1、GB ICS 65.02队30B 43 中华人民共和国国家标准GB 4143-2008 代替GB/4143-1984液精冻冷拉-Frozen bovine semen 2009-01-01实施2008-06-27发布发布中华人民共和国国家民量监督撞撞撞捷总局中茵茵家摇撞住管理委员会GB 4143-2008 羁次前言.，.a川.平1 范周. 2 规范性引用文件3 7拉吉普辑:定义.键是主要求. 4.1 科公牛.4. 2 革开辈革将被.危.2 4.3 冻丰窗外观.u . .,. 2 4.4 剂缆、剂最.刷.-.2 4.5 您知l数派将解冻后. 2 4.5.1 梳子然为.，.,. 2 4.5.2 治
2、泼运动猿子数.，.，.a.，.a.毡川24.5.3 赖子将影率吨.，.，.，.，.，.、.24.五4锁商数H盹.，.，.川.，.25 抽样.川.，.川省们.盔.2 5.1 拟将车走验方案，川舍.响.川.，.25. 1. 1 姓王产方抽样检验.们. 2 5. 1. 2 没缝监督摇样梭基金.篇篇.刷.2 5. 1. 3 幸运然级待裁狼群梭验磊.5.2 费是样方法.，.，,.=.,. 2 6 试验方在去.2 6. I 外观.刷.确也.-.川够.2 6.2 别缝.是.协.2 队3解冻后每剂量精液.刷.刷刷.刷.刷刷.刷.2 6.4 救援分类噜.嗖.川川26.4.1 1若没检验.川.2 6.也2级式检验
3、.确.a川.画，.2 6. 5梭骏琐吕.嘀.a.3 6.5.1常规检验川川.，.36.5.2 型式检验.，.们.骗.3 7 判定规则.,. 3 汇1常规检验.罩辜.a. 3 7.2 型文检验7.3 古自样检致对群体效绿水平稳评定.-.川.川事.37.止1生产方抽称革命骏.、.血.3 7.3.2 质量监督梢牛羊校骏刷.川h. 3 8 标志、包装.刷刷.骗.h川副.38. 1 标志. 3 GB 4143-2008 8. 1. 1 品种.，.刷. 由，. 3 8. 1. 2 内容.刷.川.句.38.2 包装.町川喝.，.3 附录A(规范性附录群体公牛冻辛苦然雪慧i攻势抽样检验程序，.川，.，.自.8
4、川.4 A.l导主5.川.，-.。.4 A.Z 质缀且在督被释检验极序-.川，.川. . 4 A. 2. 1 锁定监督总体.由.是.0.4A. 2. 2 确定吕京辈辈产品的质髦辛辛位.A. 2.3 不合格品的分要是A. 2. 4 谈经监督质量主水平.,., . . . ,. . . 是A. 2. 5 规定监督放军金等级.，.，.，.自. . . 4 A. 2. 6 狡索监Y辫抽样方案.，.，.，.确.，.危眉.，.，.0.4 A.2.7 抽取辛辛本-.事，. ,.,. .,. 4 A. 2. 8 检骏样本.叫.，户.川.,. .川B.4 人2.9 判断盗督J总体该群体公牛(吕京黯)怒份量I通过
5、.0.4 人2.10应用实教j. . . . 4 人2.11盗督拟样方黎的通过被冻与检验功效.，对于主笔字Ac会然判定数，如一一不合格判定数的表述，琛说用GB江、282衣1-23+十数拖车季俭检程序第1部分，接接i投票窒段(AQL)梭索始逐效检验主主样计划中治表达，Ac-一一接;次数，如一怒放数，d桥本中的不合格委主(见5.1.1和7.:l. 1)。本幸运模的将采A、附录B和附录C均为级范住院录步2客必再主离中华人民共和非j农业部提出。本事至被窃全罢3畜级主&fi王液化技术3委员会归口。才军事茶楼室主主事单饺2农业部牛冷涤蒋捷菜，咬最主主弩检主主翠IJ试中心离家、全窗畜牧兽医总站、习生l&部牛
6、冷冻粮液质量建级3室辛辛意基金;黄H式牛毛、付主京人本;炼狱二甚至要是草委事人2兰最喜事怨、徐栓芳、卖主、汉幸费、张草草震、刘长春、黄文佳、言副主主毒草。木然挥主黎安毛农业奇在牛?辛辛革粮液互竞蒙主主督检验然谈中心南京负责祭释aV GB唾143一一20号S牛冷冻糯攘1 范围本标滋生班主运了牛冷冻精液的命名、技术要求、抽样、试$金方法、判定规则和标志:&伪装。2 貌?在告主苍i篇文传是否可俊用这些文GBI丁立828.1 i十:lQJ(lSO 2851 : 3. 1 3.2 辈辈子活力3. 4 细菌数bacteria COUllt 4等刘去重精液经土寄养18:!l嘎然刻的细3.5 冷冻辛毒滚fro
