1、ICS 67 X 04 DB13 河北省 地方标准 DB 13/T 5189.12 2020 天然植物提取物中危害成分检测 第 12 部分：甜菊糖苷中邻苯二甲酸酯的 测定 2020 - 06 - 28 发布 2020 - 07 - 28 实施 河北省市场监督管理局 发布 DB13/T 5189.12 2020 I 前 言 本标准按照 GB/T 1.1-2009给出的规则起草。 DB13/T 5189天然植物提取物中危害成分的测定共分 12个部分： 第 1 部分： 亚硝酸盐的测定 ； 第 2 部分： 二氧化硫的测定 ； 第 3 部分： 正己烷、丙酮、乙酸乙酯、甲醇和乙醇 5 种有机溶剂残留的测定
2、； 第 4 部分：辣椒提取物中砷、铅、镉、铬、汞的测定； 第 5 部分：万寿 菊提取物中对氧基苯胺的测定 ； 第 6 部分：万寿菊提取物中乙氧基喹啉的测定； 第 7 部分：天然番茄红中苯并 芘的测定； 第 8 部分：辣椒提取物中苏丹红的测定； 第 9 部分：辣椒提取物中叔丁基对苯二酚的测定； 第 10 部分：辣椒红中赭曲霉毒素 A 的测定； 第 11 部分：叶黄素中苯的测定； 第 12 部分：甜菊糖苷中邻苯二甲酸酯的测定。 本部分为 DB13/T 5189的第 12部分。 本标准由河北省市场监督管理局提出。 本标准起草单位：河北省食品检验研究院、晨光生物科技集团股份有限公司、石家庄海关技术中
3、心、清河县食品药品检验检测中心。 本标准主要起草人： 张兰天、王如景、焦良、刘东、杨新涛、冯默、艾连峰。 DB13/T 5189.12 2020 1 天然植物提取物中危害成分检测 第 12 部分：甜菊糖苷中邻苯二甲酸酯的 1 范围 本部分 规定了甜菊糖苷中邻苯二甲酸酯的测定方法。 本部分 适用于甜菊糖苷中邻苯二甲酸二甲酯（ DMP）、邻苯二甲酸二乙酯（ DEP）、邻苯二甲酸 二 异丁酯（ DIBP）、邻苯二甲酸二丁酯（ DBP）、邻苯二甲酸二（ 2-甲氧基）乙酯（ DMEP）、邻苯二甲酸 二（ 4-甲基 -2-戊基）酯（ BMPP）、邻苯二甲酸二（ 2-乙氧基）乙酯（ DEEP）、邻苯二甲酸二
4、戊酯（ DPP）、 邻苯二甲酸丁基苄基酯（ DHXP）、邻苯二甲酸二己酯（ BBP）、邻苯二甲酸二（ 2-丁氧基）乙酯（ DBEP）、 邻苯二甲酸二环己酯（ DCHP）、邻苯二甲酸二（ 2-乙基）己酯（ DEHP）、邻苯二甲酸二苯酯（ DPhP）、 邻苯二甲酸二正辛酯（ DNOP）、邻苯二甲酸二壬酯（ DNP）的测定。 本部分适用于天然植 物提取物甜菊糖苷中邻苯二甲酸酯的测定。 2 原理 试样经提取后，采用气相色谱 -质谱法测定。采用特征选择离子监测扫描模式（ SIM），以保留时 间和定性离子碎片丰度比定性，外标法定量。 3 试剂 或 材料 除非另有说明，本方法所用试剂均为色谱纯，水为 GB/
5、T 6682规定的一级水。 3.1 试剂 正己烷（ C6H14）。 3.2 标准品 16种邻苯二甲酸酯标准品：邻苯二甲酸二甲酯（ DMP）、邻苯二甲酸二乙酯（ DEP）、邻苯二甲酸 二异丁酯（ DIBP）、邻苯二甲酸二丁酯（ DBP）、邻苯二甲酸二（ 2-甲氧基）乙酯（ DMEP）、邻苯二甲 酸二（ 4-甲 基 -2-戊基）酯（ BMPP）、邻苯二甲酸二（ 2-乙氧基）乙酯（ DEEP）、邻苯二甲酸二戊酯（ DPP）、 邻苯二甲酸二己酯 （ DHXP）、邻苯二甲酸 丁基苄基酯（ BBP）、邻苯二甲酸二（ 2-丁氧基）乙酯（ DBEP）、 邻苯二甲酸二环己酯（ DCHP）、邻苯二甲酸二（ 2-乙
6、基）己酯（ DEHP）、邻苯二甲酸二苯酯（ DPhP）、 邻苯二甲酸二正辛酯（ DNOP）、邻苯二甲酸二壬酯（ DNP），混合液体标准品 ,浓度为 1000g/mL，标 准品信息、纯度见附录 A。 3.3 标准溶液配制 3.3.1 邻苯二甲酸酯标准储备溶液（ 8 mg/L）：吸取 0.2mL 1000 mg/L 混合标样，至 25 mL 容量瓶中， 用正己烷定容，得到浓度约为 8 mg/L 的标准储备溶液，置于 4 冰箱保存，有效期 2 个月。 DB13/T 5189.12 2020 2 3.3.2 邻苯二甲酸酯标准使用溶液（ 0.08 mg/L）：吸取 1 mL 8 mg/L 标样，至 10
