1、ICS 67.040 C 53 中华人民共和国国家标准GB/T 5009.191-2006 代替GB/T5009.191-2003 食品中氯丙醇含量的测定2006-09-14发布Determination of chloropropanols in foods 中华人民共和国卫生部山斗中国国家标准化管理委员会互相2白07-01-01实施中华人民共和国国家标准食品中氯丙醇含量的测定GB/T 5009. 191-2006 铃中国标准出版社出版发行北京复兴门外三里河北街16号邮政编码:100045网址电话:6852394668517548 中国标准出版社秦皇岛印刷厂印刷各地新华书店经销* 开本880
2、X 1230 1/16 印张1.25 字数36千字2007年2月第一版2007年2月第一次印刷争舍书号:155066 1-28913 定价13.00元如有即装差错由本社发行中心调换版权专有侵权必究举报电话:(010)68533533GB/T 5009.191-2006 前言本标准代替GB/T5009.191一2003(食品中3-氯-1，去丙二酶含量的测定。本标准与GB/T5009. 191一2003相比主要变化如下:?一修改了标准的名称，改为食品中氯丙醇含量的测定); 一一将GB/T5009. 191-2003作为本标准的第一法:并增加第二法和第三法为氯丙醇多组分的测定，包括3-氯-1，乙丙工
3、醇(3臼MCPD)、2-氯-1，3-丙二醇(2-MCPD)、1，3明二氯-2-丙醇(1，3-DCP)和2，3-二氯-2-丙醇(2，3-DCP)本标准第二法修改采用国际分析家学会(AOAC)的AOAC2000.01(采用稳定性同位素稀择的GC-MS方法测定食品及其配方成分中的3-氯-1，2-丙二醇)(Determination of 3-monochloro-1 , 2-pro pane-diol in foods and food ingredi巳ntsby GC-MS using stable isotope dilution technology)。与AOAC2000.01方法的不同之处如
4、下:一一除5氯-1，2-丙二醇(3-MCPD)外，增加了2-氯斗，3-丙二醇(2-MCPD)、1，3-二氧-2-丙醇(1，手DCP)和2，3-二氯-2-丙醇(2，3-DCP)的测定;一-除采用五m代-3町氯-1，2-丙二醇(d5-3-MCPD)外，增加了五焦代-1，3-二氯-2-丙晖(d5-1, 3-DCP)为内标，即双同位素内标的稳定性同位素稀释技术;一一修改了基质固相分散萃取中洗脱榕剂正己烧与乙酷的比例;一一增加了离子阱质谱方法的测定条件。本标准第三法为氯丙醇多组分含量测定的顶空固相微萃取的稳定性同位素稀释气相色谱-质谱方法。本标准的附录A和附录B为资料性附录。本标准由中华人民共和国卫生部
5、提出并归口。本标准负责起草单位:中国疾病预防控制中心营养与食品安全所。本标准参加起草单位z福建省疾病预防控制中心、北京市疾病预防控制中心、沈阳市疾病预防控制中心、江苏省疾病预防控制中心、中国科学院生态环境研究中心。本标准第一法主要起草人:吴永宁、赵云峰、赵京玲、涂晓明、马永建、赵舰、李敬光。本标准第二法主要起草人:吴永宁、赵云峰、付武胜、邵兵、来燕、马永建、江桂斌。本标准第三法主要起草人:付武胜、吴永宁、苗虹、赵云峰、来燕、马永建、邵兵。本标准于2003年首次发布，本次为第一次修订。I GB/T 5009.191-2006 百i氯丙醇(chloropropanols)是国际公认的食品污染物，包
6、括单氯取代的5氯-1，乙丙二醇C3-MCPD)和公氯句1，3-丙二酶C2-MCPD)以及双氯取代的1，3-二氯-2叩丙脖(1，3-DCP)和2，3田氯-1-丙醇(2 , 3-DCP)，其主要指染来掘于酸水解植物蛋白液CHVP)。氯丙醇不仅具有致癌作用，还有抑制精子活性的作用，国际食品法典食品添加剂与污染物委员会(CCFAC)将其列人制标议程。2001年6月，WHO/FAO食品添加剂联合专家委员会(JECFA)第57次会议对3-MCPD的危险性进行评估，根据最敏感的肾脏毒性，提出3-MCPD的暂定每日最大耐受摄入量CPMTDI)为2问(以每千克体重计)，并认为摄入目前污染水平的酱油可能造成健康危
