1、国家环境保护总局标准固定污染源排气中苯并芘的测定高效液相色谱法发布实施国家环境保护总局发布国家环境保护总局标准固定污染源排气中苯并芘的测定高效液相色谱法国家环境保护总局批准实施适用范围本标准适用于固定污染源有组织排放的苯并芘测定当采气体积为样品定容色谱进样量为时苯并芘的检出限为定量测定的浓度范围为方法原理用无胶玻璃纤维滤筒或玻璃纤维滤膜采集样品用环己烷提取苯并芘提取液通过费罗里硅土层析柱然后用二氯甲烷和丙酮的混合溶剂洗脱吸附在柱上的苯并芘经浓缩后在配有荧光检测器的高效液相色谱仪上测定引用标准下列标准所包含的条文通过在本标准中引用而构成为本标准的条文固定污染源排气中颗粒物测定和气态污染物采样方法
2、试剂和材料除非另有说明分析中均使用符合国家标准的分析纯试剂和按制备的纯水纯水用去离子水或蒸馏水加高锰酸钾在碱性条件下用全玻璃蒸馏器重蒸馏在蒸馏全过程中应始终保持紫红色否则应补加高锰酸钾所得纯水经本法的空白检验应无显著干扰峰甲醇用全玻璃蒸馏器加碱重蒸收集馏分经微孔滤膜过滤后使用经本法空白检验应无显著干扰峰二氯甲烷用全玻璃蒸馏器加碱重蒸馏经本法空白检验无干扰峰丙酮经与相同的步骤处理环己烷经与相同的步骤处理费罗里硅土目色层分析用在加热冷却后用水调匀至含水量密封保存于磨口试剂瓶中苯并芘标准储备液准确称取固体苯并芘标准物质溶于环己烷中转移至容量瓶中用环己烷稀至标线或用苯并芘标准溶液用环己烷或二氯甲烷稀释
3、成浓度为的溶液上述储备液应保存在冰箱中苯并芘标准使用液吸取标准储备液于容量瓶中用环己烷或二氯甲烷稀释至标线由于使用的仪器灵敏度或分析样品浓度不同此标准使用液浓度应按需要改变仪器和设备高效液相色谱仪配备有荧光检测器反相色谱柱柱材质不锈钢柱柱特性柱长柱内径柱填料即或索氏提取器脂肪抽提器烧瓶容量层析柱长内径的圆柱形玻璃柱下部玻璃活塞不涂润滑油浓缩器附浓缩瓶带刻度微量注射器小玻璃珠或沸石玻璃棉玻璃纤维滤纸加热后存放于具磨口玻璃瓶中其他常用玻璃器皿恒温水浴锅温控可调节烟气采样仪按中对应普通采样管法采样对应皮托管平行测速采样法对应动压平衡型等速采样管法对应静压平衡型等速采样管法配置采样仪器选用与采样仪器相
4、匹配的无胶玻璃纤维滤筒或超细玻璃纤维滤膜取样样品的采集和保存采样位置和采样点按中确定采样位置和采样点样品采集按中选定采样方法选择的采样方法应与采样仪器的配置相一致将玻璃纤维滤筒或滤膜装入采样仪上然后按中的某项视采样方法而定进行采样采气体积约为样品的保存采集好的样品须避光保存或可用黑纸包好放入冷藏箱中保存采样后应尽快在内进行前处理处理好的样品在个月内分析完毕样品的前处理样品中苯并芘的提取将已采样品的无胶滤筒或超细玻璃纤维滤膜尘面朝里折叠后小心放进索氏提取器的抽提筒中注意不要堵塞虹吸回流管加入环己烷置于温度为以上的水浴锅中连续回流提取冷却备用提取液的净化所得的提取液用费罗里硅土层析柱进行净化和富集
5、层析柱的装填先将少量玻璃棉填入玻璃层析柱的下端用以承托填料加入环己烷润湿柱子称约费罗里硅土于小烧杯中用环己烷制成匀浆以湿式装柱法装填入上述柱中并放出柱中过量的环己烷至填料的界面以上提取液的净化从层析柱的上端加入样品提取液另用环己烷分三次清洗节中所用的索氏提取器一并加入此层析柱的上端全部溶液以的流速通过层析柱回收通过柱子的环己烷然后用二氯甲烷和丙酮的混合溶液洗脱吸附在柱子的苯并芘洗脱液收集于的浓缩瓶中待浓缩若样品中苯并芘的含量较高则不需浓缩定容后即可用液相色谱仪进行分析试样的浓缩将盛有洗脱液的浓缩瓶接入浓缩器中下部浸入通风橱中的水浴锅中在的水温下减压浓缩至左右用少量丙酮洗容器内壁流入浓缩瓶中再如
6、上法浓缩至小于冷却补加丙酮定容有刻度留待液相色谱分析或将浓缩液转移至液相色谱仪上自动进样器专用的进样小瓶中封口后待进样色谱分析操作步骤仪器调试按装调试液相色谱仪使之正常运行并能达到预期的分离效果预热运行至获得稳定的基线色谱条件固定相反相色谱柱柱箱温度流动相流动相组成甲醇水流动相流速亦可按柱的性能进行适当调整一般采用等度洗脱即恒溶剂组成恒流洗脱在做实际样品时为了加快后面杂质峰的流出可在苯并芘峰流出后适当改变溶剂组成或改变流速进行梯度洗脱以减少下一次进样的等待时间检测器使用荧光检测器设定激发波长发射波长进样量通常为自动或手动记录仪或积分仪放大或衰减依据样品中被测组份的含量进行适当调节使所得谱图在记
