1、ICS 67.040 C 53 中华人民共和国国家标准2003-08胃口发布GB/T 5009.151-2003 代替GB/T17337一1998食品中锚的测定Determination of germanium in foods 2004-01-01实施中华人民共和阔卫生变发布中国国家标准化管聘委员GB/T 5009.151-2003 前言本标准代替GB/T17337一1998(食品中镑的测定儿本标准按照GB/T20001. 4-2001标准编写规则第4部分z化学分析方法对原标准的结构进行了修改。本标准由中华人民共和国卫生部提出并归口。本标准第一法负责起草单位g卫生部食品卫生监督检验所g参加
2、起草单位z北京市卫生防疫站、北京进口食品卫生监督检验所。本标准第二法负责起草单位2广东省食品卫生监督检验所，参加起草单位湛江市卫生防疫站、佛山市卫生防疫站。本标准第三法负责起草单位z北京市卫生防疫站。本标准第一法主要起草人z杨惠芬、陈青川、毛红、阎军、车志军。本标准第二法主要起草人z梁春穗、黄妙英、黄明骆、肖兵、陈庆韶。本标准第三法主要起草人，:XtJ师诚、吴国华、杨永红、涂晓明。原标准于1998年首次发布，本次为第一次修订。269 GB/T 5009.151-2003 事l言微量元素错具有抗癌、抗衰老及改善人体免疫等生理功能，尤其是有机错制品在医院、保健领域正在不断开发应用，但无机错毒性较高
3、.为了加强对错制品的卫生监督管壤，必须建立国家标准方法，提供监测手段。270 GB/T 5009.151-2003 食晶中错的测定第-法原子荧光光谱法1 范围本方法规定了采用氢化物发生原子荧光光谱分析技术测定绪的分析方法。本方法适用于各类食品中错的测定及保健饮品中错132和无机铸的分别测定。本方法检出限为3.5ng/mL;标准曲线线性范围为ong/mL100 ng/mLo测定试样中总错时，方法回收率为84.0%93. 2%。测定保健饮品中错-132和元机错时，方法回收率为94.6%103.4%o2 原理2.1 试样中总镑的测定原理z试样经酸加热消化后，在酸性介质中，试样中四价错离子与跚氢化饵(
4、KBH，)或棚氢化销(NaBH，)反应，生成挥发性绪化氢(GeH，)，由载气(氧气)带人原子化器中进行原子化。在特制错空心阴极灯照射下，基态错原子被激发至高能态，在去活化回到基态时，发射出特征波长的荧光，其荧光强度与错含量成正比，与标准系列比较定量。2.2 保健饮品中萨竣乙基错倍半氧化物(即错-132)和无机错分别测定的原理=由于在一定的反应条件下，保健饮品中无机错可以与跚氢化饵(KBH，)或硕氢化锅(NaBH，)发生反应，生成挥发性错化氢(GeH，)，而错132中的错以有机结合状态存在，不能发生类似反应，必须在一定的温度和酸度条件下，经有机破坏后方能测定。因此可以在不同的实验条件下，分别测得
5、出试样中总销和无机绪的含量，然后利用减差法算出错-132的含量。3 试剂3.1 硝酸(优级纯。3.2 硫酸(优级纯)。3.3磷酸。3.4 30%过氧化氢。3.5 氨水(优级纯)。3.6 磷酸溶液。十4)，量取50mL磷酸，缓缓倒入200mL水中，混匀。3.7 氢氧化何溶液(2g/L)，称取2g氢氧化饵，溶于1000mL水中混匀。3.8 跚氧化例溶液(8g/L)，称取8.0g棚氢化饵，溶于1000mL 2 g/L的氢氧化饵溶于中，临用现配。3.9 铐标准溶溶液3.9.1 准确吸取错的国家标准溶液(GSBG62073，浓度1mg/mL)5. 0 mL.移入100mL小烧杯中，加入几滴过氧化氢，几滴
