1、 ICS 65.020.01 CCS B 01 15 内蒙古自治区地方标准 DB15/T 42982026 大麦抗叶斑病（Bipolaris sorokiniana）田间鉴定技术规程 Technical code of practice for identification resistant level to barley leaf spot caused by Bipolaris sorokiniana in field 2026-02-10 发布2026-03-10 实施内蒙古自治区市场监督管理局发 布 DB15/T 42982026 I 前言 本文件按照GB/T 1.12020标准化工
2、作导则 第1部分：标准化文件的结构和起草规则的规定起草。本文件由内蒙古自治区农牧厅提出。本文件由内蒙古自治区农业标准化技术委员会（SAM/TC 20）归口。本文件起草单位：内蒙古民族大学、内蒙古自治区农牧业科学院、通辽市农业技术推广中心、通辽市高林屯种畜繁育中心、通辽市农牧科学研究所、巴彦淖尔市农牧科学研究所、呼伦贝尔市海拉尔区农牧技术推广中心、乌兰察布市农林科学研究所。本文件主要起草人：李建波、徐寿军、赵艳琴、刘志萍、巴图、马宇、王磊、李国兴、王文迪、王海泽、徐广祥、吕二锁、渠佳慧、李涛、温瑞强、葛明然、邢丽伟、郑成忠。DB15/T 42982026 1 大麦抗叶斑病（Bipolaris s
3、orokiniana）田间鉴定技术规范 1 范围 本文件规定了进行大麦叶斑病抗性鉴定及评价技术的接种体制备、田间接种鉴定、病情调查、抗病性评价和田间档案。本文件适用于大麦叶斑病（Bipolaris sorokiniana）的田间抗性鉴定和评价。2 规范性引用文件 本文件没有规范性引用文件。3 术语和定义 本文件没有需要界定的术语和定义。4 接种体制备 培养基的制备 4.1.1 PDA 培养基 马铃薯 200 g，葡萄糖 20 g，琼脂 18 g20 g，蒸馏水 1000 mL。分装在三角瓶中，121 高压灭菌 20 min30 min。4.1.2 高粱粒培养基 将高粱粒用蒸馏水浸泡 20 mi
4、n，煮沸后持续 10 min，取出后用蒸馏水冲 2 次，平铺在吸水纸上待微润、互不粘连后分装至三角瓶容量的 1/22/3，121 高压灭菌 20 min30 min。接种液制备 4.2.1 病原菌的活化 将在-20 保存的 B.sorokiniana 接种在 PDA 培养基上，置于 25 条件下培养 5 d7 d，从菌落边缘打取直径为 6 mm 的菌丝块，置于 PDA 培养基上进行活化 23 次用于病原菌扩繁。4.2.2 病原菌扩繁 待 PDA 上的病原菌菌落生长至 2/3 皿时，用打孔器沿菌落边缘打取菌丝块置于灭菌的高粱粒培养基中进行扩繁。置于 25 条件下培养 10 d15 d，每隔 3
5、d 轻摇三角瓶 1 次。4.2.3 孢子悬浮液制备 DB15/T 42982026 2 将接种病原菌的高粱粒培养基倒入盆中，加入适量的蒸馏水进行清洗，双层纱布过滤后用血球计数板测定滤液中孢子数量，调整孢子浓度至 5.0104个/mL 左右，加入 0.03%Tween-20，备用。5 田间接种鉴定 鉴定材料准备 鉴定材料采取随机区组排列，人工点播，每个品种播种 3 行，行长 1 m，行距 0.4 m，株距 5 cm；每 5 个品种设置 1 个感病对照，3 次重复。接种 5.2.1 接种时期 大麦孕穗到抽穗期对叶片进行人工喷雾接种。5.2.2 接种方法 选择无风、凉爽的傍晚进行接种，保证叶片正反面
6、均匀接种。1 d 后再次重复上述操作。5.2.3 田间管理 接种前后适时补灌，保持土壤潮湿。6 病情调查 调查时间 在大麦抽穗期，待感病对照品种病斑占叶面积达到 50%以上时开始调查，每隔 7 d 调查 1 次，共调查 2 次，记载病情严重程度。调查方法 每个鉴定品种和对照品种随机抽样 30 株，根据病害症状描述（见表 1），调查每株的病情级别，并计算病情指数。表1 大麦叶斑病抗性分级及病状描述1,2 严重度分级 病状描述 0 叶部无病斑 1 病斑占叶面积10%2 10%病斑占叶面积30%3 30%病斑占叶面积50%4 50%病斑占叶面积 7 抗病性评价 DB15/T 42982026 3 根
7、据调查的病级，计算病情指数，病情指数计算公式如公式（1）：DI=（）100 (1)式中：DI病情指数；NA 各病级发病株数，单位为株；XA 相对病级数值；N 调查总株数，单位为株，M 病害分级中的最高级别的代表数值。鉴定材料的抗性评价方法按照表 2 执行。表2 大麦叶斑病抗性评价标准 病情指数（DI）抗性 DI=0 免疫 DI10.0 高抗 Highly resistant(HR)10.0DI20.0 中抗 Moderately resistant(MR)20.0DI40.0 中感 Moderately susceptible(MS)DI40.0 高感 Highly susceptible(H
8、S)8 田间档案 应建立田间档案，内容包括：鉴定材料名称、接种时间、调查时间、接种总株数、各病情级别发病株数、病情指数和抗病性评价。DB15/T 42982026 4 参考文献 1 Fetch TG，Steffenson BJ.Rating Scales for Assessing Infection Responses of Barley Infected with Cochliobolus sativus.Plant Disease，1999，83：213-217.2 郭焕强，王文峰，姚全杰，等.大麦主栽品种亲缘系数和对叶斑病的抗性分析.植物遗传资源学报，2016，17(4)：586-598.
