1、ICS 65.020.20B 21 DB3301浙 江 省 杭 州 市 地 方 标 准DB 3301/T 1081 2018三 叶 青 种 苗 生 产 技 术 规 程 2018 -06- 20 发 布 2018- 07 - 20 实 施杭 州 市 质 量 技 术 监 督 局 发 布 DB3301/T 1081 2018 I 前 言本 标 准 按 照 GB/T 1.1 2009给 出 的 规 则 起 草 。本 标 准 由 杭 州 市 农 业 局 提 出 并 归 口 。本 标 准 起 草 单 位 ： 杭 州 中 泽 生 物 科 技 有 限 公 司 、 杭 州 万 向 职 业 技 术 学 院 、 浙
2、 江 省 中 药 研 究 所 、 浙 江大 学 。本 标 准 主 要 起 草 人 ： 陈 加 红 、 李 梦 君 、 沈 晓 霞 、 沈 斌 斌 、 吴 殿 星 、 周 志 丹 、 杨 峰 。 DB3301/T 1081 2018 1 三 叶 青 种 苗 生 产 技 术 规 程1 范 围本 标 准 规 定 了 三 叶 青 种 苗 生 产 的 术 语 定 义 、 扦 插 繁 殖 场 地 选 择 和 准 备 、 扦 插 育 苗 、 组 培 育 苗 、 病 虫害 防 治 、 出 圃 、 档 案 管 理 、 模 式 图 等 。本 标 准 适 用 于 三 叶 青 种 苗 生 产 。2 规 范 性 引 用
3、 文 件下 列 文 件 对 于 本 文 件 的 应 用 是 必 不 可 少 的 。 凡 是 注 日 期 的 引 用 文 件 ， 仅 注 日 期 的 版 本 适 用 于 本 文 件 。凡 是 不 注 日 期 的 引 用 文 件 ， 其 最 新 版 本 （ 包 括 所 有 的 修 改 单 ） 适 用 于 本 文 件 。 GB 3095 环 境 空 气 质 量 标 准GB 5084 农 田 灌 溉 水 质 标 准GB/T 8321 农 药 合 理 使 用 准 则GB 15618 土 壤 环 境 质 量 标 准NY/T 1276 农 药 安 全 使 用 规 范 总 则3 术 语 和 定 义下 列 术
4、语 和 定 义 用 于 本 标 准 。3.1 三 叶 青又 名 三 叶 崖 爬 藤 （ 学 名 ： Tetrastigma hemsleyanum Diels et Gilg） ， 葡 萄 科 多 年 生 草 质 藤 本 ，块 根 入 药 。 3.2 母 本 株生 长 健 壮 ， 作 为 营 养 繁 殖 材 料 采 集 对 象 的 三 叶 崖 爬 藤 植 株 。3.3 组 培 苗利 用 侧 芽 作 为 外 植 体 ， 采 用 组 织 培 养 技 术 生 产 的 种 苗 。4 产 地 选 择 及 准 备4.1 产 地 环 境产 地 土 壤 环 境 应 符 合 GB 15618规 定 的 二 级
5、标 准 ； 空 气 质 量 应 符 合 GB 3095规 定 的 二 级 标 准 ； 灌 溉 水质 应 符 合 GB 5084规 定 的 二 级 标 准 。 4.2 温 室 育 苗 DB3301/T 1081 2018 2 扦 插 及 组 培 苗 移 植 通 常 选 择 在 配 备 各 类 移 动 苗 床 的 温 室 中 进 行 ， 如 无 移 动 苗 床 ， 地 面 需 覆 盖 园 艺 地布 。 遮 光 率 为 50% 60%。4.3 露 地 育 苗露 地 育 苗 场 地 表 面 应 平 整 无 杂 草 ， 覆 盖 园 艺 地 布 ， 搭 建 荫 棚 ， 其 上 覆 盖 遮 光 率 为 50
6、% 60%的 遮 阳 网 。5 扦 插 育 苗5.1 扦 插 基 质以 70%园 土 +20%泥 炭 +10%草 木 灰 作 扦 插 基 质 ， 加 施 基 质 量 1 .5 % 2.5%的 腐 熟 有 机 肥 或 缓 释 肥 作 基 肥 ，充 分 拌 匀 ， 消 毒 。 扦 插 前 装 入 50孔 穴 盘 ， 压 紧 。5.2 扦 插 时 间 3月 上 旬 6月 中 旬 ， 10月 上 旬 11月 下 旬 。5.3 插 穗 选 择在 母 本 株 上 选 择 二 年 生 健 壮 枝 条 ， 斜 剪 成 2节 3节 、 8 10 长 的 插 穗 ， 上 部 留 1叶 。5.4 插 穗 处 理扦