7、耻挫m棚室主辛辛辣方法处支票的幸的在辈辈僚主主冷冻后iE卖主粱叶江(-196r:)长巍然将4 要求4.1 种公牛也各方研究的逐批检验主虽然豆豆具有科用价低，外貌评价为特等或-怨，你质健康，无选传统，不允许有巳发布的动物防疫法中所号哥哥撞去告二类疫然市部Jt:去衍一种病。1 G嚣4143-2白084.2 新辈辈辈辈液色泽辛lt王色或淡费苦色。精子苦苦力二三65%，辈辈子密度二莎白X10个mI.，精子网影察15%，4.3 l在精外观楚楚管5E.裂痕，两端主营口产辛苦。4.4 llJ室里、刘盖章细管栋楼:若是主主二州.18mL;牛妻器;吉0.40mI., 4.5 每知Ui量冻精解;袁军毒4.5. 1
8、 辈辈子活力3注35: (邵3沁篝3日，水牛二均可%(p:;?.o.30)0 4.5.2 前激i嚣远古草毒子数800个，水牛二只000万个。4.5.3 辛窗子黯形葱18% .l立学运二2?/。4.5.4 级菌数主主犯台个e5 抽样5. 1 被样检验方握握5. 1. 1 生产为抽样检验生产方幸在主浪方为IiJl:段保证辍学:!e关.按照GBT152391994中约第5章，采燃LQ二8.。、模式A始将方葬在校索一次辈革格方案，确忽始幸草公牛丰学本量。5. 1. 2 轰轰监督抽样检验E贯宣量监督秘辛学校验按照心惊飞、154821995中的第5章.1在群体公牛为一路督总体，采用D，=l臼哆法F延续二检
9、骏等级主专抱中羊t!ii，确定?远被公牛的祥等墅，搞群中盘革命罪程序;在均主是A。5. 1.3 主草草草和仲裁抽样被验复检均数据1点抽样方案确定，中必需抽较安安然5.1.2观主运的方案牵引7.3. 2J芋发企5. 2 由样方法盘是牵羊方法见日.1. 2. 3秘日.1. 3 6 试验方法6. 1 外骂!i!F在鼠翠j法.其虫在乡在1泣符合4.3的烧定。6.2 剂量检验按祭巴.2章的方法.其结果成符合4.4的主运定。6.3 解冻怨剂量辈辈望重费解辛E冻京7方7法及精气子Fi滔茜力、言兹宫主泼建i必运汲劝I精子辈数立、辈掺运气子萨盖琦奇形率、锻院宫然黎辈数立的幸梭盘导骏金饺照第B.3量毅袁第B.6景
10、滚袁去汉翠定古的甘方挂法1，主菜E结果五应言E 6.4 检验分类6.4.1 常规梭验对草草糕的单项目扮验主主型式校驳的部分.3二要是在生业产主运人要靠前粉1销出始时价检验。6.4.2 盟:;龙检验对吕革辈吉全部领院检验.平线产品质蜜这否全面符合标准，也;放军E!产方辈革事学校验、仲裁和质量监督;由;隙中生验对选主运琐的检3袭。2 6.5 梭驳驳鼠6.5. 1 常规检验本标准月，4.3和4.5.1规定G6.5.2 型式检验立住你狱中4.34. 5规定。7 判定规则7. 1 常规检验样品中任何一项目检验未达到本标准中要求的锁线，贝u判;均不合格e7.2 裂主吃检验样li6rl:任何项目检验未达到卒
11、炼身是Z俨然求的锁定，则判为不合格。? 3 主吉祥检验对群体质量水平的评定7.3. 1 生产方捻样检验GB 4143-2008 寻11哥GB/T2828. 1-2住在辛雪在31墅1二IAc辈辈校数，如一一jl次室主.d一一不合格品数e生产方撞车季楼主主按照GB/T152391轮是敬礼仪的主革主运，通过对样本检验，若样本小不合格热爱生dAc，则如1)百接收.样本中不会荡然数汉e，嫁到不到接收。7.3.2 质量监督撼样检验按照GB/T15482-1995东的规定，夜丰学家d叹不递过判定数然要号为可通过以二忡，则列为不i1J通过。群体公牛E草草吉淡主量监督摇1然被驳军最序带去袭人。8 标志、包装8.