7、0 mL 容量瓶中，用 正己烷定容，得到浓度约为 0.08 mg/L 的标准工作液，置于 4 冰箱保存，有效期 2 个月。 4 仪器和设备 4.1 气相色谱 -质谱联用仪。 4.2 分析天平：感量 0.1 mg。 4.3 超声清洗器。 4.4 4.4 涡旋振荡器。 4.5 离心机 :转速 5000r/min。 5 分析步骤 5.1 试样制备 准确称取 样品 0.2 g（精确至 0.0001 g）于 10 mL玻璃试管中，加入 1 mL水，涡旋，超声溶解后加 入 1 mL正己烷，涡旋 30 s后，离心（ 5000r/min， 5min），取上清液，待测。 按上述条件，同时做空白试验。 5.2 色
8、谱质谱参考条件 5.2.1 色谱参考条件 a) 色谱柱： 5% 苯基 -甲基聚硅氧烷石英毛细管色谱柱，柱长： 30 m，内径： 0.25 mm，膜厚： 0.25 m，或性能相当者 ； b) 进样口温度： 250； c) 程序升温：初始柱温 60 ，保持 1 min，以 20 /min 升温至 220 ，保持 1 min，再以 5 /min 升温至 280 ，保持 4 min； d) 载气：氦气（纯度 99.999%），流速 1.0 mL/min； e) 进样量： 1 L； f) 进样方式：不分流进样。 5.2.2 质谱参考条件 a) 色谱与质谱接口温度： 280 ； a) 离子源类型：电子轰击
9、离子源（ EI）； b) 碰撞室气体：氦气（纯度 99.999%）； c) 电离能量： 70 eV； d) 溶剂延迟： 5 min； e) 监测方式：选择离子监测模式（ SIM）保留时间及监测离子对见附录 C。 5.3 测定 5.3.1 定性确认 DB13/T 5189.12 2020 3 在 5.2仪器条件下，试样待测液和标准品的选择离子色谱峰在相同保留时间处（ 2.5 %）出现， 并且对应质谱 碎片离子的质荷比与标准品一致，其丰度比与标准品相比符合：相对丰度 50 %时，允 许 20 %的偏差；相对丰度 20% 50%时，允许 25 %的偏差；相对丰度 10 % 20 %时，允许 30 %
10、的 偏差；相对丰度 10 %时，允许 50%的偏差。满足上述条件时可定性确证目标分析物，参见附录。 5.3.2 定量分析 将得到的定量离子峰面积扣除空白溶液中对应的定量离子峰面积后代入式（ 1），采用外标法单点 定量。 6 试验结果 试样中邻苯二甲酸酯含量按式（ 1）计算。 mA VcAX s s （ 1） 式中： X 试样中某种邻苯二甲酸酯的含量，单位为毫克每千克，（ mg/kg）； A 样液中某种邻苯二甲酸酯的色谱峰面积； sc 标准工作液中某种邻苯二甲酸酯的浓度，单位为微克每毫升，（ g/mL）； V 样液最终定容体积，单位为毫升，（ mL）； sA 标准工作液中某种邻苯二甲酸酯的色谱峰
11、面积； m 试样质量，单位为克，（ g）。 计算结果需扣除空白值，计算结果以重复性条件下获得的两次独立测定结果的算术平均值表示， 保留三位有效数字。 7 精密度 在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的 15 %。 8 检出限和定量限 方法的检出限（ LOD）为 0.05 mg/kg，定量限为 0.016mg/kg。 DB13/T 5189.12 2020 4 A A 附 录 A （规范性附录） 16 种邻苯二甲酸酯名称、缩写、 CAS 号、分子式、纯度信息表 A.1 16 种邻苯二甲酸 酯名称、缩写、 CAS号、分子式、纯度信息见表 A.1。 表 A.1 16 种邻
12、苯二甲酸酯名称、缩写、 CAS 号、分子式、纯度信息 序号 中文名称 英文名称 缩写 CAS号 分子式 纯度 /% 1 邻苯二甲酸二甲酯 Dimethyl phthalate DMP 131-11-3 C10H10O4 99.5 2 邻苯二甲酸二乙酯 Diethyl phthalate DEP 84-66-2 C12H14O4 99.0 3 邻苯二甲酸二异丁酯 Diisobutyl phthalate DIBP 84-69-5 C16H22O4 99.0 4 邻苯二甲酸二丁酯 Dibutyl phthalate DBP 84-74-2 C16H22O4 99.0 5 邻苯二甲酸二（ 2-甲氧基
