1、 ICS 65.020 CCS B 16 13 河北省地方标准 DB 13/T 5371.82025 粮食作物种传病害控制技术规程 第 8 部分：水稻干尖线虫病 2025-12-16 发布2026-01-16 实施河北省市场监督管理局发 布 DB 13/T 5371.82025 I 前言 本文件按照GB/T 1.12020标准化工作导则 第1部分：标准化文件的结构和起草规则的规定起草。DB13/T 5371粮食作物种传病害控制技术规程分为8个部分：第1部分：谷子白发病；第2部分：谷子线虫病；第3部分：谷子粒黑穗病；第4部分：玉米丝黑穗病；第5部分：小麦散黑穗病；第6部分：高粱黑穗病；第7部分：
2、糜子黑穗病；第8部分：水稻干尖线虫病。本文件为DB13/T 5371的第8部分。本文件由河北省农业农村厅提出。本文件起草单位：河北省农林科学院滨海农业研究所、四川省农业科学院植物保护研究所、河北省农林科学院谷子研究所、河北省植保植检总站、吉林省农业科学院植物保护研究所、吉林省通化市农业科学研究院。本文件主要起草人：杜琪、姬红丽、董志平、刘佳、薛玉、朱峰、李晓光、耿雷跃、王海宁、邹拓、何广生、杨扬、吴向来、王烨、侯增舒。DB 13/T 5371.82025 1 粮食作物种传病害控制技术规程 第 8 部分：水稻干尖线虫病 1 范围 本文件规定了水稻干尖线虫病的术语和定义、控制原则、线虫检测和控制技
3、术。本文件适用于水稻干尖线虫病的控制。2 规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可缺少的条款。其中，注明日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件，不注明日期的引用文件，其最新版（包括所有的修改版）适用于本文件。GB/T 3543.2 农作物种子检验规程 扦样 GB 4404.1 粮食作物种子 第1部分：禾谷类 NY/T 1276 农药安全使用规范 总则 3 术语与定义 下列术语和定义适用于本文件。水稻干尖线虫病 是一种由贝西滑刃线虫（Aphelenchoides bessyi Christie）引发的水稻种传病害。水稻干尖线虫病田间症状和发生规律见附录A。无
4、病种子 是指不携带活体水稻干尖线虫的种子。4 控制原则 以生产和使用无病种子为主，温汤浸种和药剂处理为辅的综合防控策略。5 线虫检测 形态学鉴定 取待测种子样本10 g，取样方法按GB/T 3543.2进行，放在研钵内稍加研磨使颖壳分离，用单层纱布包裹，放入贝曼漏斗中，漏斗下接一段橡皮管，橡皮管由弹簧夹夹住。注入清水漫过纱布，室温下静止12 h，打开弹簧夹，收集底部5 mL水样，线虫数量少时可离心富集，显微镜下对水样进行镜检，镜检发现线虫，视为种子带线虫。水稻干尖线虫显微形态特征见附录B中B.1。分子检测 取待测种子样本1 g进行DNA提取，取样方法按GB/T 3543.2进行，利用水稻干尖线
5、虫LAMP特异性引物对待测样品DNA进行扩增，扩增产物通过电泳法进行检测。若出现阶梯状条带，则证明有水稻干尖线虫；未出现阶梯状条带，则证明无水稻干尖线虫。水稻干尖线虫LAMP特异性引物序列、反应体系及程序见附录B中B.2。DB 13/T 5371.82025 2 6 控制技术 无病种子生产 6.1.1 选用无病原种 常规水稻品种选用不携带病原的原种进行繁种，水稻杂交种选用不携带病原的不育系和恢复系进行制种。种子质量应符合GB 4404.1的规定。种子带线虫检测同5。6.1.2 种子处理 原种携带病原，采用以下方法进行处理。6.1.2.1 温汤浸种 可采用下列方法进行：播种前，将稻种在常温水中预
6、浸种 24 h，再移入 4547的水中浸种 5 min，再转入5256的水中浸种 10 min，最后在常温水中冷却后捞出控水，直接催芽播种。直接将水稻种子投入 5759水中浸种 10 min15 min，在常温水中冷却后捞出备用，或在阴凉处晾干。6.1.2.2 药剂处理 每10 kg干稻种可选用6%杀螟丹8 mL10 mL、17%杀螟乙蒜素25 g35 g或12%氟啶戊杀螟10 g12 g等药剂，加水10 kg12 kg，浸种72 h96 h，捞出控水后催芽播种。药剂使用应符合NY/T 1276规定。6.1.3 田间发病调查 6.1.3.1 田间目测 在水稻孕穗至灌浆期进行田间普查，目测田间是