6、氨水，稍加热至微沸，冷却，移入100mL容量瓶中，用水稀释至呈现度，混匀，此溶液每毫升相当于50月错。3.9.2 准确称取光谱纯二氧化错。.0720g于250mL烧杯中，加水约100mL.加热洛解后，移入1000 mL容量瓶中，加硫酸溶液。十1)10滴，用水稀释至刻度，混匀，此液每毫升相当于50E错.3.10 错标准使用液(500ng/mL)，用移液管吸取错标准溶液(50g/mL)2mL，移入200mL容量瓶中，用水稀释至刻度，混匀，此溶液浓度为500ng/mLo 4 仪器4.1 双道原子荧光光度计。271 GB/T 5009.151-2003 4.2 电热板。5 分析步骤5.1 试样制备粮食
7、、豆类除去杂物和尘土，碾碎过40目筛。水果、蔬菜、肉、水产类洗净晾干，取可食部分制成匀浆。5.2 试样中总错的测定5.2.1 试样消化称取干样1.00 g2. 00 g或鲜样5.00g于150mL锥形瓶中，加3粒玻璃珠，加10mL15 mL硝酸、2.5mL硫酸，盖表面皿放置过夜。次日置于电热板上加热.在加热过程中，如发现溶液变成棕色，则需将锥形瓶取下，补加少量硝酸。当溶液开始胃白烟时，将锥形瓶取下，稍冷后，缓慢加入1mL过氧化氢，加热，重复两次，以除去残留的硝酸，并加热至自烟出现。将锥形瓶取下，冷却。将溶液移入25 mL容量瓶中，加入5mL磷酸，用水稀释至刻度，摇匀。同时做试剂空白试验.待测。
8、5.2.2 标准系列配制分别吸取500ng/mL错标准使用液1.00 , 2. 00 , 4 , 00 , 6. 00 , 8. 00 mL于50mL容量瓶中，加人10 mL磷酸，用水稀释至刻度，混匀。各自相当于错浓度10.00，20.00，40.00，60.00，80.00ng/mL. 5.2.3 测定5.2.3.1 仪器参考条件z负高压，410V，灯电流，80mA，原子化器z温度875C，高度8.5mm，氢气流速2载气450mL/min，屏蔽气1000mL/min，测量方式g标准曲线法，读数方式:峰面积z延迟时间21. 0 S，读数时间，10.0Sl跚氢化饵溶液加液时间，8.05，标液或样
9、液加液体积:2mL。5.2.3.2 测定方法s根据实验情况任选以下一种方法.浓度测定方式测量z设定好仪器最佳条件，逐步将炉温升至所需温度后，稳定10min20 min后开始测量。连续用标准系列的零管迸样，待读数稳定之后，转人标准系列测量，绘制标准曲线。转入试样测量，分别测定试样空白和试样消化液，每测不同的试样前都应清洗进样器。试样测定结果按式。)计算。仪器自动计算结果方式测量，设定好仪器最佳条件，在试样参数画面输入以下参数:试样最(g或mL)，稀释体积(mL)，并选择结果的浓度单位，逐步将炉温升至所需温度，稳定后测量。连续用标准系列的零管进样，待读数稳定之后，转入标准系列测量，绘制标准曲线。在
10、转入试样测定之前，再进入空白值测量状态，用试样空白消化液进祥，让仪器取其均值作为扣底的空白值。随后即可依次测定试样。测定完毕后，选择打印报告即可将测定结果自动打印。5.3 保健饮晶中无机错和错132的分别测定移取保健饮品或其稀释液1.0 mLc-5. 0 mL(如体积不足5mL应加水补足至5mL)于150mL锥形瓶中，加3粒玻璃珠，加5mL磷酸，盖上表面皿，在电热板上加热至微沸。将锥形瓶取下，冷却。将溶液移入25mL容量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀。同时做试剂空白试验。待测。测定方法同5.2.2和5.2.3。此时测得的值为试样中的无机错含量，试样中总错的测定方法同5.2，试样中错-132的含量(