13、）乙 酯 Bis（ 2-methoxyethyl） phthalate DMEP 117-82-8 C14H18O6 94.0 6 邻苯二甲酸二（ 4-甲基 -2-戊 基）酯 Bis（ 4-methyl-2-pentyl） phthalate BMPP 146-50-9 C20H30O4 98.0 7 邻苯二甲酸二（ 2-乙氧基）乙 酯 Bis（ 2-ethoxyethyl） phthalate DEEP 605-54-9 C16H22O6 99.5 8 邻苯二甲酸二戊酯 Dipentyl phthalate DPP 131-18-0 C18H26O4 99.2 9 邻苯二甲酸二己酯 Dihe
14、xyl phthalate DHXP 84-75-3 C20H30O4 99.0 10 邻苯二甲酸丁基苄基酯 Benzyl butyl phthalate BBP 85-68-7 C19H20O4 97.0 11 邻苯二甲酸二（ 2-丁氧基）乙 酯 Bis（ 2-n-butoxyethyl） phthalate DBEP 117-83-9 C20H30O6 98.5 12 邻苯二甲酸二环己酯 Dicyclohexyl phthalate DCHP 84-61-7 C20H26O4 99.5 13 邻苯二甲酸二（ 2-乙基）己酯 Bis（ 2-ethylhexyl） phthalate DEHP
15、 117-81-7 C24H38O4 99.0 14 邻苯二甲酸二苯酯 Diphenyl phthalate DPhP 84-62-8 C20H14O4 99.5 15 邻 苯二甲酸二正辛酯 Di-n-octyl phthalate DNOP 117-84-0 C24H38O4 97.5 16 邻苯二甲酸二壬酯 Dinonylphthalate DNP 84-76-4 C26H42O4 99.5 DB13/T 5189.12 2020 5 B B 附 录 B （规范性附录） 16 种邻苯二甲酸酯的选择离子色谱图 B.1 16 种邻苯二甲酸酯的选择离子色谱图见图 B.1。 图 B.1 16种邻苯
16、二甲酸酯的选择离子色谱图 说明： 1 DMP 2 DEP 3 DIBP 4 DBP 5 DMEP 6 BMPP 7 DEEP 8 DPP 9 DHXP 10 BBP 11 DBEP 12 DCHP 13 DEHP 14 DPhP 15 DNOP 16 DNP DB13/T 5189.12 2020 6 C C 附 录 C （规范性附录） 邻苯二甲酸酯类化合物的定量和定性选择离子表 C.1 邻苯二甲酸酯类化合物的定量和定性选择离子信息见表 C.1。 表 C.1 邻苯二甲酸酯类化合物的定量和定性选择离子信息 序号 简称 中文名称 保留时间（ min） 定性离子 定量离子 1 DMP 邻苯二甲酸二甲
17、酯 7.73 77:135:194 163 2 DEP 邻苯二甲酸二乙酯 8.59 177:121:222 149 3 DIBP 邻苯二甲酸二异丁酯 10.32 223:167:205 149 4 DBP 邻苯二甲酸二丁酯 11.05 205:223:121 149 5 DMEP 邻苯二甲酸二（ 2-甲氧基）乙酯 11.37 149:193:251 59 6 BMPP 邻苯二甲酸二（ 4-甲基 -2-戊基）酯 12.12 167:251:121 149 7 DEEP 邻苯二甲酸二（ 2-乙氧基）乙酯 12.43 149:45:221 72 8 DPP 邻苯二甲酸二戊酯 12.80 237:21
18、9:167 149 9 DHXP 邻 苯二甲酸二己酯 14.92 251:104:76 149 10 BBP 邻苯二甲酸丁基苄基酯 15.06 91:206:238 149 11 DBEP 邻苯二甲酸二（ 2-丁氧基）乙酯 16.50 223:205:278 149 12 DCHP 邻苯二甲酸二环己酯 17.16 167:83:249 149 13 DEHP 邻苯二甲酸二（ 2-乙基）己酯 17.40 167:113:279 149 14 DPhP 邻苯二甲酸二苯酯 17.51 77:153:197 225 15 DNOP 邻苯二甲酸二 正辛酯 19.78 279:167:261 149 16 DNP 邻苯二甲酸二壬酯 22.29 57:71:167 149 _