7、害，且ECFA认为1，3-DCP为遗传毒性致癌物，目前不宜制定每日耐受量(TDI)0 鉴于氯丙醇的危害性，许多国家制定了限量标准来控制食品中氯丙醇的市染。欧盟EC466/2001指令规定酱油、HVP中3-MCDP.不得超过20g/峙。有些国家除了规定3-MCPD限量外，还制定了其他氯丙醇组分的控制要求。德国和澳大利亚规定1，3-DCP应低于50g/kgo我国SB10338-2000(酸水解植物蛋白调味液规定HVP中3-MCPD的最大允许限量为1000g/kgo 英国中央科学实验室(CSL)建立食品中3-氯-1，2-丙二醇含量测定的筑代同位素稀释的气相色谱质谱方法，经过6个国家12个实验室的国际
8、协同性试验，被国际分析家学会(AOAC)收载，方法编号AOAC 2000. 010我国经过验证后，修改采用AOAC2000. 01方法，提出食品中3-MCPD含量测定方法，巳颁布为国家标准方法，编号为GB/T5009. 191一2003。由于食品中可能同时存在多组分氯丙醇，为有效控制其含量，需要能够同时测定各组分氯丙醇的分析方法，而目前被广泛采用的AOAC2000.01方法仅能检测3-MCDP，新发展的顶空GC-MS方法也仅能够测定1，3-DCP和2.3-DCP 0本标准在AOAC2000.01方法的基础上进行研制，采用五氧代-3白氯-1，2-丙二醇Cd5-3-MCPD)和五m代-1，3-二氯
9、-2-丙蹲(d;-1，3-DCP)双同位素内标，通过对提取、净化、仪器分析条件优化，建立了对氯丙晖进行多组分同时测定的分析技术，并根据试样制备过程，提出本标准的第二法和第三法。E GB/T 5009.191一2006食品中氯丙醇含量的测定1 范围丙二醇(3-MCPD)含量的测定。第一方便面调昧包等食品中单氯取取代的1，3-二氧-2-丙醇(1，鸡精、7.198%。3.9 d5-3-氯-1，2-丙二醇标准品(d5-3-MCPD)，纯度98%。3. 10 饱和氧化铀榕液(5mol/L):称取氯化铀290g，加水溶解并稀释至1000 mL. 3. 11 正己炕-乙脏(9十1):量取乙酷100mL，加正
10、己烧900mL，泪句。3.12 3-MCPD标准储备液(1000 mg/L) :称取3-MCPD25 mg(精确至0.01mg)，置25mL量瓶中，加正己烧榕解，并稀释至刻度。1) 给出这一信息是为了方便本标准的使用者，并不表示对该产品的认可。如果其他等效产品具有相同的效果，则可使用这些等效的产品。1 GB/T 5009.191一20063.13 3-MCPD中间溶被(100mg/U:准确移取3-MCPD储备破10mL，置100mL量瓶中，加正己烧稀释至刻度。3. 14 3-MCPD系列踏破z准确移取3-MCPD中间榕液适量，置25mL量瓶中，加正巳皖稀释至刻度(橡皮为0.00mg/L、0.0
11、5mg/L、0.10mg/L、0.50mg/L、1.00 mg/L、2.00mg/L、6.00mg/U。3. 15 ds-3-MCPD储备液C1 000 mg/U :称取ds-3-MCPD25 mg(精确至0.01mg) ，置25mL量瓶中，加乙酸乙醋溶解，并稀释至刻度。3. 16 d5 -3-MCPD内标榕被(10mg/U:准确移取出-3-MCPD储备破1mL，置100mL量瓶中，加乙酸乙醋稀释至刻度。4 仪器4. 1 气相色i普质谱联用仪CGC-MS)。4.2 色谱柱:DB-5ms柱，30mXO. 25 mmXO. 25m，或等效毛细管色谱柱。4.3 玻璃层析柱z柱长40cm，柱内径2cm
12、 o 4.4 旋转蒸发器。4.5 氯气蒸发器。4.6 恒温箱或其他恒强加热器。4. 7 涡榄棍合器。4.8气密针，1mLo 5 分析步骤5. 1 试样制备5. 1. 1 被状试样称取试样4.00 g，置100mL烧杯中，加ds-3-MCPD内标榕液。omg/U50L，加饱和氯化铀溶液6 g，超声15min。5. 1. 2 溺料或固体与半固体植物水解蛋白称取试样4.0og，置10omL烧杯中，:11力加日d也5-3町MCPD内标榕、被液(口10mg/L)5OL，加饱和氯化铀溶液6 g，超声1且5町n5. 1. 3 香肠或奶酷称取试样10.00g，置100mL烧杯中，加ds-3-MCPD内标梅被(
