1、 ICS 79.020 B71 中 华 人 民 共 和 国 林 业 行 业 标 准 LY XX/T XXXXX XXXX 竹木材料及其制品表面防霉变效果评价 环境试验箱法 Evaluating the resistance of bamboo/wood product surfaces to mold growth Environmental chamber testing method （报批稿） - -发布 - -实施 国家林业和草原局 发布 XX/T XXXXX XXXX I 前 言 本文件按照 GB/T 1.1-2020标准化工作导则 第 1部分：标准化文件的结构和起草规则的规定起 草
2、。 本 文件 由全国竹藤标准化技术委员会（ SAC/TC263）提出并归口。 本 文件 起草单位：广东省林业科学研究院、国际竹藤中心、仁化县奥达胶合板有限公司、广东省质 量监督林产品检验站、国家林业和草原局林产品质量检验检测中心（广州）、 浙江农林大学。 本 文件 主要起草人：何雪香、马红霞、覃道春、孙芳利、 张燕君、陈利芳、谢桂军、刘杏娥、曹永 建、王剑菁、陆方、李兴伟、潘金闪。 XX/T XXXXX XXXX 1 竹木材料及其制 品表面防霉变效果评价 环境试验箱法 1 范围 本 文件 规定了 环境试验箱法 测定 竹木材料及其制品 表面防霉变 效果及 评价方法 。 本 文件 适用于室内用竹木
3、材料及其制品防霉变性能检验评价，也可用于竹木材用防霉剂 的防霉效果评价。 2 规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注 日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版 本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T 14019 2009 木材防腐术语 GB/T 18261 2013 防霉剂对木材霉菌及变色 菌防治效力的试验方法 GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法 3 术语和定义 GB/T 14019 2009 界定的术语和定义适用于本文件。 4 仪器设备 4.1 霉菌培养实验室主要仪器设备 。 4.1.
4、1 蒸汽高压灭菌锅，最高设计温度 138，最高设计压力 0.25 MPa。 4.1.2 超净工作台，洁净等级不低于 100 级 。 4.1.3 霉菌培养箱，温度范围 0 65 , 相对湿度范围 60% 90%。 4.1.4 天平， 精确到 0.01 g。 4.1.5 培养皿，直径 90 mm。 4.1.6 直口 三角瓶， 500 mL。 4.1.7 烧杯， 500 mL。 4.1.8 酒精灯、镊子等。 XX/T XXXXX XXXX 2 4.2 霉菌接种孢子悬浮液制备主要仪器设备 4.2.1 实验室用组织捣碎机， 1 L。 4.2.2 手持式喷雾器， 500 mL。 4.2.3 脱脂棉纱布，型
5、号 （ 28 28） tex， （ 118 110） 根。 4.3 环境试验箱 环境试验箱由 箱盖、 箱体、试件架、 土壤托盘、 加热及气流微循环装置等组成，详见附 录 A。 5 试验材料 5.1 辅助材料与试剂 5.1.1 分散剂 吐温 80或 Triton X-100 用于制备接种用霉 菌孢子悬浮液。 5.1.2 环氧树脂 用于密封防霉试件切口等未处理部分。 5.1.3 水 符合 GB/T 6682中三级水要求 。 5.2 试样要求及试件制备 5.2.1 试样要求 试样应无缺陷，无霉变、腐朽或虫蛀。木材对照样选用马尾松（ Pinus massoniana Lamb.） 边材等易霉变的松树类
6、木材；竹材对照样选用 3 年 5 年生 精刨毛竹条 （ Phyllostachys edulis (Carrire) J. Houzeau） 。 5.2.2 试 件 制备 木材 试 件 尺寸为 100 mm（顺纹） 75 mm 12 mm， 竹 材试件尺寸为 100 mm（顺纹） 75 mm 厚度 ， 其它材料制品尺寸为 100 mm 75 mm厚度 。 每一试验条件至少 6 个重复试 件 。 从防霉处理试样上锯制试件，应用环氧树脂对切口进行密封，晾干后进行测试。 6 试件防霉处理步骤 6.1 试件称重，然后根据防霉剂使用要求对试件进行处理。 XX/T XXXXX XXXX 3 6.2 试 件
