1、 ICS 65.020 CCS B 16 13 河北省地方标准 DB13/T 5371.92026 粮食作物种传病害控制技术规程 第 9 部分：水稻恶苗病 2026-06-30 发布2026-07-30 实施河北省市场监督管理局发 布 DB13/T 5371.92026 I 前言 本文件按照GB/T 1.12020标准化工作导则 第1部分：标准化文件的结构和起草规则的规定起草。DB13/T 5371粮食作物种传病害控制技术规程分为9个部分：第1部分：谷子白发病；第2部分：谷子线虫病；第3部分：谷子粒黑穗病；第4部分：玉米丝黑穗病；第5部分：小麦散黑穗病；第6部分：高粱黑穗病；第7部分：糜子黑穗
2、病；第8部分：水稻干尖线虫病；第9部分：水稻恶苗病。本文件为DB13/T 5371的第9部分。本文件由河北省农业农村厅提出。本文件起草单位：河北省农林科学院滨海农业研究所、四川省农业科学院植物保护研究所、河北省农林科学院谷子研究所、河北省植保植检总站。本文件主要起草人：王海宁、杜琪、姬红丽、董志平、薛玉、刘佳、耿雷跃、邹拓、李娟、张薇、王硕、何广生、刘秋华、梁宝辉、马合军、王烨、侯增舒。DB13/T 5371.92026 1 粮食作物种传病害控制技术规程 第 9 部分：水稻恶苗病 1 范围 本文件规定了水稻恶苗病的术语和定义、控制原则和控制技术。本文件适用于水稻恶苗病的控制。2 规范性引用文件
3、 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T 15671 农作物薄膜包衣种子技术条件 GB/T 3543.2 农作物种子检验规程 扦样 GB 4404.1 粮食作物种子 第1部分：禾谷类 NY/T 1276 农药安全使用规范 总则 3 术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。水稻恶苗病 主要由藤仓赤霉菌Gibberella fujikuroi(Saw.)Wollenw.引起的种传系统性侵染病害，水稻恶苗病田间症状和发生规律见附录A。无病种子 不携
4、带水稻恶苗病活体病原菌的种子。4 控制原则 以生产和使用无病种子为主，药剂处理为辅的综合防控策略。5 种子带菌分子检测 取待测种子样本50 g，取样方法按GB/T 3543.2进行。利用藤仓赤霉菌LAMP特异性引物对收集病原菌样本的DNA进行检测。病原菌收集及LAMP特异性引物序列、反应体系及程序见附录B。6 控制技术 无病种子生产 6.1.1 选用无病原种 常规水稻品种应选用不携带病菌的原种进行繁种，水稻杂交种应选用不携带病菌的不育系和恢复系进行制种。种子质量应符合GB 4404.1的规定。种子带菌检测同5。6.1.2 种子处理 原种若携带病菌，采用以下方法进行处理。DB13/T 5371.
5、92026 2 6.1.2.1 温汤浸种 播种前，将稻种在常温水中预浸种 24 h，再移入 45 47 的水中浸种 5 min，再转入52 56 的水中浸种 10 min，在常温水中冷却后捞出控水，直接催芽播种。直接将水稻种子投入 57 59 水中浸种 10 min15 min，在常温水中冷却后捞出备用，或在阴凉处晾干。6.1.2.2 药剂处理 每 10 kg 干稻种选用 200 g/L 三氟吡啶胺种子处理悬浮剂 2.5 mL3.5 mL，或 11%精甲咯嘧菌种子处理悬浮剂 40 mL45 mL，按药液与种子比 1:7080 进行包衣，包衣种子质量应符合 GB/T 15671 的规定。每 10
6、 kg 干稻种选用 25%氰烯菌酯悬浮剂 5 ml7 ml，或 20%氰烯菌酯杀螟丹可湿性粉剂12 g15 g，或 17%杀螟乙蒜素可湿性粉剂 25 g35 g 进行浸种，加水 10 kg12 kg，浸种 48 h60 h，温度较低时适当延长浸种时间，捞出控水后催芽播种。药剂使用应符合 NY/T 1276 规定。6.1.3 清洁生产 采用无恶苗病菌的营养土或基质进行育秧，无纺布替代传统稻草覆盖。本田选用无恶苗病田块进行繁种。在秧田期和本田期进行田间调查，若早期发现少量病株及时拔除，带出稻田集中深埋（30 cm）或烧毁；后期有病株的田块不能留作无病原种生产。水稻恶苗病田间症状见附录A中A.1。6
