1、 ICS 13.060 C 51 DB37 山东省 地方标准 DB37/T 4145 2020 水质 丙烯酰胺的测定 液相色谱 -串联质谱法 Water quality Determination of acrylamide Liquid chromatography-Tandem mass spectrometry 2020 - 09 - 25 发布 2020 - 10 - 25 实施 山东省市场监督管理局 发布 DB37/T 4145 2020 I 目 次 前言 . II 1 范围 . 1 2 规范性引用文件 . 1 3 方法原理 . 1 4 试剂和材料 . 1 5 仪器与设备 . 2 6
2、 样品 . 2 7 分析步骤 . 2 8 结果计算与表示 . 4 9 精密度与准确度 . 5 10 质量保证和质量控制 . 5 DB37/T 4145 2020 II 前 言 本标准按照 GB/T 1.1 2009给出的规则起草。 本标准由山东省住房和城乡建设厅提出并组织实施。 本标准由山东省城镇给水排水标准化技术委员会归口。 本标准起草单位：山东省城市供排 水水质监测中心、国家城市供水水质监测网青岛监测站、国家城 市供水水质监测网杭州监测站、山东省分析测试中心、山东省济南生态环境监测中心、国家城市供水水 质监测网武汉监测站。 本标准主要起草人：辛晓东、贾瑞宝、孙韶华、赵清华、许燕、宋艳、王晓
3、芳、黄允河、赵汝松、 张厚勇、陈露、葛璇、王晓利、李小敏、梁玉。 DB37/T 4145 2020 1 水质 丙烯酰胺的测定 液相色谱 -串联质谱法 警告：实验中使用的溶剂和试剂均具有一定的毒性，对健康具有潜在的危害，应尽量避免与这些化 学品的直接接触。样品制备过程应在通风橱中进行，操作时应按规定要求佩戴防护器具 ,避免 接触皮肤 和衣物。 1 范围 本标准规定了测定生活饮用水及其水源水中丙烯酰胺的液相色谱 -串联质谱法。 本标准适用于生活饮用水及其水源水中丙烯酰胺的测定。 进样量 10 L时，本标准的方法检出限为 0.036 g/L，测定下限为 0.15 g/L。 2 规范性引用文件 下列文
4、件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T 5750.2 2006 生活饮用水标准检验方法 水样的采集与保存 GB/T 5750.3 2006 生活饮用水标准检验方法 水质分析质量控制 GB/T 32465 化学分析方法验证确认和内部质量控制要求 GB/T 33087 仪器分析用高纯水规格及试验方法 HJ/T 91 地表水和污水监测技术规范 HJ/T 164 地下水环境监测技术规范 3 方法原理 样品经 0.22 m滤膜过滤后直接进样，经液相色谱仪分离后进入串联质谱仪，采用
5、多反应监测（ MRM） 模式，根据保留时间和特征离子峰进行定性分析，内标法定量分析 。 4 试剂 和 材料 4.1 一次性针头过滤器： 0.22 m，聚四氟乙烯（ PTFE）材质。 4.2 一次性注 射器： 2.5 mL。 4.3 高纯水：水质应满足 GB/T 33087的规定。 4.4 甲醇：色谱纯。 4.5 载气：高纯氮，纯度 99.999 %。 DB37/T 4145 2020 2 4.6 丙烯酰胺标准溶 液： =1 000 mg/L， 溶剂为甲醇，有证标准物质。 4.7 丙烯酰胺同位素（ D3-丙烯酰胺）标 准溶液： =1 000 mg/L，溶剂为甲醇，有证标准物质。 4.8 丙烯酰胺
6、标准贮备 液： =10 .0 mg/L。 取 1.00 mL丙烯酰胺标准溶液（ 4.6），用甲醇（ 4.4）稀释 并定容至 100 mL，配制 10.0 mg/L丙烯酰胺标准贮备 液。于 4 以下冷藏密封避光保存。 4.9 D3-丙烯酰胺 标准贮备 液： =10.0 mg/L。 取 1.00 mL D3-丙烯酰胺标准溶液（ 4.7），用甲醇（ 4.4） 稀释并定容至 100 mL，配制 10.0 mg/L D3-丙烯酰胺标准贮备液。于 4 以下冷藏密封避光保存。 4.10 丙烯酰胺标准使 用液 ： =10.0 g/L。 取 100 L丙烯酰胺标准贮备液（ 4.8），用高纯水（ 4.3） 稀释并
7、定容至 100 mL，配制 10.0 g/L丙烯酰胺标准使用液。 4.11 D3-丙烯酰胺标准使用 液 ： =10.0 g/L。 取 100 L D3-丙烯酰胺标准贮备液（ 4.9），用高纯水 （ 4.3）稀释并定容至 100 mL，配制 10.0 g/L D3-丙烯酰胺标准使用液。 5 仪器与设备 5.1 液相色谱 -串联质谱 仪 ：配有电喷雾离子源。 5.2 色谱 柱： C18色谱柱或其他性能等效的色谱柱。 5.3 样品瓶： 2 mL。 5.4 容量瓶： 100 mL和 10 mL。 5.5 采样瓶：棕色玻璃瓶，具玻璃塞。 5.6 微量注 射器： 1 000 L。 6 样品 6.1 样品