7、 处理完毕后， 用吸水纸吸去表面多余药剂，立即称重，根据 GB/T 18261-2013 中 4.4.2 计算试件吸药量。 6.3 处理试件 置于洁 净、通风良好 处 自然晾干。如使用的防霉剂有特殊要求，则应根据防 霉 剂使用要求进行干燥。 6.4 对于新开发的防霉剂产品，至少设置 3 个 吸 药量梯度。 6.5 若同组处理测试试件吸药量相对于平均吸药量偏差超过 15%， 则应剔除。 7 霉菌接种菌种准备 7.1 供试霉菌种类 7.1.1 变色菌 ： 可可球二 孢 (Botryodiplodia theobromae Pat.)； 串珠镰刀菌 (Fusarium monilifome Shel
8、don） ； 链格 孢霉（ Alternaria alternale (Fries） Keissl)， 异名细交链格孢 (A.denuis Nees)。 7.1.2 霉菌 ： 黑曲霉 （ Aspergillus niger V. Tiegh）； 桔青霉（ Penicillium citrinum Thom）； 绿色木霉（ Trichoderma viride Pers. ex Fr.）； 黄曲霉 （ Aspergillus flavus LK.）； 出芽短梗霉（ Aureobasidium pullulans (de Bary） Arn.)； 球 毛壳菌（ Chaetemium globosu
9、ms Kunze ex. Fr.） 。 7.1.3 菌种规定 7.1.3.1 允许选择同属不同种的变色菌和霉菌菌株作为供试菌种。 7.1.3.2 测试时，应使用包括至少 1 种变色菌和至少 3 种霉菌的混合菌体接种； 如测试对 象为防霉剂的防霉效果，应采用以上 9 个菌种的混合菌体接种。 其中，竹材及其制品必须包 括黄曲霉、链格孢霉和串珠镰刀菌；人造板必须包括黄曲霉。 除上述规定菌种外，也可采用 客户指定的特定霉菌菌种。 7.2 培养基制备 7.2.1 马铃薯 -葡萄糖琼脂培养基（ PDA）配制 XX/T XXXXX XXXX 4 取去皮马铃薯 200.0 g, 切成小块，加水 1000 mL
10、，煮沸 30 min后 滤去马铃薯块， 加入 葡 萄糖 20.0 g、蛋白胨 0.5 g、硫酸镁 0.3 g、磷酸 氢二钾 0.5 g、琼脂 25.0 g， 加热溶化，将 滤液用水 补足至 1000 mL。 7.2.2 麦芽糖琼脂培养基配制 将 1000 mL水 在水浴锅中 加热至 50 60 ， 陆续加入麦芽提取粉 15.0 g、琼脂粉 25.0 g， 一边加入一边搅拌 。加热直至琼脂完全溶解。 7.2.3 培养基消毒 将培养基置于蒸汽灭菌锅中灭菌，压力 0.1 MPa，温度 121， 灭菌 40 min。 7.2.4 培养基分装 灭菌后的培养基 倒入已灭菌的培养 皿中， 制成培养基平板备用
11、。 7.3 供试菌种培养 在无菌条件下，将供试菌种接种在 平板培养基上，然后置于霉菌培养箱中保持温度（ 28 1） 、 相对湿度 75% 85%， 培养 14 d 20 d 备用。每种供试菌种不少于 6 个 培养皿 。 7.4 霉菌孢子悬浮液的制备 在培养皿中加入 10 mL 水 ， 滴入 2 滴 吐 温 80 或 Triton X-100，用玻璃棒或软毛笔将新 鲜霉菌孢子刮下，将孢子液倒入烧杯中；用 10 mL 水 冲洗培养皿中菌体表面，将冲洗液与孢 子液混 合 ， 倒入组织捣碎机捣碎 、 搅拌， 单 层纱布过滤 ；用水定容至 1000 mL，制成孢子 悬 浮液。 孢子悬浮液需在接种当天制备
12、，以保持菌种的新鲜。 8 环境试验箱暴露测试 8.1 环境条件及环境试验箱温度 环境试验箱测试温度（ 25 1），相对湿度 95%以上；环境试验箱置 于 （ 20 1） 环 境中。环境温度 比环境试验箱测试温度低 5左右。 8.2 实验步骤 8.2.1 试验箱开启 箱体内加入水，浸没加热棒和水泵，高度约 80 mm；将装有土壤的托盘放入箱体，距 水 面 25 mm以上 ；试件架上悬挂一个热电偶温度计，监测箱体内温度；运行加热棒和水泵，使 环境试验箱内温度达到测试要求温度。 XX/T XXXXX XXXX 5 其中土壤为园林盆栽土壤，含至少 25%的泥炭土 和 10%的蛭石， pH 5.5 7.