7、插 前 用 甲 基 托 布 津 （ 70粉 剂 ） 500倍 液 浸 泡 插 穗 全 株 1h 2h,然 后 用 IBA500 /L浸 泡 插 穗 基 部 1min后 马 上 扦 插 。5.5 扦 插 方 法将 插 穗 斜 插 入 穴 孔 ， 每 穴 1株 ， 入 土 深 度 为 技 条 的 1/3 1/2， 插 后 压 紧 ， 浇 透 水 。5.6 插 后 管 理 5.6.1 浇 水扦 插 后 35d 40d生 根 出 叶 前 ， 每 天 喷 水 （ 浇 水 ） 1次 2次 ， 保 持 基 质 潮 湿 。 生 根 后 减 少 浇 水 次 数 ，增 加 单 次 浇 水 量 。5.6.2 保 温
8、 保 湿可 在 穴 盘 上 方 搭 建 小 拱 棚 ， 保 持 60% 80%的 空 气 相 对 湿 度 和 15 25温 度 。5.6.3 施 肥扦 插 后 20d， 每 隔 15d喷 施 1次 浓 度 为 0.3%磷 酸 二 氢 钾 肥 液 ， 一 般 喷 施 3次 4次 。5.6.4 炼 苗扦 插 后 60d 80d， 视 根 系 及 枝 叶 生 长 情 况 ， 分 次 逐 步 延 长 通 风 时 间 、 提 高 光 照 强 度 ， 最 后 达 到 栽 培 正 常 条 件 。6 组 培 育 苗 DB3301/T 1081 2018 3 6.1 组 培 流 程外 植 体 选 取 外 植 体
9、 消 毒 外 植 体 切 段 初 代 培 养 增 殖 培 养 生 根 培 养 炼 苗 组 培 苗 移 植6.2 外 植 体 的 获 得 和 处 理6.2.1 外 植 体 的 选 取选 择 无 病 虫 害 、 无 病 毒 侵 染 的 生 长 健 壮 的 当 年 生 嫩 枝 。6.2.2 外 植 体 的 消 毒将 采 取 的 外 植 体 嫩 枝 ， 用 洗 涤 剂 水 刷 洗 ， 经 自 然 水 冲 洗 干 净 。 在 超 净 工 作 台 上 ， 将 外 植 体 嫩 枝 先 放入 75%的 乙 醇 溶 液 中 浸 泡 10s后 ， 用 无 菌 水 洗 净 ， 再 放 入 0.1%HgCl2或 2%
10、次 氯 酸 钠 溶 液 中 消 毒 10min 20min后 ， 用 无 菌 水 冲 洗 3次 5次 。 6.2.3 外 植 体 的 切 段在 超 净 工 作 台 上 ， 用 火 焰 灭 菌 的 解 剖 刀 、 镊 子 将 嫩 枝 均 匀 切 分 成 长 0.8cm 1.0cm的 小 段 ， 每 段 含 1个 腋 芽 ， 接 种 于 事 先 准 备 好 的 诱 导 培 养 基 中 ， 每 瓶 5株 10株 。 芽 朝 上 插 入 培 养 基 中 。6.3 初 代 培 养6.3.1 初 代 培 养 基基 本 培 养 基 为 MS培 养 基 。 植 物 激 素 为 ： 0.3 mg/L 0.5mg
11、/L浓 度 的 苄 氨 基 腺 嘌 呤 （ 6-BA） ； 0.01mg/L0.05mg/L浓 度 的 萘 乙 酸 (NAA） 。6.3.2 培 养 条 件培 养 温 度 为 25 2 。 前 期 暗 培 养 ， 待 有 芽 萌 发 后 光 照 强 度 3000lx 5000lx培 养 ， 光 照 时 间 为 10h/d 12h/d， 待 组 培 苗 生 长 满 瓶 后 再 增 殖 培 养 。 6.4 增 殖 培 养6.4.1 增 殖 培 养 基基 本 培 养 基 为 MS培 养 基 。 植 物 激 素 为 2.0mg/L 4.0mg/L浓 度 的 苄 氨 基 腺 嘌 呤 （ 6-BA） ；
12、0.1mg/L0.3mg/L浓 度 的 萘 乙 酸 (NAA） 。6.4.2 培 养 条 件培 养 温 度 为 25 2 。 光 照 强 度 3000lx 5000lx， 光 照 时 间 为 10 h/d 12h/d。 待 组 培 苗 生 长 至 大于 2cm后 ， 可 以 将 小 苗 切 断 进 行 生 根 培 养 。6.5 生 根 培 养6.5.1 生 根 培 养 基 基 本 培 养 基 为 1/2MS培 养 基 。 植 物 激 素 为 0.5mg/L 2.0mg/L浓 度 的 吲 哚 丁 酸 （ IBA） 。6.5.2 培 养 条 件 DB3301/T 1081 2018 4 培 养 温
