1、ICS 11.100 C 50 中华人民共和国卫生行业标准WS/T 463-2015 血清低密度脂蛋白胆固醇检测Measurement of serum low density Iipoprotein cbolesterol 2015-06-23发布2015-12田31实施飞?iy止?忡中华人民共和国国家卫生和计划生育委员会发布前本标准按照GB/T1.12009给出的规则起草。吉在司本标准主要起草单位z武汉大学中南医院、北京医院老年医学研究所、北京医院。本标准起草人z周新、郑芳、陈永梅、陈文祥、王抒、董军。WS/T 463-2015 I WS/T 463-2015 血清低密度脂蛋白胆固醇检测1
2、 范围本标准规定了血清低密度脂蛋白胆固酶测定及其质量保证的基本原则。本标准适用于实验室的血清低密度脂蛋白胆固酶测定，也供有关体外诊断厂商参照使用。2 术语和定义下列术语和定义适用于本文件。2. 1 分析系统analytical system 适合对某检验项目在规定浓度范围内给出分析结果的一组按规定条件使用的仪器和装置，包括试剂和物品。注1:对于I临床生物化学检验，分析系统主要由按规定条件使用的仪器、试剂和校准物组成.注2:其他标准如GB/T22576-2008)中的类似概念为检验程序，但检验程序包括更广泛内容，对于本文件，分析系统相当于检验程序的分析部分.注3:改写ISO/IEC导则99:20
3、07，定义3.2.2.2 验证verification 提供客观证据，考虑任何测定不确定度，说明给定事物满足规定要求。ISO/IEC导则99:2007，定义2.44J注1:本标准主要是指分析系统的验证，即某分析系统在本实验室的性能是否与规定性能指标或厂商提供的性能指标一致.注2:有关概念是确认(validation) ，即规定要求满足指定用途的验证，本标准的验证包含确认的含义.2.3 低密度脂蛋白胆固醇low density Iipoprotein chol四terol，LDL-C 应用经典的分离和定义脂蛋白的超速离心法，按密度从低到高将脂蛋白分为乳廉微粒(CM)、极低密度脂蛋白(VLDL)、
4、中间密度脂蛋白(IDL)、低密度脂蛋白山L)和高密度脂蛋白(HDL)等。血清LDL是指密度1.019kg/L-1.063 kg/L的脂蛋白，以LDL中的胆固蹲(LDL-C)物质的量浓度(mmol/L)表示。血清LDL-C浓度的传统单位是mg/dL , mg/ dL换算为mmol/L的换算系数为0.0259 (1 mmol/L = 1 mg/dLXO.025 9)。3 LDL-C的生物学特性和临床意义我国人群血清LDL-C第5百分位数和95百分位数分别约1.5mmol/L和4.3mmol/L. LDL-C 个体内生物学变异约8%，个体间生物学变异约26%。LDL-C主要用于动脉粥样硬化性心血管病
5、危险分析。LDL-C升高是心血管病危险因素。国内外成人血脂异常防治指南都以降LDL-C作为心血管病患者降脂治疗的第一目标。划分LDL-C采用固定切点，LDL-C 400mg/dLC4.52 mmol/L)茹某典异常脂蛋白血症的标本。显然，用此公式计算LDL-C的可靠性受TC、TG、HDL-C三项指标测定质量的影响。5 样晶采集与处理5.1 采用血清进行LDL-C分析。5.2 患者准备和血液样品采集应满足以下要求Ea) 患者在采集样品前应处于稳定代谢状态gb) 患者在采集样品前至少2周内保持通常饮食习惯，保持体重稳定$0 患者在采集样品前24h内不进行剧烈体育运动pd) 患者在采集样品前禁食约1
