1、ICS 65. 020. 30 B 44 GB 中华人民共和国国家标准dEE 4llnHU 4lnunu nunuL nHUn/一ny一?-7AH户hv41t户。户hv户hu4l，nJ内/n/nuvnudnudnHdnHUanME A斗A斗nt叮lAEE,ABEt-JV 干中4E，nRUAAAA吁户hu户hunkuphunJn/nJnJ nudn叫JvnHdnwdAH.an-AAAAIda-aESEAt-,AEE TTTT JffJ/fJ/JIf BBBB GGGG 实验动物微生物学检测方法(2)Laboratory animal一-Microbiological examination -m
2、ethods 2001 - 08 -29发布2002 - 05 -01实施中华人民共和国国家质量监督检验检菇总局发布GB/ T 14926. 12- 2001 前本标准是对GB/T14926.12-1994(实验动物嗜肺巴氏杆菌检验方法的修订。本标准根据近年来对嗜肺巴斯德杆菌研究结果，对其生物学特性作了部分修改，增加了乙酸铅纸条法检测硫化氢的产生以及血清玻片凝集试验。42 本标准由中华人民共和国科学技术部提出并归口。本标准起草单位:中国实验动物学会。本标准主要起草人:李红。本标准于1994年1月首次发布。中华人民共和国国家标准实验动物嗜肺巴斯德杆菌检测方法1 范围Laboratory anim
3、al-Method for examination of Pasteurella pneumotropica 本标准规定了实验动物嗜肺巴斯德杆菌的检测方法。本标准适用于小鼠、大鼠、豚鼠、地鼠和兔嗜肺巴斯德杆菌的检测。2 引用标准GB/ T 14926.12-2001 代替GB/T14926. 12- 1994 下列标准所包含的条文，通过在本标准中引用而构成为本标准的条文。本标准出版时，所示版本均为有效。所有标准都会被修订，使用本标准的各方应探讨使用下列标准最新版本的可能性。GB/T 1492 6.42-2001 实验动物细菌学检测标本采集GB/T 14926.43-2001 实验动物细菌学检测
4、染色法、培养基和试剂3 原理嗜肺巴氏杆菌为革兰阴性小杆菌，主要寄居于啃齿类和兔类的上呼吸道，该菌具有特殊的生化反应，菌体可与相应的免疫血清在玻片上形成肉眼可见的凝集反应，据此可进行该菌的分离培养和检测。4 主要设备和材料4. 1 普通恒温培养箱。4.2 生物显微镜。5 培养基和试荆5. 1 血琼脂平皿。5.2 双糖铁或三糖铁琼脂。5. 3 DHL琼脂平皿。5.4 硝酸盐还原试验培养基。5. 5 西蒙氏拧攘酸盐琼脂。5.6 蛋白陈水、桂基质试剂。5. 7 尿素培养基。5. 8 乙酸铅纸条。5. 9 氧化酶试剂。5.10 过氧化氢酶试剂。5. 11 嗜肺巴斯德杆菌诊断血清。中华人民共和国国家质量监
5、督检验捡症总局2001-08 -29批准2002 - 05 -01实施43 GB / T 14926. 12- 2001 检测程序玻片凝集试验。目琼脂平皿生长情况半固体动力试验生化反应自或叶的问培养基氧化酶过氧化氢酶试验7. 1 采样采取呼吸道分泌物或病灶组织或服汁。7.2 分离培养将接种的血平皿置(36士l).C培养18Z4h。7. 3 鉴定7. 3. 1 菌落特征血琼脂平皿上(36土l).C培养18-24h可形成12mm、光滑露滴样或灰白色、不溶血或轻微溶血的菌落。纯培养物堆集时呈现黄色，质地似奶油。7.3.2 菌体特征革兰阴性小杆菌，两端钝圆并浓染，在生长初期也可见较细长的杆菌。7. 3
6、. 3 双糖铁或三糖铁培养基上(36土l)C培养18-24h，斜面产酸，底层产酸或不变色，不产气，乙酸铅纸条法显示硫化氢阳性。操作步骤7 44 GB/ T 14926. 12- 2001 7. 3. 4 生化反应大量接种情况下多数菌株产生能基质。明胶液化试验阴性。硝酸盐还原试验阳性、尿素酶阳性、过氧化氢酶阳性、氧化酶弱阳性。7. 3. 5 纯培养物接种DHL培养基(36士1)C培养24h不生长，延长培养时间在大量接种区可长出极小菌落。半固体动力试验阴性。7.3. 6 本菌与多杀巴斯德杆菌和支气管鲍特菌的鉴别见GB/T14926.5-2001中表1。7. 3. 7 血清玻片凝集试验阳性。8 结果
7、报告凡符合上述各项检测结果者作出阳性报告，不符合者作出阴性报告。45 FCON-导.N叮!叮叮.Nm叮CON-5.N叮俨问筒。OONi止.N叮!.N叮FCON-.N白叮!二N叮俨同阁。同阁。同阁。华人民共和国家标准实验动物微生物学检测方法(2)GB/T 14926.1-14926.6-2001 GB/T 14926.8-14926.17 2001 国中GB/T 14926.41-2叫01GB/T 14926.44-14926.49 2001 中国标准出版社出版北京复兴门外三里洞北街16号邮政编码:100045电话:68523946中国标准出版社秦皇岛印刷厂印刷新华书店北京发行所发行各地新华书店经售68517548 普* 印张6字数180千字2002年2月第一次印刷开本880X12301/16 2002年2月第一版印数1-2000峰7巳定价45.00网址书号:155066 1-18097 也略595-547 版权专有侵权必究举报电话;(010)68533533科目GB/T 14926. 1-2001 H