13、 度 为 25 2 。 光 照 强 度 3000 lx 5000lx， 光 照 时 间 为 10 h/d 12h/d。 待 组 培 苗 生 长 至大 于 5cm后 ， 可 以 将 小 苗 移 至 温 室 进 行 炼 苗 。6.6 炼 苗移 植 前 ， 将 培 养 瓶 放 置 在 温 室 自 然 散 射 光 下 ， 封 口 炼 苗 3d 7d。 然 后 再 开 口 炼 苗 3d 7d， 开 口 炼 苗时 可 在 培 养 基 表 面 洒 薄 薄 一 层 水 ， 温 度 控 制 在 25 3 。6.7 组 培 苗 移 植6.7.1 基 质以 60%泥 炭 土 +40%珍 珠 岩 作 移 栽 基 质
14、， 要 求 疏 松 透 气 且 有 一 定 肥 力 。 调 节 pH值 至 5.5 6.0。6.7.2 移 栽 炼 苗 完 成 后 ， 加 水 将 培 养 基 打 散 倒 出 ， 再 将 小 苗 清 洗 干 净 后 ， 栽 植 于 穴 盘 中 。6.8 移 植 后 的 管 理6.8.1 水 分 管 理移 栽 时 浇 足 水 ， 以 后 每 2d 3d淋 水 一 次 。 2周 3周 后 ， 相 对 湿 度 控 制 在 80% 90%， 当 第 一 片 新 叶 完全 张 开 后 ， 降 低 湿 度 至 60% 70%。6.8.2 光 照 和 温 度 管 理移 栽 后 ， 光 照 强 度 控 制 在
15、 2000lx 3000lx。 整 个 育 苗 期 ， 温 度 宜 控 制 在 15 30 之 间 。6.8.3 施 肥移 栽 后 第 4周 8周 ， 每 周 喷 施 1次 浓 度 为 0.3%磷 酸 二 氢 钾 肥 液 。 7 病 虫 害 防 治三 叶 青 苗 期 病 虫 害 较 少 ， 可 通 过 降 低 湿 度 、 加 强 通 风 、 保 持 生 产 环 境 清 洁 等 方 法 防 治 病 害 ； 可 采 用杀 虫 灯 、 沾 虫 板 、 防 虫 网 减 轻 虫 害 。 如 有 必 要 也 可 采 取 药 剂 防 治 ， 使 用 农 药 应 符 合 NY/T1276和 GB/T8321的
16、 规 定 。8 出 圃组 培 苗 移 栽 培 育 80d 100d， 扦 插 苗 完 成 炼 苗 后 ， 新 根 5条 以 上 ， 平 均 根 长 超 过 3 ， 新 叶 3片 5片以 上 ， 植 株 生 长 健 壮 、 无 病 虫 害 、 叶 色 翠 绿 即 可 出 圃 。9 档 案 管 理 9.1 生 产 单 位 应 完 整 保 存 真 实 的 产 地 环 境 质 量 资 料 、 管 理 和 销 售 记 录 。9.2 管 理 和 销 售 记 录 包 括 投 入 物 品 品 种 、 来 源 、 数 量 、 购 买 时 间 和 地 点 、 使 用 方 法 、 使 用 时 间 、 生 产管 理
17、操 作 时 间 与 方 法 、 操 作 人 员 、 种 苗 出 圃 时 间 及 销 售 情 况 等 。 DB3301/T 1081 2018 5 10 模 式 图三 叶 青 种 苗 生 产 技 术 规 程 模 式 图 参 见 附 录 A、 附 录 B。 DB3301/T 1081 2018 6 附 录 A（ 资 料 性 附 录 ）三 叶 青 种 苗 生 产 技 术 规 程 模 式 图 (扦 插 育 苗 )三 叶 青 种 苗 生 产 技 术 规 程 模 式 参 见 图 A.1。 图 A.1 三 叶 青 种 苗 生 产 技 术 规 程 模 式 图 (扦 插 育 苗 ) DB3301/T 1081 2018 7 BA附 录 B（ 资 料 性 附 录 ）三 叶 青 种 苗 生 产 技 术 规 程 模 式 图 (组 培 育 苗 )三 叶 青 种 苗 生 产 技 术 规 程 模 式 (组 培 育 苗 )参 见 图 B.1。 图 B.1 三 叶 青 种 苗 生 产 技 术 规 程 模 式 图 (组 培 育 苗 ) DB3301/T 1081 2018 8 _