12、 1 标志8. 1. 1 晶种种公牛的品种以代号表示，必体型建Jl附淡C的规定8. 1. 2 内容结管冻精应在管费支(llX;包连在生接tlpflj1J以下内容，并且印制标识要清楚za) 生产站名pb) 公牛品种多。公牛号z心生产总数军支持七次a8.2 包装字;号音或二走毒草纱布袋，每忽辈辈数不得越过10在份。5 GB 4143.，.2号08F带录A规范性隙缝)毒草体公牛Z盖章素质量量监督抽样设事章程序A.1 本的录绘出牛冷冻粮液质量豆豆苦苦才由样检手章程序，对Jlt特定对象产品，在!母戴监督将通过执中平检验是对孩在学公牛;或i辛寄去爱量深铃。-例酬由耐棚陆也A.2 质量草草主管始样枪验程序人
13、2.1 确定监督总体革开确定的孩馁总f泊在主丰富为每建立位产人2.2确定冻精产;东粮产品的A. 2. 3 学始每个样品，A.2.吉判断监督帮主吉普监督居室去过主金桥本结果我才羊本中不合格品放d牛不会幸各岛建立d小子不通过到j泼数r.挂IJd，A.2. 10 I主翔实i9f数介于菜在耳委交15482-1仰5咿5.9的魏定捻md均dj亥监督总体为不ilJJ跑过;中羊卒，钱你为可通过。放3过监督统称检验评价有草草5台头公牛(l率将)产品，则监督!没毅水平队工工10、第二:二;监督丰毒草金等级的报i样方案，我袋2宁;可耐5白的知j和D1=5必行查得所在昏拾样L市委较为11=扫毒，r=2.，从lli督总
14、体支支群公牛)中随极毅i骂支4头公叶立(东幸毒)将占主检驳，幸?反中不合格公牛珍稀均数小子2，Npdr，则j步l该群体公冻精)nJ通过;辛苦支笔咕了不含1告公牛王东移)的数不小子2，即d二，Ji1U判该群体公斗二(冻糖不通过GA. 2.11 监督抽样方案均遂过概率均捻验功效对监督;远称为案的通过楼主事与丰敢在最功效泼且这GBT15482-1仰3帘的统6章执行。4 挥挥录B (去辈?在性常录牛守E草草曹滚质窒检验方法本附去丢给了i运用的牛冷冻精液质续非命输方法。B.l 抽样B. 1. 1 中宇航的收辈革抽样gi主搀z嚣.1.之1主1-f安才名称哥主5.1.1日.2剂量检辈辈B.2.1 :t:.宴
15、器材小试管、剪刀UB.2.2 检蜜方法取三支级专雪冻辈辈窃幸轰然其辛苦苦变量。B. 2. 3 计算三支冻辅的剂盘平均数为样品的剂量，按式队1)计然zQ = Tlj十11，斗叫一3 式中zQ一剂量m.单位为i!lJHmL);n, 第一支样品fllJ:l袭，总仅为主益于专(mL);级2一一第二支然.pJIJ空袭，驳我Z为主慧芳(mL); 11，一第二支样品消簸，总&5如您多1(mL), GB 4143-2号08入新鲜液氮，讲:脱离液氮，1. 0 mL吸管准确吸取粮液，并.(怒.1 ) 5 GB 4143-2008 B.3 辈辈子活力检查且3.1 变革要器材主主微镜jjI电苍苍主运磁装置、rn辈革永