13、10mg/L)50L，加饱和氯化铀榕掖30g，由和均匀，离心(3500 r/min)20 min，取上清液10go 5. 1. 4 面粉或淀粉或谷物或面包称取试样5.00 g，置100mL烧杯中，加ds-3-MCPD内标溶液。omg/U50L，加饱和氯化铀溶液15 g，放置过夜。5.2 试样提取将一袋Extrelut20柱填料分为两份，取其中一份加到试样梅液中，混匀;将另一份柱填料装入层析柱中(层析柱下端填以玻璃棉)。将试样与吸附剂的槐合物装入层析柱中，上层加1cm高度的元水硫酸纳。放置15min后，用正己烧币乙酷(9+1)80mL洗脱非极性成分，并弃取。用乙酷250mL洗脱3-MCPDC流速
14、约为8mL/min)。在收集的乙酷中如无水硫酸饷15g，放置10min后过滤。滤液于35C温度下旋转蒸发至约2mL，定量转移至5mL具塞试管中，用乙酷稀释至4mL。在乙酷中加少量无水硫酸饷，振摇，放置15min以上。5.3 衍生化移取试样溶液1mL，置5mL具塞试管中，并在室温下用氮气蒸发器吹至近干，立即加入2，2，4-三甲基戊烧1mL。用气密针加入七氟丁目光基咪瞌0.05mL，立即密塞。涡游混合后，于700C保强20mino GB/T 5009.191-2006 取出后，放至室温，加饱和氧化饷榕被3mL;涡榄混合30s，使两相分离。取有机相加元水硫酸铀约为0.3 g干燥。将榕液转移至自动进样
15、的样品瓶中，供GC-MS测定。5.4 空白试样制备称取饱和氧化铀溶被(5mol!L) 10 mL，置于100mL烧杯中，加出-3-MCPD内标榕被(10mg/L) 50L，超声15mino以下步骤与试样提取及衍生化方法相同(5.2和5.3)。5.5 标准系列溶液的制备吸取标准系列溶液各O.1 mL，加d5-3-MCPD内标溶液(10mg/L) 10L，加2，2，4曲三甲基戊皖0.9 mL，用气密针如人七氟丁眈基咪瞠0.05mL，立即密塞。以下步骤与试样的衔生化方法相同(5. 3)。5. 6 测定5. 6. 1 色谱条件色i普柱:DB-5ms柱，30mXO. 25 mmXO. 25mo 进样口温
16、度:2300C。传输线温度:2500Co程序温度:500C保持1min，以20C/min速度升至900C，再以400C/min的速度升至2500C，并保持5 min。载气:氢气，柱前压为41.4 kPa，相当于6psi。不分流进样，进样体积1L。5.6.2 质谱参数电离模式:电子轰击掘97%。3日o9. 11 d5-3-氯-1，乙丙二酵标准品(d5刁-MCPD)，纯度98%。9. 12 3-氯-1，2-丙二醇标准品。-MCPD)，纯度98%。400 420 440 HFBl)榕SIS)质谱9. 13 饱和氯化铀榕被(5mol/U:称取氯化铀290g，加水溶解并稀释至1000mLo 9. 14
17、氯丙醇标准榕液和五氧代-3-氯归正己烧洗脱试样化试剂，采用四进行分析，内标9.14.1 标准储备榕液(1000 mg/L):分别称取3-MCPD、1，3-DCP或2, 3-DCP 25. 0 mg (精确至O. 1 mg) ，置于3个25mL容量瓶中，加乙酸乙醋榕解，并稀释至刻度。9. 14.2 中间榕液(100mg/L):分别准确移取3种氯丙醇储备溶液1.00 mL，置于3支10mL容量瓶GB/T 5009.191-2006 中，加正己烧稀释至刻度。9. 14. 3 使用港被:准确移取3种氯丙醇中间榕液适量，置于同一25mL容量瓶中，加正己烧稀释至刻度(放度为2.00mg/U。9. 15 氯
18、丙醇内标溶液9. 15. 1 内标储备溶液(1000 mg/L) :分别称取d5-3-MCPD或d5-1, 3-DCP 25.0 mg(精确至0.1mg) , 置于2个25mL量瓶中，加乙酸乙醋搭解，并稀释至刻度。9. 15. 2 内标使用榕液(10mg/L):准确移取出-3-MCPD和d5-1，3-DCP储备液1.00 mL，置于向-100 mL容量瓶中，加正己烧稀释至刻度。10 仪器10. 1 四极杆或离子阱的气相色谱-质谱联用仪CG巳MS)。10.2 色谱柱:DB-5ms柱，30mXO. 25 mmXO. 25m，或等效毛细管色谱柱。10.3 玻璃层析柱:柱长40cm，柱内径2cm o
