1、 ICS 65.020.01 CCS B16 15 内蒙古自治区地方标准 DB15/T 2560 2022 油菜抗菌 核病室内 鉴定技术 规程 Technical code of practice on indoor identification of canola against sclerotinia sclerotiorum 2022-05-25 发布 2022-06-25 实施 内蒙古自 治区市 场 监督管理 局 发 布 DB15/T 2560 2022 I 前 言 本文件 按照GB/T 1.1 2020 标 准化 工作 导则 第1 部分：标准 化文 件的 结构 和起草 规则 的 规
2、定起草。本文件 由内 蒙古 自治 区农 牧厅提 出。本文件 由内 蒙古 自治 区农 业标准 化技 术委 员会（SAM/TC 20）归 口。本文件 起草 单位：内 蒙古 自治区 农牧 业科 学院、特 泥河农 牧场 有限 公司。本文件 主要 起草 人：宋 培 玲、李子 钦、燕 孟娇、皇 甫海燕、杨永 青、贾 晓清、皇 甫九 茹、郭 晨、史志丹、赵丽 丽。DB15/T 2560 2022 1 油菜抗菌 核病室 内鉴定技 术规程 1 范围 本文件 适用 于内 蒙古 春油 菜生产 品种、新育 成品 种、区域试 验品 种、亲 本及 育 种中间 材料 的菌 核病抗性鉴 定和 抗性 评价。本文件 适用 于内
3、蒙古 春油 菜品种、品 系室 内抗 菌核 病鉴定。2 规范性 引用 文件 本文件 没有 规范 性引 用文 件。3 术语和 定义 下列术 语和 定义 适用 于本 文件。油菜菌 核病 Sclerotinia stem rot of oilseed rape 核盘菌(S.sclerotiorum)侵染 引起 的油 菜病 害，危 害油菜 的茎、叶、花、角 果、种子。油菜 各发育阶段 均可 感病，以 开花 结果期 发病 最重。叶片病 斑呈 灰褐 色或 黄褐 色，有 同心 轮纹、外 缘具 黄色晕 圈，干燥 时病 斑破 裂穿孔；皮 层纵 裂，维管束外 露如 麻，茎髓 部被 蚀空，茎内 形成 黑色 鼠粪 状菌
4、核；花 瓣感 染，形 成 水渍状 斑，易腐 烂脱 落；角果产生 不规 则白 色病 斑，内、外 部均 可形 成菌 核；种子多 成瘪 粒，少数 种子 表面长 有菌 丝。4 接种菌 株 从内蒙 古春 油菜 主栽 区发 病植株 上分 离纯 化并 鉴定 的核盘 菌菌 株（S.sclerotiorum），中等 致 病力。5 培养基 的配 制 PDA 培 养基：马 铃薯200 g、葡萄 糖20 g、琼脂 粉15 g 20 g，蒸馏 水定 容至1000 mL。6 病原菌 的培 养 将低温 保存 的核 盘菌 菌丝 体接种 在PDA 平 板上，22 恒温 培养 箱中 活化 培养。待 菌落 长到 培养 皿 直径的3
5、/4 时，用 直径 为4 mm 的打 孔器 在菌 落边 缘打 取 菌饼，接于 新的PDA 平 板中 央，22 恒 温培 养箱 中培养。待菌 落长 到培 养皿 直径的3/4 时，用相 同方 法的打 取菌 饼用 于接 种。DB15/T 2560 2022 2 7 鉴定品 种幼 苗培 养 将供试 材料 及对 照品 种（中油821）的种 子播 种在 装 有无菌 土的 营养 钵（13 cm 13 cm）中，每个品种播 种3 钵，每钵 播10 粒，置 于25、16 h/8 h（光照/黑暗）条 件下，待幼 苗生长 到3 4片 真叶 时，用于接 种。8 抗性鉴 定 取油菜 第3 片或 第4片 真叶，用 水冲
6、洗干 净，滤 纸吸 干 多余水 分。将 叶片 正面 朝 上均匀 的放 在铺 有滤纸的不 锈钢盘 内，每个叶 片接种2 个菌 饼，对 称的 放 置在中 脉的两 侧，有菌丝 的一面 紧贴叶 面，每个 品种接种10个 叶片。用 保鲜 膜封住 不锈 钢盘，于22 光照培 养箱 中观 察病 斑的 生长情 况。9 病情调 查及 抗性 水平 划分 接种5 d 后，十字 交叉 逐叶 测量病 斑直 径，以中 油821 为对照，参 照孙 晓敏 的方 法计算 供试 材料 抗 病指数。抗病 指数 计算 公式 如下。(I)=(YCK Y)/YCK。（1）式中：I 抗 病指 数；YCK 对照 品种 病斑 长度；Y 参试 材料 病斑 长度。根据抗 病指 数划 分油 菜对 菌核病 的抗 性水 平，其划 分标准 见表1。表1 油菜菌 核病 抗性 水平 划分 标准 抗性 类型 抗病 感病 高抗 HR 中抗 MR 低抗 LR 低感 LS 中感 MS 高感 HS 抗病 指数 RI RI0.6 0.3RI 0.6 0.0RI 0.3-0.3 RI0.0-0.6 RI-0.3 RI-0.6 DB15/T 2560 2022 3 参考文 献 1 孙 晓敏,张 晓娟,李英 等.陕 西汉 中地 区抗 菌核 病 油菜材 料检 测 J 江苏 农 业科学，2016，44(7):180 182