6、2h; 的患者在采集样品前坐位休息至少5min; f) 静脉穿刺过程中止血带使用不超过1min。5.3 样品处理与存放应满足以下要求za) 血液样品保持密封，样品管处垂直状态，封口朝上sb) 血液样品管轻取轻放，避免剧烈震荡，防止引起溶血，。血液样品在采血后1h2 h内离心，分离血清，含促凝剂采血管可在更短时间内离心参照采2 WS/T 463-2015 血管说明书); d) 分离的血清样品在分析前保持密封Ee) 血清在室温下的存放时间不大于4h.若需贮存4h-48 h.应存于4C环境，若需更长时间贮存，应置于一70C以下环境E血清不可反复冻融。6 分析系统6. 1 分新系统选择6. 1. 1
7、根据实验室实际情况选择适宜类型分析系统，主要包括仪器、试剂和校准物，若采用半自动仪器，还包括适宜的移被设备和温育设备等。注1:仪器主要分自动和半自动仪器，目前多数实验室采用自动生化分析仪，小型实验室可能采用半自动分析仪.注2:可见下列类型分析系统z一一封闭系统，仪器、试剂和校准物来自同一厂商，供配套使用，见于部分使用自动分析仪的情况z一一开放系统，试剂和校准物来自同一厂商，供配套使用，仪器另选.见于部分使用自动分析仪的情况和使用半自动分析仪的情况s组合系统，仪器、试剂和校准物来自不同厂商或机构，由实验室自己组合，见于部分使用自动和半自动分析仪的情况.6.1.2 宜尽量选用封闭系统或开放系统，必
8、要时，可使用组合系统。注，使用组合系统的理由，可能是有证据表明配套校准物缺乏可靠性，也可能是其他合理原因.6.1.3 宜尽量选用分析结果可溯源至公认参考系统(参见附录A)的分析系统。注1:美国疾病控制预防中心(CDC)胆固蹲参考方法实验室网络(CRMLN)运行LDL-C分析系统溯源认证计划，该计划j用多份40)患者血清将常规方法直接与参考测定程序或指定比对方法对比.CDC在其网站保持有效期内的混过认证的分析系统列表.注2:还可以有其他溯源方式.GB/T21415-2008对临床检验量值溯源原理及要求做出说明.6.2 分析系统使用封闭系统和开放系统，应按厂商说明使用t使用组合系统，或对分析系统做
9、其倘改变(如各种分析参数、条件或方式等).需有充足理由，并需对分析系统性能进行充分验证(兑6.的。6.3 分街系统性能指标分析系统应达到下列性能指标za) 所测的分析物与LDL-C定义(见2.3)一致，一般情况下不受其他血清成分的明显干扰(特异性); b) 分析结果的总变异系数小于4%精密度); c) 分析结果的偏倚在士4%范围内正确度); d) 测定范围1.2mmol/L-9.0 mmol/L. 6.4 分桥系统性能验证任何新选用的分析系统，在用于患者样品检验前，应进行性能验证。可采用的验证程序参见附录B。下列情况应验证6.3所列全部性能ta) 采用封闭系统或开放系统，厂商未给出6.3所列之
10、性能指标zb) 采用封闭系统或开放系统，厂商给出的性能指标不满足6.3之要求$0 采用组合系统或做过改变的分析系统:d) 采用封闭系统或开放系统，厂商给出6.3所列之性能指标且符合要求时，可仅验证正确度。3 WS/T 463-2015 7 质量控制和保证7.1 应根据工作经验、行业交流、科学文献等选用性能可靠的分析系统(主要是试剂和校准物品牌)。应尽量保持使用同种分析系统，不宜随意、经常更换分析系统。7.2 应进行内部质量控制。质控品应适宜用于脂蛋白分析，足够均匀、稳定，浓度在医学决定水平附近，至少两个水平$应尽量长期保持使用同种质控品，不宜经常更换质控晶s每批检验至少分析一次质控品。洼，有些
11、商品生化质控品由于来源、组成、性质等原因，可能不适宜用作LDL-C质控品.自制、足量、-70c以下温度保存的新鲜冰冻血清是LDL-C的良好质控品.7.3 应参加经卫生行政管理部门认定的室间质量评价机掏组织的临床检验室间质量评价。8 结果报告应以我国法定计量单位mmol/L报告LDL-C测定结果，需要时，另外给出传统单位mg/dL结果。以mmol/L为单位的结果保留小数点后2位有效数字。检验报告应注明医学决定水平，需要时，另外注明参考区间。LDL-C升高的判断，需考虑分析变异、个体内生物学变异及检验次数等因素。4 A.1 参考方法附录A(资料性附录)LDL-C参考体系WS/T 463-2015