13、6。土壤在 120 条件下烘至绝干，将 水 用手持式喷雾器喷洒在土壤上，使其持水量保持为 100%。 8.2.2 环境试验箱中土壤接种 箱体内温度达到测试温度 24 h后对土壤进行接种。将新鲜霉菌孢子悬浮液用手持式喷雾 器均匀喷洒在土壤上，以不流水为宜。开启微循环 风扇。 8.2.3 试件表面接种及放置 土壤接种 2周后，将新鲜霉菌孢子悬浮液用喷雾器均匀喷洒在试件表面，以试件表面不 滴水为宜。试件接种完毕后，立即 随机 悬挂在试验箱里的试件架上。试件底 部距离土壤表层 75 mm， 相邻试 件间隔 至少 20 mm，最外围试 件 与箱体内壁 间隔 至少 50 mm。 8.2.4 霉菌活性检验
14、按 7.2制备 三个 霉菌培养基平板，不加盖子，随机放置在试件架不同位置。放置 1 h后， 把平板移出试验箱，盖 好盖子 ，放在 温度（ 28 1） ，相对湿度 75% 85%的 霉菌培养箱 中。 3 d后检查培养基平板上霉菌生长 情况。如果霉菌覆盖整个平板，并且菌落比较茂密，说明 霉菌活性较强；否则应按 8.2.2和 8.2.3给土壤和试件重新接种新鲜霉菌孢子。 9 测试结果评价 9.1 试件霉菌生长评价 试件测试周 期为 8周 。测试 期间分别在第 2周、第 4周、第 6周和第 8周定期检查试 件 表面 霉菌生长情况。 从试验箱取出试件后，通过肉眼判断每块试件表面上霉菌的生长范围（感染面积
15、）和强 度（疏密程度），并根据表 1划分试 件 霉菌生长等级 ， 记录霉菌生长特征。 表 1 试样表面霉菌生长分级表 分级值 霉菌生长描述 霉菌生长情况 0 未长 肉眼观察未见霉菌生长。 1 痕迹生长 试件表面霉菌 生长稀疏 ，感染面积 SS10%。 3 中度生长 试样表面霉菌 生长稀疏 ，感染面积 70S 30%。 4 严重生长 试样表面霉菌 生长稀疏 ，感染面积 100%S 70%。 5 极严重生长 试样表面霉菌感染面积达到 100%；或霉菌感染面积 未达到 100%，但霉菌 生 长茂密 。 XX/T XXXXX XXXX 6 9.2 测试结果的有效性 未处理对照试件在测试第 4 周 后，
16、应达到霉菌生长等级 3 以上。 10 试验 报告 见附录 B。 XX/T XXXXX XXXX 7 附 录 A （资料性附录） 环境试验箱 结构示意图及构成部件说明 A.1 环境试验箱 结构示意图 环境试验箱结构示意图见图 A.1。 说明： 1 箱盖 ； 2 试件架 ； 3 试件 ； 4 土壤托盘 ； 5 微型循环风扇 ； 6 箱体 ； 7 水 ； 8 循环 水 泵 ； 9 加热装置 ； 10 控温元件 。 图 A.1 环境试验箱结构示意图 A.2 环境试验箱 构成部件说明 XX/T XXXXX XXXX 8 A.2.1 箱盖 和箱体 二者材质均为 有机玻璃等惰性材料。 箱盖 为斜屋顶状， 倾
17、斜角度 约 35。 箱体 用于安装试验架、土壤托盘、加热及气流微循环装置等部件。箱体 尺寸为 700 mm(长 ) 500 mm(宽 ) 440 mm(高 )，或 780 mm(长 ) 575 mm(宽 ) 480 mm(高 )。 采用适当紧固、密封措施使箱盖与箱体直接紧密相连，形成密闭 的内部测试环境。 A.2.2 试件架 试件架直径为 50 mm，材质为有机玻璃 等惰性材料 ， 试验架之间间隔约 50 mm。 A.2.3 试件 将打孔试件用不锈钢丝钩悬挂在试件架的有机玻璃棒上。 A.2.4 土壤托盘 由不锈钢托架和塑料筐组成。不锈钢托架长度和宽度小于箱体 50 mm 以上，高度约为 100
18、 mm， 顶部为网状 ； 塑料筐放在托架上，长度尺寸比托架尺寸至少小 100 mm， 底部垫一 层 30 目塑料纱网 放置 土壤基质 ，厚度约 50 mm。 A.2.5 微型循环风扇 微型循环风扇为 IP55 或 IP68 防水等级；直流电压 5 V 12 V; 风量约 0.8 m3/s，风速 约 8000 rpm。 A.2.6 水 符合 GB/T 6682 中三级水要求。 A.2.7 加热装置 包括水族箱用加热棒和控温仪两部分。加热棒浸没在箱体水中，与位于箱体外的控温仪 相连。 加热装置可将箱体水温加热至 30 35 ，确保悬挂试件区温度可在 15 32之 间调节。 A.2.8 循环水泵 水
19、族箱用循环水泵，流量大于 8000 L/h，功率不低于 65 W。 XX/T XXXXX XXXX 9 附 录 B （资料性附录） 竹木材料及其制品表面防霉变效果报告表 竹木材料及其制品表面防霉变效果报告表见表 B.1。 表 B.1 竹木材料及其制品表面防霉变效果报告表 样品名称： 药剂名称： 测试起止日期： 测试环境温度： 环境试验箱温度： 环境试验箱相对湿度： 霉菌菌种： 测试人员： 其他说明： 试验 条件 2 周 4 周 6 周 8 周 试件表面霉菌生长分级值 试件表面霉菌生长分级值 试件表面霉菌生长分级值 试件表面霉菌生长分级值 1 2 3 4 5 6 平 均 值 1 2 3 4 5 6 平 均 值 1 2 3 4 5 6 平 均 值 1 2 3 4 5 6 平 均 值 对照 试件 受检 试样