19、10.4 旋转蒸发器。10.5 氯气哝缩器。10.6 恒植箱或其他恒稳加热器。10.7 涡游混合器。10.8 气密针，1.0 mLo 11 分析步骤11. 1 试样提取11.1.1 酱油等液状试样称取试样4.00g，置100mL烧杯中，加10mg/L内标使用液(9.15.2)20L，加饱和氯化铀榕液至10 g，超声15mino 11. 1.2 香肠等食物试样称取匀浆试样2.00g-5. 00 g，置离IL;管中，加10mg/L内标使用液(9.15.2)20L，加饱和氧化铀榕液至10g，超声15min后，离心(3500 r/min)20 min，取上清液。11. 1.3 醋水解蛋白粉、固体汤料等
20、粉末试样称取试样1.00 g2. 00 g，置100mL烧杯中，加10mg/L内标使用液(9.15.2)20L，加饱和氧化铀榕攘至10g，超声15mino 11. 2 试样净化称取10g Extrelut 20硅藻土柱填料两份，取其中一份加到试样悔液中，搅拌均匀;将另一份柱填料装入层析柱中(层析柱下端填以玻璃棉)。将试样与吸附剂的混合物装人层析柱中，上层加1cm高度的无水硫酸铀。放置15min后，用正己烧40mL洗脱非极性成分，并弃取正己烧淋洗液。用乙酷150 mL洗脱(流速约为8mL/min)，收集乙酷洗脱液。在收集的乙酿中加无水硫酸饷15g，振摇，放置10 min后，过隙，滤液于350C温
21、度下旋转蒸发至约0.SrrlL，转移至5mL具塞试管中，用正己烧洗涤旋转蒸发瓶，合并洗涤液至试管中，并用正己烧稀释至刻度，此为试样提取液。11.3 衍生化将试样提取液(11.2)在室温下用氮气被缩至1.0 mLo用气密针迅速加入七氟丁酷基眯瞌衍生剂50L，立即密塞。涡旋充分漉合后，于750C下保温30mino取出后，放至室温，加饱和氧化铀溶液3 mL;旋涡提合0.5min，静置使两相分离。取上层正己烧加元水硫酸铀约0.3g干燥，静置2min 5 min。将正己烧溶液转移至试样瓶中，供GC-MS测定。GB/T 5009.191-2006 11. 4 空白试样制备称取饱和氧化铀溶被(5mol/L)
22、 10 g，置于100mL烧杯中，加10mg/L内标使用陪夜(9.15.2)20L，超声15min，以下步骤与试样净化、衍生化方法相同(11.2和11.3)。11. 5 标准系列溶攘的制备在预先准备的5个带塞试管中分别加入0.5mL正己;境和10L、30L、80L、150L、250L标准系列榕液，然后分别加入10mg/L氯丙醇内标使用榕破(9.15.2)20L，以正己烧稀释至1.0mL。用气密针加入七氟丁酷基眯瞠50L，立即密塞，振匀。以下步骤与试样的衍生化方法相同(11.3)。11. 6 测定11. 6. 1 色谱条件色谱柱:DB-5rns柱，30mXO.25 rnrnXO.25m， 进样口
23、温度:230C。色谱柱升温程序:50C保持1min，以2C/rnin速度升至9OC，再以4OC/min的速度升至250C，井保持5m川i阳n载气z氮气，柱前压为41.4 kPa，相当于6ps剖i。不分流进样体积:1L。11. 6. 2 质i曾参数11. 6. 2. 1 四极杆质谱仪电离模式z电子轰击源(El)，能量为70eV。传输线温度:250.C.离子源温度:200 oC。分析器(电子倍增器)电压:450 Vo 榕剂延迟:5 min，质谱采集时间:5rnin12 rnin。扫描方式t采用选择离子监测(SIM)采集，各氯丙醇及其内标的定性和定量离子见表1.11. 6.2.2 离子阱质谱仪离子化
24、方式.EI、电子倍增器增益+150V、灯丝电流:50A.阱温度:220.C;传输线温度:250.C;歧盒(menifold)温度:48C 0 榕剂延迟:10. rnin;采用选择离子存储(SIS)采集，氯丙醇及其内标的定性、定量离子见表1。质谱采集条件如下:片断1( d5 - 1 , 3-DCP , 1 , 3-DCP) : 片断2(2，3-DCP):扫描时间段质量数范围10 min12 min m/z 70285 12 min13 min m/z 70260 扫描速率。.53s/次0.51 8/次片断3(d5-3-MCPD、3-MCPD、2-MCPD)13 rnin 15 min m/z 2