11、以错计)为总错的含量减去无机错的含量。5.4 结果计算按式(1)计算gnu AU nu-A EU -A 一lv一一、J-anu2-A-1 二1-m A一(-X . ( 1 ) 式中X一一试样中锚的含量，单位为毫克每千克(毫克每升mg/kg(mg/L)J, Al一一试样消化液测定浓度，单位为纳克每毫升(ng/mL);GB/T 5009. 151-2003 A，一一试剂空白液测定浓度，单位为纳克每毫升(ng/mL)，V 试样消化液总体积，单位为毫升(mL)，m一一-试样质量(体积)，单位为克(毫升)g/(mL)。注g总错的吉量和无机锚的吉量接式(l)计算，二者的差值再乘以2.338即为错.132的
12、吉量。5.5 精密度在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的5%。第二法原子吸收分光光度法6 范围本方法规定了采用原子吸收光谱分析技术测定食品中错的分析方法。本方法适用于各类食品中总错的测定及保健饮品中无机锚的分离测定.本方法检出限为40pg，线性范围为ong/mL-200ng/mL. 7 原理试样经处理后导人原子吸收分光光度计石墨炉原子化器中，经原子化后，吸收其265.2nm共振线，其吸收量与储量成正比，再与标准系列比较定量。B试剂8.1 硝酸及2mol/L硝酸。8.2 盐酸。8.3 2 mol/L氢氧化饵溶液g称取11.2 g氢氧化饵，加水溶解，并稀释至100mL
13、。8.4 三氯甲烧。8.5 氯化铁溶液g称取20.0g氯化铁(FeCI， 6H，O)，加水溶解，并稀释至100mL。8.6 过氧化氢。8.7 钮盐溶液z称取1.00 g氯化钮(PdCl，)于100mL烧杯中，加入20mL硝酸，5mL盐酸，加热溶解后加入45mL硝酸，冷后加水至600mL. 8.8错标准溶液称取O.1441 g二氧化错溶于50mL 2 mol/L氢氧化饵溶液中，用水定容至1000 mL，此溶液每毫升相当于0.1mg错.8.9 错标准使用液2吸取1.00 mL错标准溶液，置于100mL容量瓶中，加5mL 2 mol/L硝酸溶液，用水稀释至刻度，混匀飞此溶液每毫升相当于1月错。9 仪
14、器9.1 石墨炉原子吸收分光光度计及错空心阴极灯。9.2 微波消解仪及聚四氟乙烯消解罐。9.3 电热板。9.4 500 mL蒸馆装置。10 分析步骤10.1 测定总错试样处理10. 1. 1 粮食、豆类、蔬菜、蛋类g粮食、豆类除去杂物，碾碎过20目筛，蔬菜洗净晾干，蛋类洗净去壳，取食用部分捣成匀浆。10. 1. 1. 1 微波消解2称取均匀试样0.5g-1. 0 g，置于微波消解罐内，加2mL-3 mL硝酸，1mL过GB/T 5009.151-2003 氧化氢。旋紧罐盖并调好减压阀后消解。微波消解程序160W. 10 min, 320 W. 10 min,480 W. 10 mino消解完毕放
15、冷后，拧松减压阀排气，再将消解罐拧开。将溶液移入25mL容量瓶中，加2mL钮盐溶液，加水稀释至刻度，混匀。同时做试剂空白.待测.10. 1.1. 2 电热板消解z称取均匀试样0.5g-1. 0 g于150mL锥形瓶，加15mL-20 mL硝酸，盖表面皿放置过夜。置于电热板上加热至近干。放冷后加2mL-4 mL过氧化氢再加热至近干，放冷。将溶液移入25mL容量瓶中，加2mL钮盐溶液，加水稀释至刻度，混匀。同时做试剂空白。待测。10. 1. 2 饮料、固体饮料及矿泉水z称取均匀试样0.5g-l g于25mL比色管中，在再加2mL硝酸，沸水浴中加热10min。放冷后加2mL钮盐溶液，用水稀释至刻度，