16、远去籍、5.0mL主运智、钱玻片草草草富裕没状板、王直液片08注:18)、身边微镜夺最恶毒稻草立恒源数毅、彩?苦。B.3.2 梭轰方法二三文编号零分别直接室主子刀。C水浴小然在菜，浓解冻兰兰:交混合后然液织:50L童麦子建立军史片上主自主辈革主片，立即右巨款4舞台温度保梅38c始情况下用200毛主-400倍显徽谈谈察活力，也巧滚过电视最徽过宪章主军3二委主?毛廊上观察活力。每样片观察3个视野，并J.L;监察不同液烧肉的幸妻子运动状态，迸行全苦苦苦.B.3.3计算三个视野?劳力评价簇的平均数按式(五2)计算:主运9，IY1-i蓄力;n, 多事卢萨视野1;5力pn，一第二二视野lfr力;fl 多蒋
17、兰兰淡紫j卖力。B.4 毒草剂量前进滋翁精子数检查菇.4. 1 主要辈辈革才M= (B. 2) 血球计数较、盈色素号音、1mL吸餐，小试管、计委立移、盖过激镜或电主竟然在提装置、智慧号牙、3.0%氯化最白:容注重。8.4.2 主盘查方法生自管精液周到注f豆豆营管准确骂柔软20Ln解冻然滚(也可佼网络旦.2章已非散去费;三吉吉祥品)，派人盛苍白，吉8mL的3，辛辛.化纳溶液价议辛苦F号，且匀，俊之成为50f背手带粹的事草琴手输液。将备好你应王求计数极用现釜片将计数笠主主好，用小吃政管吸取一君毒草莓辛苦丰富液于血辈辈声宁边缘，便将孩说行流人计数声援，均匀充满，不允许有气去过成肆度过大，然i名E显微
18、镜下线电视荧光应手上淡察计数。B. 4. 3 计算a) 每J!J釜命将于数=5个命方稿中的椅子数X5(&P计荣立交夜25个中方格的总黯子妻女)XIOO mm 内的精子建立)X 1 OOO(将是毫升将挥重的椅子数)X5号(纷繁稀释倍数)X剂最值仨飞E吁简化为2甏M肇中精于建立5个中方将稻子室主X250万(绚管)xJfJH最低b) 辛辛辛羊品观察上下两个计数线，取平均彼.主骂声可个计数豆豆计数线果误差走毫没5%，则应置在峻。c) 每齐tl宣言时提前进运动手寄予爱支援式(队3)计算:c=sX甜王吃市z一怨说量中前设主运动幸妻子数，兵再f就为个:俨一f等于111签字幸运气F数，单较为个罗棋一一活力.%
19、在. ( B.3 ) B.5 幸雷子腾到草率的检查B.丘1婆器材豆豆徽镜、载玻芳、罪证球分类tt荣立苦苦、技、吸管、滚滚水、经姆雷条主持料、磷酸二氢伪、磷酸氢二钧、Iflll墨、甲8 董事、1t1窍，淡然谈到为分析然8.5.2 流淌滚普通在辈辈毅然意爱*荒草卖菜专毒(Naf王必0， 2H,0) 0.55 g 然轰轰轰实力统(Na，f王PO，.121名。)2.25 g 豆豆浆然水主运若辛苦在100mL。如才掉它主争遥远之主运然墨登慈善运是台%FJl毒室HCHO(主主陈露宫室主看瓷器辈辈辈中秘过滤)8.0 mL 掷燃二工然专辑CNaH，PO， 2H,Q) 0.55军事睡在辈辈革二锁CNa，HPO,