25、50-460 0.53 s/次表1监测的氯丙醇及内标特征离子检测要求ds-l, 3啕DCP1,3-DCP 2,3-DCP ds-3-MCPD 3-MCPD 2-MCPD 定性离子，m/z278、280、79、8175、77、275、277253、75、77、169257、278、280、253、275、277、253、289、291294、296、456289、291、453定量离子，m/z278+280 275十27775十77257 253 253 75为基峰，监测离子中至253为基峰，275与277丰少两个离子丰289和291丰定性要求不作规定度比不得大于不作规定不作规定度比不得超过度比
26、不得超过标准溶液相同标准溶液的相理论强度比的离子卒度比的同离子强度比士20%;没有士20%。的土20%。453离子。7 G/T 5009.191一2006选择性离子监视(SIM)或者选择性离子储存(SIS)监测定性质谱图和质量色谱图分别参见附录A中的图A.1、图A.2、图A.3和图A.4。11.6. 3 测定吸取标准榕液和试样溶液1L进样，记录总离子流图以及氯丙醇及其内标的峰面积。11.7 结果计算3-MCPD:计算3-MCPD与d5-3-MCPD的峰面积比，以各标准系列榕液中3-MCPD进样量与对应的3-MCPD与d5-3-MCPD的峰面积比作线性回归，由回归方程计算3-MCPD的质量，按式
27、(2)计算试样中3-MCPD和公MCPD含量，且公MCPD以3-MCPD为参考标准进行计算。1，3-DCP和2，3心CP.计算1，3-DCP或2，3-DCP与出-1，3-DCP的峰面积比，以各标准系列榕班的1，3-DCP或2，3-DCP进样量与对应自告1，eP颤穹窍啃协喝，d5-1 , 3-DCP的峰面积比作线性回归，由回归方程计算1，3-DCP和2，3-DCl?，前商量，按式(2)计算试样中DCP和2，3-DCP的含量。式中:X一一试样中目标A一一试样色谱f一一试样榕掖计m-算-结-加果入表内示j在营一12 精密度在重复性条飞表B.1)。13 原理(d5-3-MCPD)内标榕而后，采用选择离
28、子监测(14 试剂和材料样中甲苯谱分析，以内标法除非另有说明，所用试剂n14. 1 对甲苯磺酸(TSA)。14.2 丙酣(重蒸)。14.3 正己炕(重蒸)。14.4 氧化铀。14.5 氢氧化铀。14.6 盐酸。m kg或g/L)J; 单位为纳克(ng);3-DCP、五姗吃+氯-1，2啊二醇衍生，以空回相微萃取富集14.7 衍生试剂:取一定量对甲苯磺酸，以丙酣配制成0.5g/mL的榕鞭，新鲜制备。14. 8 d5 -1, 3-二氯-2-丙醇标准品(d5-1，3-DCP) ，纯度98%。14.9 1，3-二氯-2-丙酶标准品(l, 3-DCP) ，纯度98%。14. 10 2，3-二氯4咿丙醇标准
29、品(2，3-DC肘，纯度97%。14.11 d5-3-氯-1，2-丙二醇标准品Cds-3-MCPD)，纯度98%。14. 12 3-氯-1，乙丙二醇标准品C3-MCPD)，纯度98%0GB!T 5009.1 9 1-2006 14.13 20%氧化铀榕液:称取氧化饷200g，加水榕解并稀释至1000 mL。14. 14 氯丙醇标准溶液:14.14. 1 标准储备播液(1000 mg!L):分别称取3-MCPD、1，3-DCP、2，3-DCP25. 0 mg (精确至0.1 mg)，置于3个25mL容量瓶中，加超纯水榕解，并稀释至刻度。14. 14.2 中间榕液000mg/L):分别准确移取3种
30、氯丙醇储备破1.00 mL，置于3个10mL容量瓶中，加超纯水稀释至刻度。14.14.3 使用梅准:准确移取3种氯丙醇中间榕液适量，置于同一个25mL容量瓶中，加超纯7J_稀释至刻度，雄度为2.00mg/L. 14. 15 氯丙晖内标静液t14.15.1 内标储备被cl000 于2个25mL容量瓶中，14.15.2 内标使用梅100 mL容量瓶中，加15 仪器15. 1 15.2 色谱柱z15.3 SP岛1E加热装置。15.4恒15. 5 11晶榄泪16 分析步骤16. 1 标准系列标准和内标确加入氯丙醇温(14.15.2)20L， 街生化2):在上50.C保温箱中衍生60SPME萃取、解吸t
