1、 ICS 65.020.01 CCS B23 15 内蒙古自治区地方标准 DB15/T 21552021 马铃薯黑痣病田间抗性鉴定技术规程 Technique standards for resistant identification of stem canker and black scurf by Rhizoctonia solani in potato in fields 2021-04-15发布 2021-05-15实施 内蒙古自治区市场监督管理局 发布 DB15/T 21552021 I 前言 本文件按照GB/T 1.12020标准化工作导则 第1部分：标准化文件的结构和起草规则的
2、规定 起草。 本文件由内蒙古自治区马铃薯生产与种植标准化技术委员会（SM/TC42）归口。 本文件起草单位：内蒙古农业大学、中国农业科学院农业资源与农业区划研究所、兴安盟农牧业科 学研究所。 本文件主要起草人：张笑宇、于卓、李得宙、于肖夏、卢艳丽、尤艳华、张冬梅、李宇晨、刘雨薇、 王野、冯亚艳、王丽玮、修志君、宋亚迪、邢星。 DB15/T 21552021 1 马铃薯黑痣病田间抗性鉴定技术规程 1 范围 本文件规定了田间马铃薯抗黑痣病鉴定材料的选择与鉴定方法。 本文件适用于马铃薯黑痣病田间抗性鉴定。 2 规范性引用文件 本文件没有规范性引用文件。 3 术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。
3、3.1 马铃薯黑痣病 black scurf of potato 由丝核菌侵染马铃薯引起的一种病害，症状为在幼芽、匍匐茎及地下茎上出现褐色坏死斑，影响幼 苗、匍匐茎和地下茎的生长，严重的引起烂芽，造成匍匐茎和地下茎生长势减弱甚至死亡；在块茎表面 形成黑色菌核，称为黑痣。 3.2 马铃薯蔗糖琼脂培养基 Potato-Saccharose-Agar （PSA） 主要用于普通真菌的培养。 4 鉴定材料 4.1 马铃薯 抗病对照品种底西芮、感病对照品种大西洋、被鉴定材料。 4.2 病原菌 取自内蒙古马铃薯主产区黑痣病发病植株，经病原菌分离，致病性测定和鉴定得到的黑痣病致病菌 株，于4 的冰箱保存。 4
4、.3 培养基 PSA培养基。 5 鉴定方法 DB15/T 21552021 2 5.1 PSA培养基平板制备 将马铃薯去皮切成1 cm3左右的小块，取200 g加入1000 mL蒸馏水，在容器内煮沸20min左右，至马 铃薯块软而不烂时，用2层纱布过滤，滤液加入琼脂粉15 g18 g，加热搅拌至融化，再加蔗糖20 g搅 拌溶解，然后定容至1000 mL，分装到三角瓶内，121 高压湿热灭菌20 min，冷却至室温倒入培养皿 内，制成PSA平板。 5.2 病原菌活化 将保存的黑痣病病原菌接种在PSA培养基平板中央，置25 恒温培养箱中黑暗培养4 d。 5.3 接种体的制备 100 g麦麸加200
5、 mL蒸馏水搅拌均匀，装入500 mL的三角瓶中，121 高压灭菌40 min，冷却后每 瓶接种活化后的病原菌菌饼10片（直径0.8 cm），置25 恒温培养箱中黑暗培养30 d，直至产生大量 菌丝和菌核，取出晾干，搓成粉末，混匀备用。 5.4 田间鉴定 取马铃薯黑痣病菌接种体2 g4 g，接种在播种穴内，然后播种覆土。按照常规的马铃薯栽培模式 进行管理，采用滴灌或喷灌的灌溉方式，避免大水漫灌。重复2年。 5.5 地下茎病情调查和抗性评价 在播种后55 d60 d，对地下茎发病情况进行调查，每个品种调查20株，重复3次。按照表1的分级 标准调查病级，计算发病率、病情指数和相对抗病指数，用相对抗
6、病指数进行抗性评价，见表2，感病 对照品种大西洋病情指数大于40数据有效。 表1 马铃薯黑痣病地下茎病情分级标准 级别 代号 茎部病斑面积占地下茎面积的比例（%） 1 0 0 2 1 15 3 2 625 4 3 2650 5 4 5175 6 5 76100 计算公式： 发病率（%）=发病植株数/调查植株总数100 病情指数=（各级病薯数各级代表值）/（调查总薯数最高一级代表值）100 相对抗病指数=1 -所测品种病情指数/发病最重品种病情指数 DB15/T 21552021 3 表2 相对抗病指数评价标准 分级 相对抗病指数 抗性评价 1 1.00 免疫（I） 2 0.990.80 高抗（
7、HR） 3 0.790.60 中抗（MR） 4 0.590.40 中感（MS） 5 0.390.00 高感（HS） 5.6 块茎病情调查及抗性评价 马铃薯成熟收获后，在阴凉处放置2 d，使马铃薯块茎上的菌核干燥，用清水冲洗表面泥土（清洗 时注意不要用手搓，以防菌核脱落），按表3的分级标准调查病级，每个处理调查100个块茎，计算病情 指数和相对抗病指数，利用相对抗病指数进行评价，感病对照品种大西洋病情指数大于40数据有效。病 情指数、相对抗病指数计算方法同上，抗性评价方法见表3。 表3 马铃薯黑痣病块茎病情分级标准 级别 代号 块茎表面菌核面积占块茎总面积的比例（%） 1 0 0 2 1 1 3 2 110 4 3 1120 5 4 2150 6 5 51100