16、同时做试剂空白。待测。10.2 测定保健饮晶中无机错饮晶处理吸取2mL均匀试样500mL蒸馆瓶中，加入20mL盐酸.2mL水.1mL氯化铁溶液。轻轻摇匀浸泡，室温下放置20min，装上冷凝管，接收管中预先装有50mL三氯甲统作吸收液。采用冰浴冷却吸收液。小火加热蒸馆瓶，使溶液保持微沸。接收管中应维持有连续的小气泡，蒸馆25min后取出吸收管。将吸收液移入125mL分液漏斗中，加入2mL盐酸轻轻振摇120次，静置分层。分出三氯甲炕于另一分液漏斗中，弃去盐酸层。加10mL水于三氯甲统提取液中，振摇120次，分出水溶液于25mL容量瓶中，再加10mL水重复萃取一次.合并两次水溶液，加入0.5mL硝酸
17、.2mL铠盐溶液，加水稀释至刻度，混匀。同时做试剂空白。待测。10.3 测定精密吸取0.00.1，00.2.00.3.00.4.00.5.00mL错标准使用液，分别置于25mL容量瓶中，各加0.5 mL硝酸.2mL但盐溶液，加水至刻度(各容量瓶中每毫升相当于0、40、80、120、160、200ng销)。将处理后的试样液，试剂空白和标准溶液分别导人石墨炉原子化器进行测定。测定条件g波长265.2 nm.狭缝0.4nm，灯电流10mA.热解石墨管。石墨炉升温程序g干燥.80C-120C.30s;120C -300C .20 S;灰化.300，c 30 S; 1 200 C. 20 s，原子化.2
18、700C .3 s(可根据仪器型号，调至最佳条件以错含量对应的吸光度，绘制标准曲线比较。10.4 结果计算按式(2)计算zAU nu-AU吟AVIF 一v-x 一、J-AHU2-A-1 二1-m A一(-X ( 2 ) 式中zX 试样中错的含量，单位为毫克每千克(毫克每升)mg/kg(mg/L)J; A 试样液测定浓度，单位为纳克每毫升(ng/mL);A, 空白液测定浓度，单位为纳克每毫升(ng/mL);V一一试样质量总体积，单位为毫升(mL), m一一试样质量.(体积).单位为克(毫升)g(mL)J。按10.1处理的试样液测定结果为总错含量.按10.2蒸馆分离的试样液测定结果为元机错。从测定
19、的总错含量减去无机错含量为样品中有机销含量。第三法苯基荧光嗣分光光度法11 范围本方法规定了食品中无机绪和有机错经离子交换树脂分离后采用苯基荧光酣比色测定的分析方法.本方法适用于各类食品中无机错和有机绪的测定。274 GB/T 5009. 151-2003 本方法的检if:I限为以Ge#)告.25c标浓重量线线位范费量为在严g-5g;方法回收率为88.0%-105%，12 原混试草草经处理后，和j艰辛苦COOHJ盖始717装阴离子树黯毒草吸黯有钱绪化合物理富不被娇宠机绪化食物的作用从而达到将有机错化合物与元机错分离.吸附的有机错化合物用120g/L氮氧化铺溶液解析并经硝酸w硫酸消化后再与苯基荧
20、光嗣反应显色于512nm处进行比色量。13试剂13.1 :J巳饥铸标准液g称取氧化错(GeO，含量99.9的%)0.144g f费4，g/L氢氧化锵溶浓10mL加温溶解，再加入盐酸。+119)10mL进行中和，并在容撒瓶中加水稀稀至100mL，此溶液每毫升含1mg 错(Ge)，l自用时加水稀释至每毫升含1g错(Ge)。13.2 有机错(Ge-132)标准液z称取有机错(Ge-132，含量99.99%)0.234草，用4草/L氢氧化锁溶液10 mL加温溶解，加入就酸溶液0+119)10mL，并在容量瓶中.m水稀稀至1)0mL.J比溶液每毫升含1 mg镣(Ge)，I脑用时用水稀释至每曦升含1E错(
21、Ge)若结果乘以2.34则为有机错(Ge-132)tJ，13.3 苯基荧光阁榕液s称取苯基荧光酬60mg用8mL盐酸(1201. 18 g/mL)及乙醇溶解并稀释3在100 mL。13.4 忿酸滚滚0+妙。13.5 氮氧化纳溶液020g/L)。13.6 醋酸榕液。+的.13量7四氯化碳，13.8 阴离子交换树腾控器备z取约20在717强磁饺阴离子树瓣，经处理转型为(CH，CO)翠，辈辈校备用。13.9 阳离子树脂柱i!ltJ备s取约20日Amberlite CG-1201树脂，经处观后装柱备用。14 仪铸分光光度计。15 分析步骤15.1 斌籍处理15. 1. 1 矿泉水类试样s取试样一定11