31、8. 28. 4之间，加入2g将萃取头纤维暴露在试样70C恒温水恪下顶空吸附45min 质谱分析。16.2 试样制备16. 2. 1 灌体试样和0.5mol/mL氢氧化铀(放入磁力搅拌子，压紧25.0 mg(精确至0.1mg)，置液1.00 mL，置于同一个瓶，磁力搅拌和4 rnL，再分别准mg/L内标使用准润旋擂台30s后，于衍生后溶液pH调节为聚四置乙烯垫的瓶盖，插入萃取头，磁力搅拌器转速调至适当，在口，在240C下解吸5min，进行试样的准备和内标的加入t称取试样8.00 g，置于20mL试管中，准确加人10mg/L内标使用掖(14.15.2)40L，再补加8g试样，用手轻轻振荡，使需液
32、充分泪匀。衍生化飞在试样管中，加入0.5g/mL TSA-丙嗣溶液2.6mL，祸旋充分棍合30S，于50.C保温箱中衍生60min，取出、冷却至室温，备用。2) 仅测1，3-DCP和2，3-DCP时可省略比步。9 GB/T 5009.191-2006 SPME萃取、解吸:取出1/2的衍生榕液于15mL顶空瓶中，并以10mol/mL氢氧化铀CNaOH)榕被调节pH为8.28. 4之间，以下同16.1中SPME萃取、解吸步骤。对于较为帖稠的试样，测定前先用20%氧化铀(NaCD稀释。16. 2. 2 固体试样试样提取和内标加入:称取6.00g固体试样，置于200mL试管中，加入10mL 20%Na
33、Cl潜解，准确加入10mg/L内标使用液(3.15.2)40L，摇匀，放置2h，中途振摇2次3次，以进行氯丙醇的提取。在3500 r/min下离心5min，取上清液用于衍生。衍生化和SPME萃取、解吸操作同液体试样(16.2. 1)。16. 3 空白试样称取饱和氧化铀悟液(5mol/L)8 g，置于20mL试管中，仅加入10mg/L内标使用被(14.15. 2) 40L.以下步骤与液体试样(16.2.1)操作步骤相同。16.4 测定16. 4. 1 色谱条件色谱柱:CP-52 Carbowax柱，30mXO. 25 mmXO. 25m。进样口植度:240.C。色谱柱升温程序:65.C保持1mi
34、n，以10.C/min速度升至170.C，再以40.C/min的速度升至235.C，并保持5min. 载气z氮气，柱前压为55.2kPa，相当于8psi。不分流进样。16. 4. 2 质谱参数电离模式:电子轰击掘(ED，能量为70eV. 传输线温度:250.C。离子源温度:250.C。分析器(电子倍增器)电压:450V. 榕剂延迟时间:3.5min. 质谱采集时间:3.5 minl臼2min 扫描方式:采用选择离子监测(S臼1M)方式采集，各氯丙醇及其内标的特征离子和定量离子见表2。表2氯芮醇及内标的定性和定量离子检测要求ds-3-MCPD 3-MCPD ds- 1, 3-DCP 1, 3-D
35、CP 2,3-DCP 定性离子79、81、140、14275、77、135、13782、8479、8162、64定量离子140 135 84 79 62 140为基峰，135为基峰，82为基峰，79为基峰，79与62为基峰，140与142丰度135与137丰度82与84卒度81卒度比接近3，62与64丰度定性要求比低于标准溶比低于标准溶比低于标准溶且低于标准溶液低于标准溶液液相同离子丰液相同离子丰液相同离子丰相同离子丰度比相同离子丰度度比的土20%度比的土20%度比的土30%的士30%比的士30%选择性离子监测(SIM)定性质谱图和质量色谱图分别参见附录A中的图A.5、图A.6. 16.4.3
36、 jJ!IJ定以顶空回相微萃取(HS-SPME)方式萃取，GC-MS测定，记录各氯丙醇及其内标的峰面积。16.5 结果计算3-MCPD.计算3-MCPD与d5-3白MCPD的峰面积比，以各标准系列播液的浓度(g/kg)与对应的3呵10 GB/T 5009.191一2006MCPD与出-3-MCPD的峰面积比作线性回归，由回归方程计算3-MCPD浓度，按式(3)计算试样含量。1，3-DCP和2，3-DCP:计算1，3-DCP或2，3-DCP与出-1，3-DCP的峰面积比，以各标准系列瘤液的进样量与对应的1，3-DCP、2，3-DCP与ds-1，3-DCP的峰面积比作线性回归，由回归方程计算1，3