7、录纸的量程以内纸速或校准采用外标法定量标准样品标准样品的制备见节使用次数使用标准样品进行周期性的重复校准视色谱仪的稳定性能状况决定重复校准周期的长短一般每个工作日测定或次或者在每测定个样品后校准一次色谱分析时使用标准样品的条件标准样品和试样在进样体积上最好相同响应值也应接近调节仪器的重复性条件在仪器运转正常的情况下连续二次进标准样品其响应值峰高或峰面积的相对偏差不大于即可认为仪器处于稳定状态校准数据的表示以响应值对进样量作校准曲线可得一条通过原点的直线响应值与进样量的比值为一常数可用平均比值或响应因子代替校准曲线来计算测定结果测定进样进样方式自动进样器进样或用注射器进行手动六通阀进样进样量见节
8、自动进样器进样时可在仪器面板上预先设定记录记下记录纸或积分仪上的放大或衰减的倍数及记录纸的走纸速度关于苯并芘的色谱峰可用标准样进行核对记下相应峰的保留时间若产生基线漂移则记下漂移值对于色谱图的考察标准色谱图在本方法确定的色谱条件下可使苯并芘峰与相邻近的几个多环芳烃峰得到很好的分离见图图标准色谱图苯并蒽苯并荧蒽苯并荧蒽苯并芘定性分析主要依据保留时间进行定性以试样中相应峰的保留时间和苯并芘标样的保留时间相比较来定性用作定性的保留时间窗口宽度以当天测定标样的实际保留时间变化为基准用保留时间标准偏差的三倍计算设定窗口宽度辅助定性方法可采用标准样品添加法即在欲定性的样品中添加苯并芘标样使峰高叠加的方法或
9、可借助其他仪器样品分离后收集组分送红外光谱质谱核磁共振波谱等进行权威性定性帮助验证定量分析色谱峰的测量以峰的起点和终点的连线为峰底以峰的最大值对时间轴作垂线对应的时间即为保留时间峰顶至峰底间的线段即为峰高通过峰高的中点作平行峰底的直线此直线与峰两侧相交两点之间的距离为半高峰宽峰与峰底之间的面积为峰面积等于峰高乘半高峰宽在使用色谱数据处理器或其他积分仪时峰面积值及峰高值可在记录纸上打印出来单点比较法定量使用单点比较法进行定量分析时应符合以下条件标准样品和被测样品要同时进行分析进样体积相同被测样品的响应值应与标准样品的响应值接近一个样品连续进样三次测定值的相对偏差小于取测定平均值结果按下式计算或式
10、中固定源排气中苯并芘的平均浓度标样中苯并芘进样量对其峰高或峰面积的比值或被测试样中的苯并芘峰高或峰面积或标准样品中苯并芘峰高或峰面积或苯并芘标准样品的浓度苯并芘标准样品进样体积被测试样定容后进样体积被测试样最后定容体积换算成标准状态下的气体采样体积校准曲线法定量从所测得的未知样品中苯并芘峰高或峰面积直接从校准曲线上查得苯并芘的量或由回归方程式计算得出苯并芘的量再按下式计算有组织排气中苯并芘的浓度式中的意义同上进样未知样品的苯并芘的量结果的表示定性结果依据节中的分析确定样品中是否含有苯并芘定量结果含量的表示方法按节中的公式计算出的结果为某一样品所代表的有组织排放气体中苯并芘的含量以或换算成表示排
11、放浓度的计算按中或计算苯并芘有组织排放的排放浓度排放速率的计算按中计算苯并芘有组织排放的排放速率以表示精密度和准确度精密度由二个实验室分析苯并芘含量为的统一样品结果为重复性标准偏差重复性相对标准偏差为重复性为再现性标准偏差再现性相对标准偏差为再现性为准确度二个实验室对于统一样品进行不经过前处理的六次加标回收试验所得的加标回收率在之间平均对于实际样品进行六次全程加标回收测定所得的加标回收率在之间平均说明由于苯并芘是多环芳烃中最危险的强致癌物之一因此操作时必须极其小心不允许人体与苯并芘包括多环芳烃的固体物质溶剂萃取物及标准品接触苯并芘多环芳烃可随溶剂一起挥发而粘附于具塞瓶子的外部因此处理与之有关的容器及实验操作过程必须使用抗溶剂的手套被苯并芘多环芳烃污染的容器可用紫外灯在紫外线照射下检查并置于铬酸洗液中浸泡标准溶液应在有适当设备如合适的毒气橱防护衣服防尘面罩等的实验室中配制对于用固体苯并芘配制标准溶液在没有合适的安全设备及尚未准确掌握使用技术之前不能进行本实验所用的甲醇环己烷二氯甲烷及丙酮等均为易燃的有机溶剂应在通风橱中操作本实验均应在避开直接阳光照射下进行实验废液不能随意丢弃应集中回收在玻璃容器中统一处理附加说明本标准由国家环境保护总局科技标准司提出本标准由上海市环境监测中心负责起草本标准主要起草人顾光华本标准委托中国环境监测总站负责解释
