种子，要向供种单位开具种质入库保存证明。不合格的种子 要告知不合格原因并退回给提供者。 6 监测与更新 6.1 生活力检测间期 种子储藏过程中两次生活力监测的间隔时间。长期库生活力监测间期如下： a) 种子首次生活力监测间期为15 a。 b)
12、种子第二次及随后监测间期：当发芽率高于85以上时，每1015年监测一次。当发芽率低 于85时，每510 a监测一次。 c) 中期库生活力监测间期为5 a。 6.2 监测前准备 DB14/ T 16082018 5 将要监测的种子从冷库中取出后存放到缓冲间23 d后再放到干燥间，在干燥间放置35 h后打开 种子袋并数出需进行监测的种子，随后应尽快密封好并放回冷库。 6.3 发芽率测定 以20粒种子为一组，重复23组高粱种子进行序列发芽试验，试验步骤与种子生活力监测方法相同。 依据试验结果，按照计算出的序列分析界限值（见表2）做出决定：A-继续保存；B-继续测定；C-更新。 参数：P0=0.85；
13、p1=0.75；=0.05，n=20。 表2 发芽试验结果序列分析的界限值 试验种子 种子发芽数 20 粒为一组 继续保存 继续测定 更新 1 20 1220 011 2 40 3740 2836 027 3 60 5360 4452 043 4 80 6980 6068 059 5 100 85100 7684 075 6.4 监测结果处理 将监测结果输入计算机并建立监测数据库。若监测发芽率在更新标准范围内，则需安排种子进行 繁殖更新。除此之外，当高粱种子在长期库贮存生活力或保存量出现下列情况之一时，也应当立即取出 种子进行繁殖更新。中期库发芽率与保存量的更新标准参照长期库标准执行。 高粱种
14、子发芽率降至起始发芽率水平的85时。 活种子数目不足以进行4次繁殖所需的种子量时，即每份活种子数目低于800粒。 当种子样品在中期库绝种时。 同一批次发芽率降至更新临界值以下的份数占到该批次份数的 50时，该批次所有种子都应 该进行更新。 6.5 繁殖更新 依据监测结果，确定需要繁殖更新的高粱种子清单。将需繁殖更新的种子信息输入数据库，建立繁 种更新数据库。繁殖更新的操作按“农作物种质资源整理技术规程”进行。 7 信息管理 7.1 基本信息 每一份入库保存种子鉴定和来源的信息，该信息不能改变。一般由提供者提供。包括：全国统一编 号（如有需提供），原保存编号，种质名称，学名，提供者，原产地，来源
15、地等。 DB14/ T 16082018 6 7.2 采集信息 在种质资源种植过程中的调查信息，主要由提供种子者提供。 7.3 管理信息 每一份登记种质在入库处理过程中获得的一系列数据信息，以及供管理人员使用的有关数据信息。 包括：入库初始信息、监测信息、更新信息、提取利用信息等。 7.4 计算机管理 利用计算机建立种质库种质管理数据库，数据项由种质的基本信息、采集信息和管理信息组成。主 要包括：库编号、全国统一编号（如有需记录）、库位号、作物名称、原产地、提供者、繁殖年份、入 库保存日期、发芽率、发芽势、保存量、贮藏含水量、种子粒形、种子粒色、种子饱满度、种质整齐度 等。 7.5 纸质资料档
16、案管理 将数据采集的原始记载表，分作物按库编号或入库时间顺序装订成册，建立原始记录资料档案管理。 DB14/ T 16082018 7 A A 附 录 A （资料性附录） 入库保存种质资源标准 A.1 送交种子标准 a)种子应是当季繁殖的，发芽率一般要求85%以上； b)种子要清选干净，去除破碎粒、虫蚀粒、无胚粒、秕粒、瘦小粒、砸粒等，杂质不得超过2%； c)种子无明显病虫损害，未受损伤、未拌用农药或无包衣处理； d)种子收获后要及时进行晾干处理，送交时种子含水量应小于或等于13%； e)送交或邮寄种子时要妥善包装。每份材料袋内应有标签，标明作物名称、全国统一编号（如有需 提供）、原保存编号，
17、在袋的外部也应有对应的标识。包装要结实牢固、防漏、防潮、防混杂、放散包。 A.2 种子基本信息 基本信息登记内容包括全国统一编号（如有需提供）、原保存编号、种质名称、学名、原产地、来 源地、提供者，以及任何对贮存有帮助的有关生理学信息。 A.3 接收种子处理 对符合入库要求的种子，给提供者开接纳收据，注明作物种类、接收份数、接收日期。对不符合入 库标准的种子，应退回重新繁殖。对缺少基本信息的种子，应及时让提供者补充。对接纳后不能及时进 行入库处理的种子，应暂时存放在种质库缓存间（10 2 ）中。 DB14/ T 16082018 8 B 附 录 B （规范性附录） 种子含水量测定法 B.1 国
18、际标准法 B.1.1 一般要求 样品在测定时，暴露在空气中的时间应减少至最低程度。 B.1.2 试样处理 将种子充分混合，从中取出试样15 g25 g（种子量少可少取），除去杂质，依作物种类进行下述 处理： a) 磨碎磨碎的高粱种子至少50通过0.50 mm铜丝筛，而留在1.00 mm铜丝筛上不超过10； b) 预先烘干当高粱种子含水量高于17应预先烘干。种质库收到种子一般不必预先烘干。若需处 理，可在130 恒温箱内烘5 min10 min（因水分而异），然后再室温下摊凉2 h。 B.1.3 称样品 将处理好的样品充分混匀，在感量1/1 000 g天平上称取4.5 g5 g，放在预先烘至恒重
19、130 烘1 h）的铝盒内（直径小于8 cm)，样品在铝盒内的分布，每平方厘米不超过0.3 g，摊平盖严并称重 记录。二次重复。 B.1.4 烘干方法 高粱种子适用于高恒温烘箱法，即样品在 130 133 烘箱内烘 2 h。测定时，检验室的空气相 对湿度没有特别要求。 B.1.5 烘干操作要求 采用 130 烘箱法时，先将烘箱预热至 140 左右才将样品盒放入。将样品盒盒盖打开放在距温度 计 2 cm2.5 cm处,关闭箱门。5 min10 min 后烘箱温度回升至 103 2 或 130 2 时开始计算 时间，到时间后就打开箱门，盖好盒盖，放入盛有变色硅胶的干燥器内冷却至室温（约需 30
20、min45 min) 后称重。称重时逐个地把铝盒从干燥器里取出，立即称重记录。称重期间不要敞开干燥器。 B.1.6 结果计算 由烘后减少的重量计算水分，保留一位小数，计算公式如下： . (B.1) 式中： DB14/ T 16082018 9 M1样品盒和盖的重量（g）； M2样品盒和盖及样品的烘钱重量（g）； M3样品盒和盖及样品的烘后重量（g)。 两次重复结果允许差距不超过 0.2，否则重做。 B.1.7 资料信息处理 含水量测定过程中，应及时地把每项结果记录在表 B.1 上，便于计算和资料保存。 表B.1 种子含水量测定记录表 测定 日期 作物 库编号 盒号 盒重 （g) 烘前盒重+样 品重（g) 烘后盒重+样 品重（g) 种子含水量 （） 平均含水量 （） B.2 国家标准法（GB/T3543.6) 国家标准法（GB/T3543.6)中高粱种子样品处理方法、烘干温度，计算方法与国际标准法相似，所 不同的是样品烘干时间不同。国家标准法的高恒温烘箱法是样品在 130 133 烘干 1 h。 _