12、LDL-C尚无国际公认的参考方法。国际影响较大的LDL-C参考方法是美国疾病控制与预防中心(CDC)的超速离心/肝素-锤沉淀/AK胆固蹲测定法。-定量法。此法用5mL血清在1.006kg/L的密度下超速离心离心条件:40000r/min(离心力105OOOg) ,4 C ，18.5日，切割中部离心管，去除血清中密度小于1.006kg/L的组分顶部组分，主要为极低密度脂蛋白VLDL和乳廉微粒CM)，将底部组分(主要为HDL和LDL，简称LHDL)完全转移到5mL容量瓶中，定容。准确吸取2mL底部组分到试管中，用80L肝素(5000U/mL)和100L氧化锺(1.0mol/L)选择性沉淀LHDL中
13、的LDL，离心分离上清中的HDL.用CDC的胆固蹲参考方法AK法测定LHDL和HDL中的胆固蹲(LHDL-C和HDL-C)，自LHDL-C中减去HDL-C得LDL-C.A.2 参考物质LDL-C没有国际公认的参考物质。美国国家标准与技术研究所(NIST)的参考物质1951b有LDL-C的参考定值，定值方法为美国CDC的伊定量法。我国有国家质量监督检验检疫总局批准的3种冰冻人血清LDL-C闰家一级标准物质(GBW09178 ,GBW 09179.GBW 09180)。A.3 参考系统的应用方式及应用范围参考系统的应用方式包括应用参考物质或应用参考测定程序。LDL-C参考系统主要应用于以下方面za
14、) 分析系统的溯源和质量评价Eb) 试剂的制备及质量评1ft;c) 校准物质的制备、定值及质量评f)-;d) 新常规方法的发展及评价Fe) 室间质评计划中的靶值确定sf) 胁作研究中血脂分析的质量保证。5 WS/T 463-2015 附录B资料性酣录LDL-C分新系统性能验证B.1 特异性、精曹度和测量范围评价B.1.1 概述采用分割样品对比评价特异性、精密度和测量范围，收集合适样品，用待验证分析系统和另一分析方法(对比方法)同时分析样晶，比较分析结果。B.1.2 样晶收集至少10份病人血清样品，浓度在测量范围内基本均匀分布，每份血清分装3份，形成3套样品，密封一70C保存。B.1.3 对比方
15、法首选参考方法或指定比对方法，不可行时，可选用另种常规方法，最好是不同原理的方法，且有证据证明是性能可靠的方法，如经CRMLN认证的方法。B.1.4 实瞌过程上述3套样品，分3次独立实验，用待验证方法和对比方法分析LDL-C。B.1.5计算B.1.5.1 计算每份病人样品待验证方法3次分析结果的变异系数(CV).计算所有病人血清结果的平均CV.B.1.5.2 计算每份病人样品两种方法3次分析结果的平均值，计算每份病人血清待验证方法结果的偏倚和绝对偏倚，计算所有病人血清结果的平均偏倚和平均绝对偏倚。8.1.6 性能判断若平均cv小于4%.平均偏倚在土4%内，则分析系统精密度、特异性和测量范围符合
16、要求。8.2 正确度评价B.2.1 若B.1实验中的对比方法为参考方法或指定比对方法.B.1.6结果同时说明正确度符合要求。8.2.2 若B.1实验中的对比方法是常规方法，用待验证方法分析有证参考物质或其他符合要求的参考物质至少3次，计算分析结果平均值与参考物质定值的差值(偏倚).若在士4%内，正确度符合要求。6 WS/T 463-2015 参考文献lJ WS/T 225-2002 临床化学检验血液标本的收集与处理2J GB/T 22576-2008 医学实验室质量和能力的专用要求3J GB/T 21415-2008 体外诊断医疗器械生物样品中量的测量校准品和控制物质赋值的计量学溯源性4J B
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