1、ICS 67.050 B 50 H: 中华人民共和国水产行业标准SC/T 3028-2006 水产品中日恶睡酸残留量的测定液相色谱法Determination of oxolinic acid residues in aquatic products Liquid chromatography method 061018000005 2006-07 -10发布2006 -10-01实施中华人民共和国农业部发布前言本标准附录A为资料性附录。本标准由中华人民共和国农业部提出。本标准由全国水产标准化技术委员会水产品加工分技术委员会归口。本标准起草单位:国家水产品质量监督检验中心。本标准主要起草人:李
2、兆新、耿霞、冷凯良、王慧、刘晋湘、王联珠、李晓II。SC/T 3028-2006 1 范围水产品中日恶睡酸残留量的测定液相色谱法本标准规定了水产品中曙喳酸残留量的液相色谱测定方法。本标准适用于水产品可食部分中嗯哇酸残留量的测定。2 规范性引用文件SC/T 3028-2006 下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法3 原理水产品样品中曙
3、哇酸用乙酸乙醋提取，浓缩后，用流动相溶解残渣，正己烧脱去脂肪，利用曙唾酸的荧光性质，采用具有荧光检测器的液相色谱仪检测，外标法定量。4 试剂除另有规定外，所有试剂均为分析纯，试验用水符合GB/T6682一级水要求。4.1 乙酸乙醋:取无水硫酸纳25g于500mL乙酸乙醋中，摇匀，放置清晰即可。4.2 正己烧。4.3 乙睛:色谱纯。4.4 四氢峡喃:色谱纯。4.5 元水硫酸饷:650C灼烧4h，冷却后贮存于密封容器中。4.6 0.03 mollL氢氧化铀溶液:取1.2g氢氧化铀于烧杯中，加水1000mL溶解。4 . 7 0 . 02 mollL磷酸:取85%磷酸(优级纯)1.36mL，用水稀释至
4、1000mL。4.8 嗯喳酸标准品:纯度大于99%。4.9 r曝唾酸标准储备液:准确称取嚼哇酸标准品50.0mg，用0.03mollL氢氧化铀溶液溶解并稀释至浓度为1.0mg/mL，4C保存。有效使用期为一个月。4.10曙唾酸系列标准使用液:用乙腊将标准储备液稀释至1.0周/mL作为标准工作液。准确量取曙喳酸标准工作液，配成浓度分别为0.01g/mL、0.02g/mL、0.05阅/mL、0.1g/mL、0.2g/mL的标准使用液，此溶液临用时配制。5 仪器和设备5.1 匀浆机。5.2 旋转蒸发仪。5.3 分析天平，感量0.0001 g。5.4 天平，感量0.01g。1 SC/T 3028-20
5、06 5.5 离心机:4000r/min。5.6 涡旋混合器。5.7 液相色谱仪，具荧光检测器。5.8 离心管:50mL ,25 mL。5.9 鸡心瓶:50mL。5.10 刻度离心管:5mL。6 样晶制备6.1 样品预处理将鱼去鳞，去皮，沿背脊取肌肉;虾去头、去壳，取可食肌肉部分;其他水产样品取可食部分，切为不大于0.5cmxO.5 cmxO.5 cm的小块，充分匀浆，备用。6.2 样晶提取称取样品2g(精确到0.01g)于50mL离心管中，加人乙酸乙醋15mL，无水硫酸铀2g, 10 000 rl min 12 000 r Imin匀浆提取30s,4 000 r/min离心5min，上清液转
6、人50mL鸡心瓶中;另取-25mL离心管加人10mL乙酸乙醋，清洗匀浆机刀头，清洗液移人上述50mL离心管中，用玻璃棒捣碎离心管中的沉淀，涡旋混匀1min,4 000 r/min离心5min，上清液合并至50mL鸡心瓶中。6.3 样晶净化及浓缩提取液40C50C下真空浓缩至近干，立即精确加人2.0mL流动相溶解，再加人1mL正己皖，涡旋混匀1min，转人5mL离心管中，4000r/min离心10min，弃去正己烧层(如脂肪较多，可用正己烧重复提取一次)。提取液经0.45m滤膜过滤后供液相色谱分析。7 测定7.1 色谱条件色谱柱:C18反相柱，250mmx4.6 mm，5m，或其他性能相当的色谱
7、柱。流动相:0.02mol/L磷酸:乙睛:四氢映喃=65:20:15，流速为1.0mL/min。检测器波长:激发波长325nm，发射波长369nm。7.2 色谱分析7.2.1 工作曲线测定分别取标准使用溶液20L进样，以峰面积为纵坐标，以标准溶液中曙唾酸含量为横坐标，绘制工作曲线。7.2.2 样晶测定样品提取液20L进样，记录峰面积，从工作曲线查得样品提取液中嗯喳酸的含量。8 空白试验除不加试样外，均按上述测定步骤进行。9 结果9.1 计算按式(1)计算样品中嚼哇酸残留量。计算结果需扣除空白值Cxv x=一一一. (1) m 式中:2 x-一试样中的曙喳酸的含量，单位为毫克每千克(吨Ikg);
8、C一一样品提取液中曙唾酸的含量，单位为微克每毫升(g/rnL); V一一最终定容体积，单位为毫升(rnL);m一一样品质量，单位为克(g)。9.2 方法回收率本方法的回收率二三75%。9.3 方法检出限本方法检出限为0.01mglkgo 9.4 精密度在重复性条件下获得的两次独立测定结果的差值不得超过算术平均值的10%。SC/T 3028-2006 3 附录A(资料性附录)晦睡酸标准晶的液相色谱固SC/T 3028-2006 寸mN，咀Vorm. 2.8 2.6 2 2.4 2.2 1.8 mm 7 6 5 。H愚睡酸标准谱圄固A.l4 CON-NOm H们回中华人民共和国水产行业标准水产晶中瞟睡酸残留量的测定液相色谱法SC/T 3028-2006 中国农业出版社出版(北京市朝阳区麦子店街18号楼)美长* (邮政编码:100026 网址:) 中国农业出版社印刷厂印刷新华书店北京发行所发行各地新华书店经销头* 当&印张0.75字数7千字2006年9月北京第1次印刷印数:1-500册定价:10.00元开本880mmx 1230mm 1116 2006年9月第1版书号:16109.766 版权专杳僵权必究举报电话:(010) 65005894