37、-DCP和2，3-DCP的质量，按式(3)计算试样含量。IJ一一、，J-儿-mA一，、-一X ( 3 ) 式中zX一一试样中氯丙醇的含量，单位为微克每千克(g/kg); A一一试样色谱峰与内标色谱峰的峰面积比值对应的目标氯丙晖组分的质量，单位为纳克(ng); A。一一一空白试样中氯丙醇的质量，单位为纳克(ng);f一一稀释倍数;m一一加入内标时的取样量，单位为克(g)。计算结果表示到三位有效数位。17 精密度在重复性条件下获得的两次拍立测定结果绝对差值不得超过算术平均值的20%参见附录B中的表B.2)。11 GB/T 5009.191-2006 附录A(资料性附录)检测的质谐固和质量色谱圄在本
38、标准推荐色谱-质谱条件下检测氯丙醇的质谱图和质量色谱图。图A.l为采用四极杆质谱仪测定的氯丙醇及其内标HFBI衍生物SIM质谱图、图A.2和图A.3为标准和样品榕液中氯丙醇及其内标HFBI衍生物SIM质量色谱图、图A.4撼扇离剖监赠仪测定的氯丙醇及其内标HFBI衍生物的选择离子储存(S1S)色谱图、图A.5柳面也-SPME-GC/抢忽视I的标准榕液和加标酱油中氯丙醇及其内标的S1M质谱图、图A.6为原因HS-SPM是副M星测定的试挣唰标后氯丙醇的SIM色谱图。12 l 70 % 80 100 120 140 75 100 %寸77。80 100 120 253 % 289 275 291 a)
39、一一-ds-1, 3-DCP; b)一一斗，3-DCP;c)一一一2.3-DCP;d)一一出-3-MCPD;e)-一-3-MCPD;f)一一-2-MCPD。e) f) 图A.1 四极杆质谱仪分析的氯丙醇及其内标HFBI衍生物SIM质谱图m!z GB/T 5009.191-2006 Sl 9.807 100 1 . -;.:. lon: 253 j 3-MCPD % 1J o IiTiTiiTITiii-riTIii-ri Tili-ririil-iiTirlriTii-riTIjj-i1 I Sl 100 d5-3-MCP lon: 257 % 。%01 n、M唱Elon: 75 Sl 100
40、 lon: 275 % 。S1 100 % 。100 % 。100 % 。100铜/ / 10n: 75 % 。lon: 275 丁平凡1:i _ -,A d5- 1, 3-DCP 10n: 278 6. 500 10.000 mIn 8.500 9.000 9.500 7.000 7.500 8.000 圈A.3酱油样晶申氯丙醇HFBI衍生物SIM质量色i蕾圄囚极杆质谱仪13 GB/T 5009.191-2006 14 kCounts 2 kCouots 3 2 1 0 kCouots 15 10 5 1, 3-DCP 11 12 lons: 278. 0十280.。loos: 275. 0
41、+277. 0 1005: 75.0+77.0 lons: 253.。13 14 mm 固A.4氯丙醇标准HFBI衍生物选择离子储存(SIS)色i曹圈(离子阱质谱仪)135140 100寸?100%10081|100% m li广% 49.5%iJ I 0i ,jt jllii 1 ttii川jiiI I i iI i i ii 1 t ij iI , ij i Ii i i iI i ii , 1 ,1m/z 0H3l2S.SH36It%n1 1 1 1 1 1 1 1 1 .1. 1|3in3/.Z 84% 80 90 100 110 120 130 80 90 1O 110 120 13
42、0 140 75 135 M _ 140 100寸，100%100100% :83.6% 岳二世142 % -1 3-MCPD标准1_37 % ds-3-MCPD仲阳79 :1. 98% 11:33% V;1. 8% 17 o 1.IIIiliijiliiliiqijliiiliiiiiililliililliiijilililild mlz 0 80 90 100 110 120 130 80 90 100 110 120 130 140 a) b) 82 19 100唱r100:100% 49.8% %-1 加标酱泊28.2% % 加标酱汹81 84 。mlz 82 83 84 79 80