7、1.4 种子带菌分子检测 检测方法同5。田间控制技术 选用不携带病原菌的种子直播或育秧，种子质量应符合GB 4404.1的规定。种子处理同6.1.2，生产过程同清洁生产6.1.3。DB13/T 5371.92026 3 A A附录A （资料性）水稻恶苗病症状及发病规律 A.1 症状 秧田发病时，秧苗24叶期开始显症，病苗表现为细弱徒长，比健苗高1/3左右，叶片和叶鞘狭长，呈淡黄绿色，根系发育不良，根毛少，严重时枯死，枯死病苗近地面部位产生白色或粉红色粉状霉层。本田期发病时，病株徒长，茎或节间显著伸长，分蘖少或不分蘖，节部呈褐色，病株近地茎节部位可长出倒生不定根，节部常弯曲露出叶鞘，叶鞘内茎上
8、有褐色条斑，病茎内可见白色菌丝，谷粒受害可导致结实下降，谷壳呈褐色，在颖壳接缝处产生淡红色粉状霉层。病株在孕穗期茎秆逐渐腐烂，叶片自上而下干枯，最后枯死，病株一般不能抽穗或不能完全抽穗或剑叶早出，提前抽穗，穗小而不结实，后期在垂死或已死病株的叶鞘和茎秆上可产生淡红色或白色粉状霉层。A.2 发病规律 种子带菌是水稻恶苗病的主要初侵染源，病原菌的分生孢子和菌丝附着在种子表面或潜伏于种子内越冬。病稻草上的病菌或分生孢子在干燥场所可存活23年，在潮湿的土面或翻入土内的病菌一般在短期内即可死亡。播种带菌种子或用病稻草作为覆盖物，当稻种萌发后，病原菌从芽鞘、根部或伤口侵入幼苗引起发病。患病秧苗移栽本田后1
9、0 d30 d开始显症，本田可发生多次再侵染，在植株体内进行半系统扩展，分泌赤霉素刺激细胞伸长，引起茎叶徒长，严重时引起苗枯，但不扩展到花器。在病株或枯死株表面产生分生孢子，借风雨传播引起再侵染。病原菌可在水稻抽穗后3周内侵染稻谷，侵入颖片组织或种皮组织内。脱粒时，病原菌分生孢子和菌丝也可粘附于稻谷表面。带菌种子成为下一年或下一季的初侵染源。DB13/T 5371.92026 4 B B附录B （资料性）病原菌检测方法 B.1 病原菌收集 将待测样本脱壳处理，将种皮和糙米放入250 mL的三角瓶中，加入200 mL ddH2O，滴加20%吐温35滴，锡箔纸封口，放入超声波清洗器内，以40 kH
10、z的频率振荡10 min。将洗涤液用75 m孔径的钢筛过滤至灭菌空瓶中，并用少量的ddH2O冲洗稻种。滤液经14000 g/min离心5 min，弃上清液，保留沉淀。将沉淀物置于37 的烘箱中烘干后进行DNA提取。B.2 LAMP 特异性检测引物、反应体系及程序 LAMP 检 测 特 异 性 引 物：外 引 物 对 F3(5-AGACACCGTTTTGTTTTGC-3)和 B3(5-CTTTTCTCCAACTTCACAGC-3)；内引物对FIP(5-TCAGCCTACCCTAGACCCTCGCCCTTACCTTTGCTTGA-3)和BIP(5-AGCTAGACTACTCTAAGGGTAGGTA
11、CAACTTCCACCAATTGCA-3)；环引物LF(5-ATCCGGCCAAGACCGTC-3)。反应体系：2.5 L 10Thermopol缓冲液0.1%Trion-X，20 mmolL-1 Tris-HCl，10 mmolL-1 KCl，10 mmolL-1(NH4)2SO4，pH 8.8、1 L F3/B3(10 mol/L)、4 L FIP/BIP(10 mol/L)、1 L LF(10 mol/L)、4 L dNTPs(10 mmol/L)、2 L MgSO4(100 mmol/L)、2 L Bst 2.0 Warmstart DNA聚合酶(8 U/L)、1 L 模板DNA、4 L 甜菜碱(5 mol/L)和6 L ddH2O。反应程序：62 温育70 min。LAMP扩增产物采用琼脂糖凝胶电泳进行检测。检测方法：使用2%琼脂糖凝胶在5 V/cm10 V/cm电压下电泳25 min后凝胶成像仪中检测LAMP扩增产物。扩增产物通过电泳法进行检测，若出现阶梯状条带，则证明有藤仓赤霉菌；未出现阶梯状条带，则证明无藤仓赤霉菌。