22、:约0.5mg-10 mg铐(Ge汀，宽兹通过阴离子树脂交换栓，流速控制在15滴/min，左右，弃最初流出液约10mL后，将滤液收集于100mL容量瓶，并用水淋洗柱滤液为100mL(此水洗液供测定无机诸用)，排出多余的水溶液后加入120g/L氢氧化铺溶液30mL，流速仍为15满/扭扭左右，并继续用水I#t克至滤液为50mL为止。骂呈上述氢氧化镇滤液10.0mL予魏民瓶中加硫酸(120= 1. 84)5 mL，硝酸(120居1.40 g/ mL)5 mL进行消化，最后稀释至100mL，取1mL-5 mL进行显色测定。15. 1. 2 含色素、糖，蛋白质的液体试样s取试样一定量C约含0.5附-10
23、g绪(Ge)J以每分钟约10漓速度先通过l!Il离子交换柱，并以水撞车没收集滤液大约50mL为止，然后将滤液按吉普述方法15.1. 1 遂行。15.1.3 固体试样s粉碎过筛(80目)，称取1日-5日试样约含0.5mg-lO.mg错(Ge)J，加入放酸。+119)20mL于60C保温2h，加入4g/L氢氧化销溶液20mL，浪匀后离心(3000r/min)15 min，分275 GB/T 5009. 151-2003 取上清液，再用约10mL水洗沉淀一次，合并上清液，然后按上述(15.1.2)法进行。15.2 显色测定15.2.1 无机错的测定吸取以上制备的水洗液1mL5 mL视铐(Ge)含量而
24、定于50mL分液漏斗中加水补足至5.0 mL，再加入15mL盐酸(p20= 1. 18 g/mL) ，放置约10min后，加人临时配制的100g/L亚硫酸氢销榕液。1mL，混匀后再加四氯化碳榕液10.0mL，振摇约2min，待分层后，分取囚氯化碳层备用.取苯基荧光圈溶液1mL于10mL比色管中，加入上述四氯化碳溶液5.0mL，并用乙醇补足至10 mL，混匀，放置10min后于512nm波长进行比色。15.2.2 有机锚的测定吸取消化液1mL5 mL视错(Ge)含量而定于50mL分液漏斗中加水补足至以下同15.2.1无机错的测定相同。15.3 标准曲线的制作吸取无机错标准溶液(1g/mL)O.0
25、 , 0. 5,1. 0 , 2. 0 , 3. 0 , 4. 0 , 5. 0 mL，按上述15.2.1操作显色，制备标准曲线。15.4 计算结果15.4.1 元机错计算见式(3): 式中gX=A，-A2) X 1000 m X V,/V2 X 1000 X一一试样中错的含量，单位为毫克每千克(毫克每升)mg/kg(mg/L)，A，-测定溶液中错的浓度，单位为微克(g), A2 空白溶液中错的浓度，单位为微克(g)，V, 测定时所取溶液量，单位为毫升(mL)，只总稀释体积，单位为毫升(mL)，m 测定时所取试样量，单位为克(毫升)g(mL)。15.4.2 有机错计算见式(4): 式中X=A， -A2 ) x 1000 m X V, /V2 X 1 000 X 试样中有机绪的含量，单位为毫克每千克(毫克每升)mg/kg(mg/L) J, A 测定溶液中绪的浓度，单位为微克(g), A2一一空白溶液中锚的浓度，单位为微克(g)，V，一一测定时所取溶液量，单位为毫升(mL)，V2-一一总稀释体积，单位为毫升(mL), m 测定时所取试样量，单位为克(毫升)g(mL)。15.5 精密度在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的10%。276 .( 3 ) .( 4 )