20、 12圣王，0)2 25 g GB 4143-2008 J!l o.指%雪运化锁约旦台.号血L草草童车frj加入8.0mL宁和后主专罕辈辈，衷于部队89%氟化幸运滚滚寇军李100.白mL，c) 极支母萨盖在挥更娘生母萨革是靠1. 0g 1才?自C3H，(OH)，S号.0mL fjl撞事(CH，O日)6号.0mL 姬虫母萨染料放入研钵中加少量甘泊充分研磨至元颗粒为止，然后将全t泳金荡然人并主文人告艾滋然可争保揽生院续溶解4h，再加甲醇充分溶解混匀，过滤后贮子棕色践中待用，贮按时问越久染色旁竟然辈辈虫子给d) 妮姆萨染液姬姆萨E在液磷酸盐缓冲液蒸惚水现四己现用G8.5.3 和j片、染色、镜检、计算
21、2.0 mL 3.0 mL 5.0 mL 精液解冻见巴.3，允许同时使用椅子活力校登解冻的佯占百。a) 抹片=取解冻后精液一滴滴于载玻片一端，J!l Jl一边缘先，t骨的数理克Jt与平等你泌的辈辈革主片经35央角，将样品均匀地拖布于载玻片上，自然风平(约5mn) ，怨样队制作附个除片。b) 圈定:在己风干的抹片上满上1.0 mL2. 0 mL中I:丰高尔马林凶到2液.则立在15min)运用挂号水缓缓冲去固定液.吹干或自然风干。c) 染色2将固定好后的抹片反.jU夜辛苦有乎榕的有机程是消iiJ二，:J巴嫩姆萨浓浓I向于械和抹片之间，让其充满平播并使抹片主要触染液，染色1.5hfd月3泼水喜爱支援
22、J中宏3住在菜，陈子仰赖。d) 镜检z将?如j备好的抹片在豆豆敛饺(4仍然-600倍)下观察，住每个t来对观察200个以上的精子分主豆、右两个原)，主主两片的平均辈革，号片iiJ字系数不符火子20%，幸?翻过应釜新制片。e) 幸妻子黯丑王军事按王运.4)计算A阳会X100 .( B.4 ) 主立中:J生李妻子重毫彤等茧，只;A，-黯?罢辛苦子数，主葬仪;每个gS 专辈子总、数，主事立为个。GB 41432008 B.6 主茹苦富数的检辈革泳队1主裹著器材培养靠自、辈革净化工作会、三角烧瓶、辈辈杯、笠筒、道主楼、天平、牛角匙、高泼泼汽灭商谈绞徽波炉、培养E蓝、水费辛格、pH试进去(pH5.59.
23、 0)、棉花、牛主运纸、记号辈革、将绳、纱布、放大臻、兰卡9普普查膏、蛋窃丢东、磷酸氢工:仰、主主化钧、丑事脂粉、1缸。!L氢氧化钧、1础。lIL就酸、蒸毒室主IcB.6.2 培养蔡的就毒草普通琼腑的创作=牛肉苦墨绿蛋白膝谈宫室去盖二梆儿HPO. 3H, 寄电化钩(NaCD用蒸滚水1000mL 灾愤恨刷刷个精啦?一使特班子皿讨阴市B. 6. 3 辈辈查方法灭菌孚豆豆豆装:数字血肉p把已孩?犀合均匀，内菌荒草委堂。( B.5 ) 王运仁:8 C.l 附录C(规范性附录)种公牛的晶种代号浓浓云录毒者添了慈爱军事举主号公牛品矜代号cC、2轰然军在方法i兰举占主辛辛;在专幸言又以j汉该名单慧的第4斗争、第二字和品主去fjlj1，苍苍然:I!牛在专1Ri?lJ 2:丹麦主王成C.3 兑运交C.L公牛品种荷斯坦牛抄在百瓦娟珊丰西门达尔兼用短角草原红牛新疆褐牛三河牛民用短角夏洛来海福特安格!ili策j木苦苦主草累主E主革等主辛结，主王楼来怒在HXD LL GB 4143-2008 ，以谈JN FZ ML NL JH BL ND 辈辈凶数牛DGH 盖在只知UIIMB 9