7、否有剑叶尖端皱缩、扭曲，或枯死，呈白色或灰色的“干尖”状或“小穗头”等症状病株，有病株的田块不能留作原种。水稻干尖线虫病田间症状见附录A中A.1。6.1.3.2 线虫检测 检测方法同5。田间控制技术 6.2.1 选用无病种子 选用不携带病原的种子直播或催芽播种。种子质量应符合GB 4404.1的规定。6.2.2 种子处理 同6.1.2。DB 13/T 5371.82025 3 A A 附录A （资料性）水稻干尖线虫病症状及发病规律 A.1 症状 少数感病品种在45叶期时开始出现症状，大部分品种在病株拔节后期或孕穗后症状开始明显，孕穗期前上部叶片尖端2 cm4 cm处逐渐皱缩、扭曲，枯死，歪拢，
8、呈白色或灰色的“干尖”状，病健部交界明显；孕穗期剑叶或上部23叶的尖端1 cm8 cm处会出现淡褐色、半透明状病斑，有露水时干尖比较透明、可伸展开，露水干后叶尖扭曲、皱缩、逐渐枯死、变成黄褐色或灰白色，病健部交界明显、有不规则弯曲的深褐色界纹；通常感病的稻株株高变矮，剑叶缩短，长势差，抽穗困难或抽出的穗型变小，每穗实粒数减少，秕粒数增加，千粒重下降，护颖和籽粒扭曲，米粒有裂纹，田间表现为顶端籽粒数减少，穗中部的籽粒部分为秕粒，成熟期病穗直立不下垂。A.2 发病规律 水稻干尖线虫在水中和土壤中不能长期生存，带病原的种子是最主要的初侵染源，远距离传播主要依靠带病原的种苗和稻壳等。种子遇水后，线虫开
9、始复苏并游离至水和土壤中，大部分死亡，少数线虫遇幼芽后从芽鞘、叶鞘缝等部位钻入组织内，以口针刺入细胞吸食细胞液，在秧田和本田中随灌溉水传播扩散。分蘖初期，水稻干尖线虫在生长点附近的未张开的幼叶上皮外寄生。在湿度较大等有利条件下，水稻干尖线虫存在于水稻营养生长期地上组织的各个器官中，包括茎、叶鞘和不同的叶片。在幼穗形成时，线虫侵入穗原基，孕穗期集中在幼穗颖壳内外，花期后进入小花并迅速繁殖，随着谷粒成熟，线虫逐渐失水进入休眠状态，造成谷粒带虫。DB 13/T 5371.82025 4 B B 附录B （资料性）水稻干尖线虫形态学特征及 LAMP 特异性检测引物、反应体系及程序 B.1 形态学特征
10、雌虫：虫体细长，热力杀死后稍直或弯曲；环纹纤细，不清晰，中部环纹宽约0.9 m；口针较细弱，长10 m13 m，基部略膨大；唇区圆，稍缢缩；侧区约为体宽的四分之一，侧线4条；中食道球卵圆形，瓣门清晰；排泄孔常接近神经环的前缘；阴门横裂，阴门唇稍突起；受精囊长卵圆形，内常聚集有精子；卵巢前伸，相对较短，不延伸至食道腺处，卵母细胞24列；后阴子宫囊窄，内无精子，长为肛门处体宽的2.53.5倍，但短于肛阴距的三分之一。尾圆锥形，长为肛门处体宽的3.55倍，末端有一个尾尖突，上有34个小尖突。雄虫：热力杀死后虫体后部向腹面弯成近180；前体部特征与雌虫相似；尾圆簇形，末端有一尾尖突，上有24个小尖突。
11、交合刺呈玫瑰刺状，但无顶部，背弓长18 m21 m。B.2 水稻干尖线虫 LAMP 特异性检测引物、反应体系及程序 LAMP 检 测 特 异 性 引 物：外 引 物 对 F3(5-CGGTATTTTGCGCGTTTTCG-3)和 B3(5-TCGCT ACGGTCCTCGAATT-3)；内引物对FIP(5-TTCAGTCGTAAGACCCGCCTTGGTCGGTGATGCGCAGGAT-3)和BIP(5-CAAGGTTGCGGCCGAGTTTTATTGCGCAGCGATACGAATGC-3)；环引物对LF(5-TGAAACTTGCCGAATTCACGA-3)和LB(5-GGTTTTGTCGGC
12、TGAAACAATG-3)。反应体系：2.5 L 10Thermopol 缓冲液、1 L F3/B3、1 L FIP/BIP、1 L LB/LF、6 L dNTPs(10 mmol/L)、1.5 L MgSO4(100 mmol/L)、1 L Bst 2.0 Warmstart DNA 聚合酶(8 U/L)、1 L 模板DNA、4 L甜菜碱和6 L ddH2O。引物为25倍混合液包括40 mol/L FIP、40 mol/L BIP、5 mol/L F3、5 mol/L B3、10 mol/L LB和10 mol/L LF。反应程序：65温育60 min、80保温10 min。LAMP扩增产物采用琼脂糖凝胶电泳进行检测。检测方法：使用1%琼脂糖凝胶在5 V/cm10 V/cm电压下电泳25 min后凝胶成像仪中检测LAMP扩增产物。