43、 81 82 _ 79 100呼r100 100% :100% ds-1 , 3-DCP标准30.1% 1, 3-DCP标准34.81% 84 % 81 。m/z 82 83 84 79 80 81 c) d) 圄A.5标准和加标酱油中氯丙醇及其内标的SIM质i普圄CHS-SPME-GC/MS)GB/T 5009.191-2006 100 % 。100 % 。62 62 62 :100% 62 :100% a)一-3-MCPD;b)一一-d5-MCPD;c)一一-d5-1，3-DCP; d)一一一1，3-DCP;e)一一-2，3-DCP;f)一-2-MCPD。加标酱泊63 2. 3-DCP标准
44、63 e) 65% 64 mJz 64 47.7% 64 mJz 64 % 1J5 9. 81% 77/ 。80 90 圄A.5(续)135 酱油公MCPD137 / |32.6% mJz 100 110 120 130 f) 2. 3-DCP 1:1 %1 1. 3-DCP 。!)、J2轧l句-3-MCPD4.845 100寸l1 l3-MCPD %才1.I_ 。二JI . I . J目. 1. l , , , l , I l , , 5.000 6.000 7.000 8.000 9.000 10.000 11.000 mm 圈A.6试样加标后氯丙醇的SIM色i蕾圄CHS-SPME-GC/
45、MS)CON-2.gomH阁。附录资料性附录)准确度和精密度B GB/T 5009.191-2006 表B.l的精密度数据是按照GB/T6379(测量方法与结果的准确度正确度与精密度)的规定获得的实验室间重复性和再现性的数值。表B.1 酱油试样精密度试验结果FAPAS酱油CDC质控酱油指标1，3唰DCP/3-MCPD/ 1,3-DCp/ 2, 3-DCP/ 3-MCPD/ 2-MCPD/ (g/kg) (g/kg) (g/kg) (g/kg) (mg/kg) (mg/kg) 估计均值(m)23.3 22. 97 101. 3 109.3 22.36 2.36 重复性标准差(S，) 2.08 0
46、.91 4. 76 12. 62 0.96 O. 19 再现性标准差(SR)2.08 1. 09 10. 32 15.46 1. 39 0.28 重复性限()5.82 2.55 13. 3 35. 3 2. 69 0.532 再现性限(R)5. 83 3.05 28.9 43.3 3.88 O. 784 矗表B.2的精密度数据是按照GB/T6379的规定获得的实验室间重复性和再现性的数值。表B.2实验室间协同性验证结果的重复性和再现性比较统计项目英国FAPAS酱油CDC质控酱油3-MCPD 1, 3-DCP 3-MCPD 1, 3-DCP 2, 3-DCP FAPAS全球统计值/(g/kg)4
47、4.0 25.6 - c e MSPD-GC-MS结果/(g/kg)b- - 22.4 101 109 均值(m)/(g/kg)48.8 28.5 19.2 103 105 重复性限(r)/(g/kg)9.46 5. 06 3.00 30. 2 33. 1 再现性限(R)/(g/kg)10. 1 11. 1 4.94 43.0 33. 5 重复性标准差(S，)/(g/kg) 3.38 1. 81 1. 07 10.80 11. 81 再现性标准差(SR)/ (g/kg) 3. 60 3. 95 1. 76 15. 34 11. 97 重复性(RSD，)6.9% 6.3% 5.6% 10.5%
48、11. 2% 再现性(RSDR)7.4% 13.9% 9.2% 15.0% 11. 4% RSD, (Horwitz)理论值8.3% 9.0% 3.4% 8.4% 8.4% RSDR (Horwitz)理论值12.6% 13.7% 5.1% 12.8% 12.8% 重复性CHoY0.83 O. 70 1. 65 1. 25 1. 33 再现性(HOR)d0.59 1. 01 1. 79 1. 17 0.89 浓度单位:mg/峙。. a b 为国内实验室采用基质团相分散萃取法测得的结果。c 表示没有该值。d HORRAT值(HoHon)低于2.。表示协同性结果符合要求，低于1.0表示结果理想。侵权必究等版权专有书号:155066 1-28913 13.00 JG 定价:5009.191