8、的采集 与保存 按照 HJ/T 91和 HJ/T 164的相关规定采集样品。用 采样 瓶（ 5.5）采集样品。 按照 GB/T 5750.2 2006的相关规定保存样品 。样品采集后在 4 以 下 冷藏 保存， 24 h内完成水样过 滤处理并上机测试。若水样中存在残留氯，加入抗坏血酸去除余氯。 6.2 试样制备 样品经一次性针头过滤器（ 4.1）过滤，取样品于 10 mL容量瓶中，加入 400 L D3-丙烯酰胺标准使 用液（ 4.11），用样品定容至刻度。 置于进样瓶中，待测。如水样浓度较高或基体复杂，可将样品适当 稀释后，再经过 一次性针头过滤器 过滤。 6.3 空白试样制备 用高纯水（
9、4.3）代替样品，按照与试样制备（ 6.2）相同的步骤制备空白试样。 7 分析步骤 DB37/T 4145 2020 3 7.1 色谱 分析条件 7.1.1 流动相： A相 甲醇（ 4.4）， B相 水（ 4.3）， A:B=10:90（ V:V），等度洗脱。 7.1.2 流速： 0.3 mL/min。 7.1.3 柱温 ： 30 。 7.1.4 进样体积： 10 L。 7.2 质谱分析条件 7.2.1 离子源：电喷雾离子源，正离子模式。 7.2.2 离子 源温度： 350 。 7.2.3 扫描方式： MRM，多反应监测条件见表 1。 表 1 质谱分析参考条件 物质名称 母离子 子离子 Fra
10、gment V CE V 丙烯酰胺 72.1 55.1 43 9 27.1 43 17 D3-丙烯酰胺 75 58 44 9 43.8 44 15 7.3 校准 曲线的绘制 7.3.1 本方法使用 内标法 定量 。 7.3.2 校准 系列的配制：取 5个 10 mL容量瓶，用微量注射器（ 5.6）依次准确加入 200 L、 500 L、 1 000 L、 1 500 L和 2 000 L丙烯酰胺标准使用液（ 4.10）及 400 L D3-丙烯酰胺标准使用液（ 4.11）， 用高纯水（ 4.3）定容至刻度，配制浓度为 0.20 g/L、 0.50 g/L、 1.00 g/L、 1.50 g/L
11、和 2.00 g/L的校准曲线系列。 现用现配 。 7.3.3 按照质量浓度从低到高依次进样，以标准系列溶液中目标组分的浓度与内标物浓度的比值为横 坐标，以其对应的峰面积与内标物 峰面积的比值为纵坐标，建立校准曲线。 7.4 试样 测定 7.4.1 采用自动进样器 进样 ，进样量为 10 L。 7.4.2 按照与校 准曲线的 绘制 （ 7.3）相同的步骤进行试样（ 6.2）的测定。 7.4.3 丙烯酰胺 和 D3-丙烯酰胺 MRM色谱图见图 1、图 2所示。 DB37/T 4145 2020 4 图 1 丙烯酰胺 MRM 色谱图 图 2 D3-丙烯酰胺 MRM 色谱图 7.5 空白试验 按照与
12、试样测定（ 7.4）相同的步骤进行空白 试样 （ 6.3）的测定。 8 结果计算与表示 8.1 定性结果 根据丙烯酰胺和 D3-丙烯酰胺 MRM色谱图中的保留时间和特征离子对进行定性分析。 8.2 定量结果 根据计算公式（ 1）计算样品中组分的含量，结果以微 克每升（ g/L）表示。丙烯酰胺的定量离子 对为 72.1 55.1， D3-丙烯酰胺的定量离子对为 75 58。测定结果位数的保留与测定下限一致，最多保 留三位有效数字。 = x is is AfA RF . (1) 式中： 水样中目标化合物的质量浓度，单位为微克每升（ g/L）； is 水样中同位素内标化合物的质量浓度，单位为微克 每
13、升（ g/L）； xA 水样中目标化合物对应的离子峰面积； isA 水样中同位素内标化合物对应的离子峰面积 ； DB37/T 4145 2020 5 RF 目标化合物的平均相对响应因子； f 稀释倍数 。 9 精密度与准确度 9.1 精密度 5家实验室分别测定浓度为 0.1 g/L 2.0 g/L的纯水加标样品 ， 实验室内相对标准偏差为 2.0 % 12 %；实验室间相对标准偏差为 6.8 % 12 %；重复性限为 0.029 g/L、 0.07 g/L 和 0.35 g/L ； 再现性限为 0.042 g/L、 0.078 g/L和 0.80 g/L。 9.2 准确度 5家实验室分别测定地表水、地下水及生活饮用水加标样品。加标浓 度为 0.1 g/L 2.0 g/L ，加 标回收率为 85.6 % 119 %。 10 质量保证和质量控制 10.1 空白试验 每批次样品应做空白试验，测定结果不能超过方法的检出限。 10.2 校准曲线要求 分析样品之前，应建立能够覆盖样品浓度范围的至少 5个浓度点的校 准曲线，曲线的相关系数 r2应 大于 0.995。 10.3 平行样 平行双样测定结果的相对偏差满足 GB/T 5750.3 2006的要求。 10.4 基体加标 基体加标样品的加标回收率范围满足 GB/T 32465的要求。 _
